新たな配列設計による高特異性・低オフターゲットの次世代siRNA ON-TARGETplus 2.0 siRNA

高いノックダウン性能を維持しながら、オフターゲット効果の低減を目指して設計された次世代siRNA製品です。最新のトランスクリプトーム情報を反映した配列設計と独自のデュアルストランド修飾技術により、特異性、実験間の一貫性、ならびにトランスクリプトアイソフォームカバー率の向上を図っています。

※ Dharmacon製品（メーカー略称：DHA）につきまして、2023年4月1日より製品ご注文時にHandling Fee（手数料）を本体価格とは別にご請求させていただきます。詳細は「Handling Feeについてのご案内」をご確認下さい。
※ Horizon｜Dharmacon製品をご注文いただくには、事前にユーザー登録が必要です。ご注文方法の詳細はこちらをご覧下さい。
※ 本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

遺伝子1種類に対して、機能性と特異性の高い4種類のsiRNAをデザインしています。それぞれのsiRNAを3種類のフォーマットで提供しています。

商品コードをクリックすると価格表をご覧いただけます。容量によって商品コード中の末尾は異なり、下記のいずれかの数字が入ります。
※ 2 nmol：0002、5 nmol：0005、10 nmol：0010、20 nmol：0020、50 nmol：0050
※ Horizon Discovery社のご注文Webサイト⇒ 「ON-TARGETplus 2.0 siRNA」

次世代ON-TARGETplus 2.0 siRNA用のバリデート済みコントロールsiRNAです。優れた特異性とオフターゲット作用の低減を両立し、シングル型・プール型から選択可能です。信頼性の高いsiRNA実験をサポートします。

品名をクリックするとHorizon Discovery社のご注文Webサイトを、商品コードをクリックすると価格表をご覧いただけます。容量によって商品コード中の末尾は異なり、下記のいずれかの数字が入ります。
※ 5 nmol：05、20 nmol：20、50 nmol：50

品名をクリックするとHorizon Discovery社のご注文Webサイトを、商品コードをクリックすると価格表をご覧いただけます。

U2OS細胞またはHCT-116細胞に、AHCY遺伝子（左）またはPRDX1遺伝子（右）を標的とする25 nMの本製品（2.0）または従来のON-TARGETplus、あるいはノンターゲティングコントロール（NTC）siRNAを導入した。トランスフェクションには、DharmaFECT 4（U2OS細胞）またはDharmaFECT 2（HCT-116細胞）を0.2 μl/wellで使用した。48時間後にTotal RNAを回収し、RT-qPCRにより相対遺伝子発現量を測定した。各遺伝子の相対発現量は、ACTBをハウスキーピング遺伝子としてΔΔCq法で算出し、NTCに対して正規化した。本製品（2.0）および従来のON-TARGETplusのいずれにおいても、標的遺伝子の良好なノックダウンが認められた。

U2OS細胞に、TP53遺伝子を標的とする25 nMの本製品（2.0）および従来のON-TARGETplus、あるいはノンターゲティングコントロール（NTC）siRNAを、DharmaFECT 4（0.2 μl/well）を用いて導入した。
A. 48時間後にTotal RNAを回収し、RNA-seqまたはRT-qPCR用に調製した。4つのsiRNA処理群すべてでTP53 mRNA発現の顕著な低下が認められた一方、全体の遺伝子発現は対応するNTC siRNAと比べて大きく変化しなかった。
B. RT-qPCRにより相対遺伝子発現量を測定した。TP53の相対発現量は、ACTBをハウスキーピング遺伝子としてΔΔCq法で算出し、NTCに対して正規化した。いずれのsiRNAでも、TP53の良好なノックダウンが認められた。

U2OS細胞またはHEK293T細胞に、YY1AP1遺伝子を標的とする25 nMの本製品（2.0）および従来のON-TARGETplus、あるいはノンターゲティングコントロール（NTC）siRNAを導入し、48時間後にTotal RNAを回収してRNA-seqまたはRT-qPCR用に調製した。
A. U2OS細胞における全転写産物の発現分布をTPMで示した。4つのsiRNA処理群すべてでYY1AP1 mRNA発現の顕著な低下が認められた一方、全体の遺伝子発現は対応するNTC siRNAと比べて大きな変化はなかった。なお、従来のON-TARGETplus siRNAではオフターゲット遺伝子であるGON4Lの発現低下も認められたが、本製品（2.0）ではGON4L発現に影響は認められなかった。
B. RT-qPCRにより相対遺伝子発現量を測定した。各遺伝子の相対発現量は、ACTBをハウスキーピング遺伝子としてΔΔCq法で算出し、NTCに対して正規化した。いずれのsiRNAでも標的遺伝子の良好なノックダウンが確認されたが、GON4Lの発現低下は従来のON-TARGETplus siRNAでのみ認められた。

トランスフェクション試薬でsiRNA試薬を導入するだけで、簡単にLoss-of-Function（機能喪失）実験を行うことができます。
実験では、あらかじめポジティブおよびネガティブコントロールsiRNAを用いてトランスフェクション条件の至適化を行うことが、実験成功の鍵となります。
siRNAは必ずRNaseフリーの溶液に再溶解して下さい。5×siRNA Bufferを1×に希釈して使用することをおすすめします。保存期間が短い場合はRNaseフリー水を用いることができます。

Horizon | Dharmacon製品をご注文いただくには、事前にユーザー登録が必要です。
初めてご注文いただくお客様はユーザー登録・ご注文方法の詳細をHorizon | Dharmacon製品 ご注文方法でご覧下さい。
ユーザー登録済みのお客様はID（メールアドレス）とパスワードでHorizon Discovery社のWebサイトトップページでログインして、製品を検索・ご指定の上ご注文下さい。

※ Horizon Discovery社Webサイトの利用には、Google ChromeおよびSafariが推奨されています。