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Taqポリメラーゼの60倍高いfidelityを有するDNAポリメラーゼ AQ97 High Fidelity DNA Polymerase/Hot Start High Fidelity DNA Polymerase

掲載日情報:2021/07/02 現在Webページ番号:70506

AQ97 High Fidelity DNA Polymeraseは、高GC含量から低GC含量までの幅広い鋳型DNAを増幅するDNAポリメラーゼです。Taq DNA ポリメラーゼより60倍高いフィデリティを持ち、クローニング、NGS、SNP解析、変異導入などに有用です。室温でのセットアップが可能なホットスタートタイプのポリメラーゼや、オールインワンで便利なマスターミックスもあります。


製品シリーズ外観

特長

  • エラー率は8.4×10-6以下で、Taqポリメラーゼの60倍以上の高いフィデリティを持ちます。
  • 10秒/kbと速い速度で伸長します。
  • 低~高GC含量の幅広い標的DNAに適応でき、高GC含量DNAが標的の場合、別売りのBetaine Enhancer Solutionを用いることで~80%まで適応可能です。
  • ゲノムDNAでは18 kb(2×Master Mixは11 kb)と、増幅が困難な長鎖の標的DNAに適用できます。
  • 塩基対のミスマッチを修正する、3' →5' プルーフリーディングエキソヌクレアーゼ活性を持ちます。
  • AQ97 High Fidelity DNA PolymeraseAQ97 Hot Start High Fidelity DNA Polymeraseには、5×AQ97 bufferと25 mM MgCl2が付属します。
  • AQ97 Hot Start High Fidelity DNA Polymeraseは、室温でのセットアップが可能なホットスタートタイプの製品です。
  • AQ97 High Fidelity DNA PolymeraseAQ97 Hot Start High Fidelity DNA Polymeraseはそれぞれ、dNTPs、MgCl2、ポリメラーゼ、バッファーなどが混合されている便利なオールインワンタイプのマスターミックスがあります。
  • クローニング/サブクローニング、NGS、変異導入、遺伝子発現、ライブラリー構築、SNP解析などのアプリケーションに最適です。

テクニカルチャート

Hot start Setup
at RT
Master mix Target gel loading Target length hgDNA Yield Specificity
AQ97 High Fidelity
DNA Polymerase
≦18 kb + +
AQ97 HiFi
2x Master Mix
≦11 kb + +
AQ97 Hot Start
High Fidelity
DNA Polymerase
≦18 kb ++ +++
AQ97 HiFi
Hot Start
2x Master Mix
≦11 kb +++ ++
AQ97 HiFi
Hot Start
2x Master Mix RED
≦11 kb +++ ++
+:High、++:Very high、+++:Excellent


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製品ラインナップ

商品コードをクリックすると各製品の価格表がご覧いただけます。

品名 製品外観 包装 商品コード
AQ97 High Fidelity
DNA Polymerase
AQ97_High_Figelity_DNA_Polymeraseの製品外観 100 Units A767501
500 Units A767503
1,000 Units A767504
2,500 Units A767506
AQ97 HiFi 2× Master Mix AQ97 HiFi 2x Master Mixの製品外観 100 Reactions A770201
500 Reactions A770203
2,500 Reactions A770206
5,000 Reactions A770207
AQ97 Hot Start High Fidelity DNA Polymerase AQ97 Hot Start High Fidelity DNA Polymeraseの製品外観 100 Units A787501
500 Units A787503
1,000 Units A787504
2,500 Units A787506
AQ97 HiFi Hot Start 2x Master Mix AQ97 HiFi Hot Start 2x Master Mixの製品外観 100 Reactions A790901
500 Reactions A790903
2,500 Reactions A790906
5,000 Reactions A790907
AQ97 HiFi Hot Start 2x Master Mix RED AQ97 HiFi Hot Start 2x Master Mix REDの製品外観 100 Reactions A810801
500 Reactions A810803
2,500 Reactions A810806
5,000 Reactions A810807

関連製品:5M Betaine Enhancer Solution

GC含量の高い鋳型DNAや、より複雑な二次構造またはより長い鋳型DNAに対しては、1~2 M Betaine Enhancer Solutionの添加が推奨されます。

