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NF-κBに対する各種抗体 Anti-NF-κB p65 Antibody(Affinity Biosciences社)

掲載日情報:2022/03/07 現在Webページ番号:70571

Affinity Biosciences社の、NF-κB p65に対する抗体をご紹介します。特に抗NF-κB p65抗体(#AF5006)は、100を超える多くの文献使用実績があります。
また、抗アセチル化(Acetylated)抗体および抗リン酸化(Phosphorylated)抗体も取りそろえています。


CiteAb図

Affinity Biosciences社は、メーカー横断での抗体等の検索ツールを提供しているCiteAb社主催の2019年と2020年のCiteAb Awardsにおいて、2年連続「Antibody supplier to watch」を受賞しました。この賞は、CiteAbデータに基づいて、過去1年間で抗体の引用数が最も増加したサプライヤーを表彰するものです。

抗NF-κB p65抗体(#AF5006)の使用例

抗NF-κB p65抗体(#AF5006)を用いたウエスタンブロット解析

図1. 抗NF-κB p65抗体(#AF5006)を用いた
様々な試料抽出物のウエスタンブロット解析像

レーン1:抗原特異的ペプチドでブロックしたHepG2細胞(血清飢餓処理)
レーン2:HepG2細胞(血清飢餓処理)
レーン3:HeLa細胞(ヒートショック処理)

抗NF-κB p65抗体(#AF5006)を用いた免疫組織染色像

図2. 抗NF-κB p65抗体(#AF5006)を用いた
ヒト乳がん組織切片の免疫組織染色像

試料をホルムアルデヒドで固定し、クエン酸緩衝液を使用して熱による抗原賦活化処理を行った。次に組織をブロッキング処理し、本抗体(1/100希釈)と共に22℃で1.5時間インキュベートした。二次抗体として、HRP標識ヤギ抗ウサギ抗体を使用した。


抗NF-κB p65抗体(#AF5006)を用いた免疫蛍光染色像

図3. 抗NF-κB p65抗体(#AF5006)を用いたHepG2細胞の免疫蛍光染色像

試料をPFAで固定し、0.1% Triton X-100で透過処理した後、10%血清を使用して25℃で45分間ブロッキング処理した。次に、本抗体およびマウス抗βチューブリン抗体(#T0023)と共に37℃で1時間インキュベートした。
二次抗体として、AlexaFluor 594標識ヤギ抗ウサギIgG(H+L)抗体(赤色)およびAlexaFluor 488標識ヤギ抗マウスIgG(H+L)抗体(緑色)を使用した。
核の対比染色:DAPI(青色)



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NF-κBとは

NF-κBは、ほぼすべての細胞型に存在する多面的な転写因子であり、炎症、免疫、分化、細胞増殖、腫瘍形成、アポトーシスなどの多くの生物学的プロセスに関与する膨大な数の刺激によって開始される一連のシグナル伝達イベントのエンドポイントです。NF-κBは、Rel様ドメインを含むタンパク質であるRELA/p65、RELB、NFKB1/p105、NFKB1/p50、REL、およびNFKB2/p52によって形成されるホモ二量体またはヘテロ二量体の複合体です。ヘテロ二量体のRELA-NFKB1複合体が最も豊富なようです。二量体は標的遺伝子のDNAのκB部位に結合し、また個々の二量体は、識別可能な親和性および特異性で結合できる様々なκB部位に対して明確な選択性を有しています。組み合わせの異なる二量体は、それぞれ転写活性化因子(アクチベーター)または抑制因子(リプレッサー)として機能します。例えば、NF-κBヘテロ二量体のRELA-NFKB1およびRELA-REL複合体は、転写活性化因子として機能します。NF-κBは、翻訳後修飾や細胞内区画化の様々なメカニズム、および他の補因子やコリプレッサーとの相互作用によって制御されます。
NF-κB複合体は、NF-κB阻害物質(I-κB)ファミリーのメンバーと複合体を形成した不活性状態で細胞質に保持されます。従来の活性化経路では、I-κBは様々な活性化因子に応答してI-κBキナーゼ(IKK)によってリン酸化され、その後分解されて、核に移行する活性型NF-κB複合体を遊離します。細胞質での保持を介したNF-κBに対するI-κBの阻害効果は、主にRELAとの相互作用を介して発揮されます。RELAは、NF-κB複合体のDNA結合に直接寄与する可能性のある、弱いDNA結合部位を示しています。
直接的な転写活性化因子としての活性に加えて、プロモーターの転写因子へのアクセスのしやすさを調節し、それによって遺伝子発現を間接的に制御することもできます。DDX1との結合を介して、NF-κBプロモーター領域でクロマチンと結合します。T細胞におけるサイトカイン遺伝子発現に不可欠です。NF-κBホモ二量体のRELA-RELA複合体は、インベイシン(Invasin)を介したIL-8発現の活性化に関与している可能性があります。



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製品ラインナップ

商品コードをクリックすると、各製品の価格表がご覧いただけます。

品名 交差性 免疫動物 適用 標識 商品コード
Anti-NF-κB p65 Antibody ヒト、マウス、ラット、サル ウサギ
(ポリクローナル)
ELISA, IC, IF, IHC, WB 未標識 AF5006
ヒト、マウス、ラット AF0874
ELISA, IC, IF, IHC, IP, WB AF6387
Anti-Acetyl-NF-κB p65 (Lys310) Antibody ELISA, IC, IF, IHC, WB AF1017
Anti-Acetyl-NF-κB p65 (Lys314/315) Antibody ELISA, IHC, WB AF3795
Anti-Phospho-NF-κB p65 (Ser276) Antibody ELISA, IC, IF, IHC, IP, WB AF3387
Anti-Phospho-NF-κB p65 (Ser536) Antibody ヒト、マウス、ラット、サル AF2006

IC:免疫細胞染色、IF:免疫蛍光染色、IHC:免疫組織染色、IP:免疫沈降、WB:ウエスタンブロット


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抗原の3D画像について

Affinity Biosciences社Webでは、抗体各製品のページ(「Datasheet」→「Immunogen Information in 3D」)に、抗原タンパク質の3D画像が掲載されています。詳細については、以下の動画をご覧下さい。
一部、抗原タンパク質の3D画像が未掲載の製品もございます。
IE非対応です。




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関連製品:ブロッキングペプチド

ブロッキングペプチドは、標的抗体に特異的に結合し、抗体の結合を阻害(ブロック)するペプチドです。これらのペプチドは通常、抗体によって認識されるエピトープを含んでいます。ブロッキングペプチドに結合した抗体は、標的タンパク質のエピトープには結合しなくなります。ブロックされた抗体の染色と抗体のみの染色とを比較することにより、どの染色が特異的であるかを確認することができます。

ブロッキングペプチドの説明図

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(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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表示価格に、消費税等は含まれていません。一部価格が予告なく変更される場合がありますので、あらかじめご了承下さい。