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メーカー：	Horizon社Dharmacon製品 OriGene Technologies
	Horizon社Dharmacon製品(メーカー略称：DHA)のRNAiコレクション，cDNAコレクション，Yeastコレクションなど，遺伝子機能研究に有用な遺伝子リソースを検索することができます。クローンコレクション検索の使い方はこちら OriGene Technologies社(メーカー略称：ORI)のTrueClone / TrueORF / TrueORF Gold cDNAクローンなど，遺伝子機能研究に有用な遺伝子リソースを検索することができます。クローンコレクション検索の使い方はこちら
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HOME > 試薬 > 遺伝子工学 > PCR・シークエンシング > RT-PCR用商品 > qScript Ultra SuperMix

迅速、高効率な次世代一本鎖cDNA合成用試薬 qScript Ultra SuperMix

掲載日情報：2022/07/13 現在Webページ番号：70726

RNAをcDNAに逆転写する一本鎖cDNA合成用の、安定性が高く、高効率なマスターミックスです。簡便な単一チューブフォーマットの製品です。熱安定性、速度、プロセシビティ、および多くの一般的な阻害物質に対する耐性を改善した、新規で最先端のRNase H欠損逆転写酵素を使用しています。

※ 本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

図をクリックすると拡大します（拡大図）

ヒトtotal RNA添加時の一本鎖cDNA合成反応

図をクリックすると拡大します（拡大図）

ヒトtotal RNA添加量に対する一本鎖cDNA合成のCq値の変化

高濃度のヒトtotal RNA添加時の一本鎖cDNA合成反応の直線性

高濃度のヒトtotal RNAを添加し、一本鎖cDNAの合成反応を行い、次にβ-actin qPCRにより生成物を分析した。qScript Ultra SuperMixは、わずか10分の反応時間でcDNAの存在量の直線性を損なうことなく、最大2.5 μgのトータルRNAの添加に対応することが示された。

低濃度のヒトtotal RNA添加時の一本鎖cDNA合成反応の感度

一本鎖cDNA合成反応を行い、2 pgのヒトtotal RNAと反応後、反応の一部（15％）をqPCR分析に使用した。デュプリケート反応のCq値を平均してプロットし、増幅が起こらなかった場合は、値をCq=40とした。

拡大図 — 低濃度のヒトtotal RNA添加時の一本鎖cDNA合成反応の感度

一本鎖cDNA合成反応を行い、2 pgのヒトtotal RNAと反応後、反応の一部（15％）をqPCR分析に使用した。デュプリケート反応のCq値を平均してプロットし、増幅が起こらなかった場合は、値をCq=40とした。

特長
製品の種類
比較例
関連製品
価格

特長

高い熱安定性：65°Cまでの逆転写酵素（RT）活性用に設計されており、難しい二次構造にも対応します。
短い反応時間：反応時間は10分間で、全所用時間はわずか13分です。
高い収率と感度：2.5 μg～1 pgの幅広いダイナミックレンジのtotal RNAから損失なくcDNAを合成します。
高い阻害物質耐性：様々なPCR阻害物質（塩、ヘパリン、メラニンなど）に耐性があります。
oligo (dT) primerとrandom primerが最適比でミックスされており、cDNA転写産物中の長鎖の転写産物もバランスよくカバーできます。
優れた簡便性：単一チューブにRNAテンプレートを除いたcDNA合成に必要なすべてのコンポーネントが含まれています。
最適反応温度は55℃となるように設計されています。
適応：total RNA、poly（A）+ RNA、viral RNA

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製品の種類

商品コードをクリックすると各製品の価格表をご覧いただけます。

品名	包装	商品コード
qScript Ultra SuperMix^*	100 μl	95217-025
	400 μl	95217-100
	2 ml	95217-500

＊ 5×qScript Ultra SuperMixには、単一のバイアルに最適化された右のコンポーネントが含まれています。

バッファー
マグネシウム
dNTPs
プライマーミックス
qScript Ultra RT
Blue tracking dye

図をクリックすると拡大します（拡大図）

qScript Ultra SuperMix製品外観

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比較例

一本鎖cDNA合成キットの処理時間の比較

cDNA合成が難しい二次RNA構造を処理しながら、結果が出るまでの時間を大幅に短縮することができる。

品名	1st Temp	Anneal primers	2nd Temp（Optimal）	Reverse transcription	3rd Temp	RT inactivation	Total Time
qScript Ultra SuperMix	25℃	2 min	55℃	10 min	95℃	1 min	13 min
A社キット	25℃	10 min	50℃	10 min	85℃	5 min	25 min
B社キット	25℃	10 min	50℃	15 min	85℃	5 min	30 min
C社キット	25℃	2 min	55℃	10 min	95℃	1 min	13 min

キャリアーRNAの存在下でのウイルスRNAからのcDNAの合成

ウイルスRNA抽出時に一般的に共沈剤として用いられ、その後のcDNA合成時に反応を妨害する可能性があるpoly（A）RNA 1 μgが存在する条件で、MS2ウイルスRNAから一本鎖cDNA合成を行った。qScript Ultra SuperMixは、ウイルス由来RNAをqPCRで検出時のcDNA収量が他社キットに比べて高いことが示された。

様々なタイプの阻害物質に対する安定性

一般的な反応阻害物質の存在下で、50 ngのヒトtotal RNAを使用して一本鎖cDNA合成を行った。cDNA合成後、生成物を希釈し、最初の反応の1/50をqPCRに使用した。Cq値を阻害物質無添加の反応と比較して、一本鎖cDNA合成反応における相対的な阻害物質の耐性を示した。qScript Ultra SuperMixは、様々なタイプの阻害物質に対して優れた安定性を有することが示された。

長鎖転写産物のバランスの良いカバー

6.3 kbのMAP4 mRNA転写産物の長さに沿って、間隔を置いてqPCRアッセイのプライマーを設計した。それぞれのプライマーを100 ng、10 ng、1 ng、および100 pgのtotal RNAに加え、qScript Ultra SuperMixを使用して一本鎖cDNA合成を行った。UHR total RNAの各添加量において、poly（A）テール近くの3'末端から5'末端の転写開始側にまたがる6.3 kb転写産物の4つの異なる領域で同等のCq値を示した。