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Betaine Enhancer solution 5 M
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Betaine Enhancer solution 5 M

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AQ97 High Fidelity DNA Polymeraseと他社製品との比較

GC含量の異なる鋳型DNAから得られたPCR産物の比較

様々なGC含量の鋳型DNAを増幅した際のAQ97_High_Fidelity_DNA_Polymeraseと他社製品のPCR産物の解析結果

AQ97 High Fidelity DNA Polymeraseと他社のHigh fidelity DNA polymeraseを用いて、GC含量が29~78%、長さが400~800 bpの8種類の異なるヒトゲノムDNAを鋳型としてPCRを行った。高GC含量の標的を増幅する際は、それぞれの反応液に推奨のエンハンサーを添加した。
本製品を用いた場合のみ、8種類すべての鋳型DNAを正確に増幅したが、他社のHigh fidelity DNA polymeraseを用いた場合では、GC含量が78%の鋳型DNAの増幅は確認できなかった。


PCR標的部位における置換エラー数の比較

AQ97-High-Fidelity-DNA Polymeraseと他社製品とのPCR標的部位における置換エラー数の比較

A:PCR標的部位における置換エラー数の分布図、B:Aの検出限界付近の拡大図

AQ97 High Fidelity DNA Polymerase()とTaq DNA Polymerase(水色)、他社のHigh fidelity DNA polymerase A()、C()を用いて、人工合成DNAを鋳型としてPCRを行い、それぞれのPCR産物についてNGSシークエンスを行った。サーマルサイクリング中に生じたDNA損傷、NGS用の試料調製およびシークンスエラー数を差し引き、各PCRにおける標的位置での置換数をグラフにプロットした。



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AQ97 Hot Start High Fidelity DNA Polymeraseと他社製品との比較

GC含量の異なる鋳型DNAから得られたPCR産物の比較

様々なGC含量の鋳型DNAを増幅した際のAQ97_High_Fidelity_DNA_Polymeraseと他社製品のPCR産物の解析結果

AQ97 Hot Start High Fidelity DNA polymeraseと他社のHot Start High fidelity DNA polymeraseを用いて、GC含量が29~78%、長さが400~800 bpの8種類の異なるヒトゲノムDNAを鋳型としてPCRを行った。高GC含量の標的を増幅する際は、それぞれの反応液に推奨のエンハンサーを添加した。
AQ97 Hot Start High Fidelity DNA polymeraseは、8種類すべての鋳型DNAを正確に増幅した。他社製品AはAQ97 Hot Start High Fidelity DNA polymeraseと非常に類似した結果を示したが、他社製品BおよびCを用いた場合では、GC含量が78%の鋳型DNAの増幅は確認できなかった。


長鎖の鋳型DNAから得られたPCR産物の比較

AQ97-High-Fidelity-DNA Polymeraseと他社製品とのPCR標的部位における置換エラー数の比較

AQ97 Hot Start High Fidelity DNA polymeraseと他社のHot Start High fidelity DNA polymeraseを用いて、長さが2~17.5 kbの6種類の異なるヒトゲノムDNAを鋳型として、PCRを行った。
AQ97 Hot Start High Fidelity DNA polymeraseは、6種類すべての鋳型DNAを正確に増幅した。他社製品AおよびBは最長の17.5 kbの鋳型DNAに対して、AQ97 Hot Start High Fidelity DNA polymeraseと比較するとPCR産物は少なかった。また、他社製品と比較して、AQ97 Hot Start High Fidelity DNA polymeraseはバックグラウンドノイズおよび非特異的バンドが確認されなかった。



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AQ97 High Fidelity DNA Polymerase

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AQ97 HiFi 2x Master Mix

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AQ97 HiFi Master 2x Mix 2500R

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AQ97 Hot Start High Fidelity DNA Polymerase

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AQ97 HiFi Hot Start 2x Master Mix

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AQ97 HiFi Hot Start 2x Master Mix RED

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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表示価格に、消費税等は含まれていません。一部価格が予告なく変更される場合がありますので、あらかじめご了承下さい。