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AAV産生時に感染力および品質を向上させるヘルパープラスミドとRepCapプラスミド pPLUS AAV Packaging
掲載日情報：2024/07/10 現在Webページ番号：70746
rAAV（Recombinantadeno-associated virus、組換えアデノ随伴ウイルス）産生において、お手持ちのTransgene Plasmidに☞ pPLUS AAV-Helper（ヘルパープラスミド）と☞ pPLUS AAV-RC Range（Rep/Capプラスミド）を組み合わせた☞ トリプルトランスフェクション法に最適化されたpPLUS AAV Packagingを用いることにより、高品質で感染性の高いrAAVを高収量で得ることができます。
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トリプルトランスフェクション法とは
カチオンポリマーを用いたpDNAのトリプルトランスフェクション
rAAVを産生するための最も確立された方法は、3つのプラスミドの同時トランスフェクションが必要です。1つは目的遺伝子（GOI、Gene of interest）をコードするトランスジーン、もう1つはパッケージングプラスミドです。
トリプルトランスフェクションプロセスにおいてrAAV産生に用いられるプラスミド
- トランスジーン：治療効果のための目的遺伝子を含み、宿主細胞において発現を可能にするために2つのITR（Inverted Terminal Repeat）が挟まれている。
- pHelper：ウイルス複製に必要な「ヘルパー」機能をコードする。
- pRep/Cap：ウイルス複製に必要なタンパク質（Repタンパク質）、カプシド構造（VP1、VP2、VP3）、およびアクセサリタンパク質（AAP、MAAP）をコードする。
AAVウイルスベクターは、非病原性ウイルス由来で自己増殖能がなく、アデノウイルスなどのヘルパーウイルスとの共感染でAAVウイルス粒子を産生します。そのため、Rep/Capプラスミドと共にヘルパープラスミド（rAAVの複製とカプシド形成を支援するための遺伝子を含む）がトランスフェクトされます。GOIをウイルス粒子にパッケージングするためには、これらの2つのプラスミドが必要となります。ヘルパープラスミドには、通常、rAAV複製に必要なアデノウイルス遺伝子（E1A/B、E2A、E4、およびVA RNA）が含まれています。ただし、単純ヘルペスウイルス（HSV）やヒトボカウイルス（HboV）など、他のウイルスもヘルパーウイルスであることが知られています。
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pPLUS AAV-Helper
e-Zyvec技術とは
従来のクローニングの多くは、マルチクローニングサイト（Multi-Cloning Site、MCS）を含むあらかじめ決められたプラスミドの骨格に依存しています。この方法は多くの研究室で用いられていますが、一方でMCS以外の領域での改変は難しいため、配列や構造の最適化に制限があります。より多くの核酸ベースの治療法が開発され、臨床段階に移行する中、治療の有効性と効率性を考える上で、プラスミドのサイズだけでなく、プラスミド全体の正確な設計の重要性が、良く認識されるようになりました。
Polyplus社のe-Zyvec技術は、独自のプラスミドの構築方法により、複雑なコンストラクトを簡単に入手することが可能となります。具体的には、プラスミド全体をいくつかの線状DNAフラグメントとして設計し、ワンステップの酵素反応でそれらを完全長のコンストラクトとして構築します。この操作で用いる個々の線状DNAフラグメントは、最大限のアセンブリ成功率を可能にするPolyplus社社内開発のソフトウェアを使用して、プラスミドエンジニアリングのスペシャリストによって注意深く設計されます。
これにより、既存のバックボーンに限定されずにオーダーメイドのプラスミドを作成したり、元のプラスミドの任意の領域をタイムリーな最適化を行うことが期待できます。
pPLUS AAV-Helperベクター情報
特長
- ウイルス粒子の感染力（TU/ml）および品質（full/empty比）が向上します。
- ☞ FectoVIR-AAVとの併用に最適化されています。
- PEIproおよびその他のトランスフェクション試薬とも併用できます。
- さまざまな細胞株における、さまざまな血清型（セロタイプ）のAAVの産生に適しています。
- カナマイシン耐性遺伝子を有しています。
- 商用などに際し、ライセンスおよびロイヤリティーの必要はありません。
使用例
FectoVIR-AAVの併用によるAAVの産生量と感染力の向上
さまざまな血清型（セロタイプ）における力価（VG/ml）と感染力（TU/ml）の向上
HEK293由来のさまざまな細胞株におけるAAV2の力価の向上
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pPLUS AAV-RC Range
pPLUS AAV-RC Rangeベクター情報
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特長
使用例
pPLUS AAV Packagingと他社とのウイルス力価比較
pPLUS AAV Packagingと他社とのAAVの感染力比較
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関連製品
- ☞ PEIpro（ウイルスの大量産生に最適なPEIベースのトランスフェクション試薬）
