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メーカー：	Horizon社Dharmacon製品 OriGene Technologies
	Horizon社Dharmacon製品(メーカー略称：DHA)のRNAiコレクション，cDNAコレクション，Yeastコレクションなど，遺伝子機能研究に有用な遺伝子リソースを検索することができます。クローンコレクション検索の使い方はこちら OriGene Technologies社(メーカー略称：ORI)のTrueClone / TrueORF / TrueORF Gold cDNAクローンなど，遺伝子機能研究に有用な遺伝子リソースを検索することができます。クローンコレクション検索の使い方はこちら
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HOME > 試薬 > 遺伝子工学 > PCR・シークエンシング > RT-PCR用商品 > eQo 1-Step ToughMix

凍結乾燥により長期間安定な1ステップRT-qPCR用のマスターミックス eQo 1-Step ToughMix

掲載日情報：2024/10/25 現在Webページ番号：70142

TaqManなどのハイブリダイゼーションベースのプローブを用いて、1ステップで定量的逆転写PCR（RT-qPCR）を行えるキットです。マスターミックスを凍結乾燥させたeQoビーズが入ったチューブを付属の乾燥剤入りのパウチ（Mastermix pouch）内で保管することで長期間安定となります。これを付属のRehydration bufferで再水和することで、マスターミックス（ToughMix）を調製することができます。なお、再水和後のマスターミックスも長期間安定です。

※ 本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

eQo 1-Step ToughMixイメージビデオ

RT-qPCR用ToughMixシリーズ一覧
特長
使用例
キット内容
動画（英語）
フライヤー
価格

RT-qPCR用ToughMixシリーズ一覧

Quantabio社のToughMixシリーズは、PCR阻害物質に耐性があるPCR/qPCRおよびRT-qPCR用マスターミックス製品です。qPCR用マスターミックスについてはこちらをご覧下さい。
品名をクリックすると詳細記事をご覧いただけます。

品名	qScript XLT 1-Step RT-qPCR ToughMix	qScript 1-Step Virus ToughMix	UltraPlex 1-Step ToughMix	eQo 1-Step ToughMix
特長	使用実績多数	少量RNAから検出可能	高感度・最大5ターゲットのマルチプレックス解析	室温保存可能・従来品からさらに改良
マスターミックス濃度	2×	2×	4×	再水和後：4× （凍結乾燥ビーズ）
逆転写のホットスタート	×	○	○	○（さらに改良）
PCRのホットスタート	○	○	○	○
PCR阻害物質への耐性	○	○	○	○（さらに改良）
マルチプレックス	最大4ターゲット	最大4ターゲット	最大5ターゲット	最大5ターゲット
感度	+++	++++	++++	+++++
精製RNAからの検出	○	○	○	○
粗精製試料からの検出	○	×	○	○

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特長

eQoビーズは室温で最大1年間、再水和後も−20℃で最大1年間安定です。
微量RNAを高感度に検出することができます。
常温で反応液を調製できます。
増幅困難な二次構造を有するRNAにも適応します。
さまざまなPCR阻害物質に対する耐性が大幅に向上していることを確認済みです。
付属のRehydration bufferには、GCリッチの標的の検出を向上させる成分と、再水和したマスターミックス（ToughMix）の−20℃での長期間保存を可能にする安定化剤が含まれています。

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使用例

安定性が高い二次構造を有するウイロイド（Viroid）RNAの増幅

ダリアに感染するウイロイドRNA試料は、フォールディングによりssRNA分子が安定した棒状構造を取っている。本製品および他社製品を用いて、各製品の推奨温度でRNA試料の逆転写反応を行い比較した結果、いずれのコピー数でも本製品の検出感度が優れている結果が示された。

さまざまな種類の阻害物質に対する耐性試験

eQo 1-Step ToughMixに含まれる逆転写酵素☞ qScript Ultraは、多くの一般的な反応阻害物質に対し優れた耐性を示す。各種阻害物質を含む試料を用いて、逆転写反応は各社マスターミックスを各メーカーの推奨温度に従い、サーマルサイクリングはすべて同じプロトコルで行った。Cq値は阻害物質なしの反応と比較し、1-step反応において相対的な阻害物質耐性を示した。

GCリッチな標的に対するプライマーでも一貫した遺伝子発現の定量

本製品は、増幅困難なさまざまな遺伝子ターゲットに対して一貫したmRNA定量性を行える。50 ngのヒトTotal RNAと各種プライマー／プローブアッセイセットを使用して1ステップRT-qPCRを行った。逆転写反応は各メーカーの推奨に従い、サーマルサイクリングはすべて同じプロトコルで行った。平均Cq値は、各遺伝子発現アッセイでプロットした。

病原性RNAウイルスの感度の検証

4種類のマルチプレックスRT-qPCRでSARS-CoV-2のRNA検出を行ったところ、本製品はわずか2コピーを検出できた。SARS-CoV-2のRNAについて、200,000～2コピーの希釈系列を作製し、これを試料とした。グラフは、標的SARS-CoV-2logコピー数に対する平均Cq値を示す。高希釈倍率でも安定的な増幅が観察された。

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