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1型糖尿病の研究に有用なヒト膵β細胞 HLA-A2 EndoC-βH5(Human Cell Design社)

掲載日情報:2024/01/25 現在Webページ番号:70725

細胞表面にHLA-A2(ヒト白血球抗原A2)を発現したヒト膵β細胞です。高いインスリン産生能を有する一方、インスリン前駆体ペプチド特異的CD8+T細胞によって障害を受けます。1型糖尿病における自己免疫反応のモデル細胞として有用です 。

特長

  • インスリンを産生する単一(>99%)の細胞集団です 。
  • 細胞表面にHLA-A2を発現しています。
  • 継代や分化誘導の必要がなく、一定期間培養したのち、そのまま各種評価に用いることができます(本細胞は使い切りです )。
  • HLA-A2を発現しないnativeのEndoC-βH5(#BH5-100/BH5-350)と同様の細胞形態、インスリン分泌能、薬剤応答性を示します(下図参照) 。
HLA-A2 EndoC-βH5

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HLA-A2 EndoC-βH5(#BH5-A2-350、本製品)


EndoC-βH5

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EndoC-βH5(#BH5-100/BH5-350


HLA-A2 EndoC-βH5の培養には専用培地(ULTIβ1 Culture Medium)と専用コーティング剤(βcoat)が別途必要です(関連製品参照)。

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使用例

グルコースおよび薬剤刺激によるインスリン分泌

グルコースおよび薬剤刺激によるインスリン分泌

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HLA-A2 EndoC-βH5は高グルコース条件で高いインスリン分泌を示し、GLP-1受容体アゴニストExendin-4によってさらにインスリン分泌が誘導された。

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CD8+T細胞による細胞障害性アッセイ①

CD8<sup>+</sup>T細胞による細胞障害性アッセイ①

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HLA-A2 EndoC-βH5とEndoC-βH5を1:1で共培養し、さらにPPI15-24(インスリン前駆体であるプレプロインスリンの15-24ペプチド) 特異的CD8+T細胞、またはPPI15-24を標的としないCD8+T細胞と共培養した。PPI15-24を標的としないCD8+T細胞はいずれの細胞にも細胞障害性を示さなかったが(左下図)、PPI15-24特異的CD8+T細胞はHLA-A2 EndoC-βH5のみに選択的に細胞障害性を示した(右下図)。

Irrelevant CD8<sup>+</sup> T Cells

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Irrelevant CD8+ T Cells

PPI15-24 CD8 T Cells

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PPI15-24 CD8+ T Cells

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CD8+T細胞による細胞障害性アッセイ②

T細胞による細胞障害性アッセイ②

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HLA-A2 EncoC-βH5とCD8+T細胞を共培養し、細胞障害によって漏出したHLA-A2 EncoC-βH5由来の細胞抽出液量を評価した。PPI15-24特異的CD8+T細胞と共培養した場合は、T細胞の割合(E:T ratio)が大きくなるにつれてHLA-A2 EncoC-βH5由来の細胞抽出液量が増加した。一方、PPI15-24を標的としないCD8+T細胞と共培養した場合は、細胞抽出液量増加は見られなかった。

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HLA-A2 EncoC-βH5によるCD8+T細胞の活性化

CD8<sup>+</sup>T細胞による細胞障害性アッセイ①

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HLA-A2 EncoC-βH5とCD8+T細胞の共培養によって、炎症性サイトカインであるMIP1βの分泌量が促進された(左下図NT)。また、インターフェロンγ/インターロイキン1βによってMIP1βの分泌がさらに促進され(左下図IFNγ/Il1β)、JAK1/2阻害物質であるバリシチニブによって分泌が阻害された(左下図BARI, BARI + IFNγ/Il1β)。
一方、EndoC-βH5とCD8+T細胞の共培養ではMIP1βの分泌に変化は見られなかった。(右下図)。

HLA-A2 EndoC-βH5

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HLA-A2 EndoC-βH5

EndoC-βH5

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EndoC-βH5

HLA-A2 EncoC-βH5によるCD8<sup>+</sup>T細胞の活性化

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関連製品

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品名 製品概要 包装 商品コード
ULTIβ1 Culture Medium (Complet) EndoC-βH5およびその改変細胞用培地 100 ml UB1-100-BSA
βCoat EndoC-βH5およびその改変細胞用コーティング剤 120 μl BC-120
ULTI-ST Glucose Starvation Medium (Complet) EndoC-βH5およびその改変細胞を用いたグルコース刺激インスリン分泌(GSIS)実験用のグルコース不含培地 50 ml UST-50-BSA
βKREBS EndoC-βH5およびその改変細胞を用いたインスリン分泌実験用の緩衝液 250 ml BK-250
100 ml BK-100

HLA-A2 EndoC-βH5を用いたインスリン分泌実験にはULTI-ST Glucose Starvation Medium (Complet)およびβKREBSが必要です。
Human Cell Design社の製品をご購入の際は1回のご注文につき45万円の送料が別途必要となります。送料は品数に依らず一律ですので、細胞発注時には実験に必要な分の専用培地やコート剤も同時にご注文することをお勧めします。


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価格

HLA-A2 EndoC-βH5

[在庫・価格 :2025年04月25日 20時55分現在]

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HLA-A2 EndoC-βH5
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※1回の注文につき45万円の送料が別途必要となります。送料は品数に依らず一律です。 細胞表面にHLA-A2を発現したヒト膵β細胞。高いインスリン産生能を有する一方、インスリン前駆体ペプチド特異的CD8+T細胞によって障害を受ける。1型糖尿病における自己免疫反応のモデル細胞として有用 。※培地・コーティング剤を別途購入いただく必要があります(培地:#UB1-100-BSA,コーティング剤:#BC-120)。
法規制等
保存条件 液体窒素中での保存 法規備考
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HLA-A2 EndoC-βH5

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ULTIβ1 Culture Medium (Complet)
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※1回の注文につき45万円の送料が別途必要となります。送料は品数に依らず一律です。 Endoc-βHおよびその改変細胞の専用培地。
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βCoat
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※1回の注文につき45万円の送料が別途必要となります。送料は品数に依らず一律です。 Endoc-βH5およびその改変細胞の専用コーティング剤。
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掲載カタログ ニュース2023年6月1日号 p.18
ニュース2024年11月1日号 p.13

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ULTI-ST Glucose Starvation Medium (Complet)
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※1回の注文につき45万円の送料が別途必要となります。送料は品数に依らず一律です。 Endoc-βH5およびその改変細胞を用いたインスリン分泌実験に必要な培地。
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βKREBS
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[在庫・価格 :2025年04月25日 20時55分現在]

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ULTIβ1 Culture Medium (Complet)

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説明文 ※1回の注文につき45万円の送料が別途必要となります。送料は品数に依らず一律です。 Endoc-βHおよびその改変細胞の専用培地。
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βCoat

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ULTI-ST Glucose Starvation Medium (Complet)

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説明文 ※1回の注文につき45万円の送料が別途必要となります。送料は品数に依らず一律です。 Endoc-βH5およびその改変細胞を用いたインスリン分泌実験に必要な培地。
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βKREBS

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説明文 ※1回の注文につき45万円の送料が別途必要となります。送料は品数に依らず一律です。 Endoc-βH5およびその改変細胞を用いたインスリン分泌実験に必要な緩衝液。
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βKREBS

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  • 商品コード:BK-250
  • メーカー:HCD
  • 包装:250ml
  • 本製品は取扱中止になりました

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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