ウイルス産生に特化したトランスフェクション試薬です。 トランスフェクション効率のロット差が極めて少なく、安定したタンパク質およびウイルスの産生が可能です。アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス（AAV）、レンチウイルス、タンパク質などの大量産生に最適です。 - ☞ FectoVIR-AAV（ラージスケールのAAV産生に特化したトランスフェクション試薬）
HEK293細胞にAAVベクターを導入するためのトランスフェクション試薬です。浮遊培養HEK293細胞を用いた組換え体アデノ随伴ウイルス（AAV）の一過性発現（大量産生）に最適です。
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価格
pPLUS AAV-Helper
[在庫・価格 ：2024年10月22日 20時55分現在]
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[在庫・価格 ：2024年10月22日 20時55分現在]
pPLUS AAV-Helper
文献数： 0
- 商品コード：101000181
- メーカー：PPU
- 包装：1mg
- 価格：¥39,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：2週間程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | ※購入時に専用の同意書の提出が必要です。 PEIproやFectoVIR-AAVなどのトランスフェクション試薬と併用することで、産生AAVの感染力（TU/ml）や品質（full/empty比）が向上するヘルパープラスミド。さまざまな細胞における、さまざまな血清型（セロタイプ）のAAV産生に有用。 |
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| 保存条件 | -20℃ | 法規備考 | |
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pPLUS AAV-Helper
文献数： 0
- 商品コード：101000182
- メーカー：PPU
- 包装：10mg
- 価格：¥382,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：2週間程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | ※購入時に専用の同意書の提出が必要です。 PEIproやFectoVIR-AAVなどのトランスフェクション試薬と併用することで、産生AAVの感染力（TU/ml）や品質（full/empty比）が向上するヘルパープラスミド。さまざまな細胞における、さまざまな血清型（セロタイプ）のAAV産生に有用。 |
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| 保存条件 | -20℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
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pPLUS AAV-Helper
文献数： 0
- 商品コード：101000183
- メーカー：PPU
- 包装：100mg
- 価格：ご照会ください
- 在庫：無(未発注)
- 納期：2週間程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | ※購入時に専用の同意書の提出が必要です。 PEIproやFectoVIR-AAVなどのトランスフェクション試薬と併用することで、産生AAVの感染力（TU/ml）や品質（full/empty比）が向上するヘルパープラスミド。さまざまな細胞における、さまざまな血清型（セロタイプ）のAAV産生に有用。 |
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pPLUS AAV-RC Range
[在庫・価格 ：2024年10月22日 20時55分現在]
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[在庫・価格 ：2024年10月22日 20時55分現在]
pPLUS AAV-RC2 RD
文献数： 0
- 商品コード：101000214
- メーカー：PPU
- 包装：1mg
- 価格：¥32,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：2週間程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | ※購入時に専用の同意書の提出が必要です。 |
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pPLUS AAV-RC2 RD
文献数： 0
- 商品コード：101000215
- メーカー：PPU
- 包装：10mg
- 価格：¥306,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：2週間程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | ※購入時に専用の同意書の提出が必要です。 |
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pPLUS AAV-RC2 RD
文献数： 0
- 商品コード：101000216
- メーカー：PPU
- 包装：100mg
- 価格：ご照会ください
- 在庫：無(未発注)
- 納期：2週間程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | ※購入時に専用の同意書の提出が必要です。 |
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