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痛みのモデリングや末梢神経の再生研究に! ヒトiPS細胞由来の感覚神経細胞と成熟化培地

掲載日情報:2022/03/02 現在Webページ番号:69782

ヒトiPS細胞由来の感覚神経細胞(Sensory(DRG)neuron)と各感覚神経細胞に対応した成熟化培地をご紹介します。発現マーカーの異なる2種類の感覚神経細胞(RealDRG、RealDRGx)があり、実験系にあわせてお選びいただけます。また成熟化培地Senso-MMは、分化誘導キットのSenso-DM(#1010)を用いて作製した感覚神経細胞の成熟化にも使用できます。

ヒトiPS細胞から感覚神経細胞への分化誘導キットは、「Senso-DM」をご覧下さい。
本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

製品ラインナップ


ヒトiPS細胞由来の感覚神経細胞必要な成熟化培地
品名ドナー商品コード品名商品コード
RealDRGFemale1020F1-1MSenso-MM1030
Male1020M1-1M
RealDRGxFemale1021F1-1MSenso-MM*11030
Senso-MMx2*11032

*1 RealDRGxの成熟化には、Senso-MM(#1030)に加えて、Senso-MMx2(#1032)が必要です。
Anatomic社のヒトiPSC由来の感覚神経細胞を培養する場合は、コート用細胞外基質としてiMatrix-511 silkの使用を推奨しています。


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ヒトiPS細胞由来の感覚神経細胞

2種類の感覚神経細胞 RealDRG(#1020F1-1M、#1020M1-1M)とRealDRGx(#1021F1-1M)では、発現マーカーが異なります。下記の比較データをご確認のうえ、実験系にあわせてお選び下さい。

RealDRGとRealDRGxの比較

ヒートマップ解析

画像をクリックすると拡大します。

ヒートマップ解析像

図. ヒト初代DRG、ヒトiPS細胞由来の感覚ニューロン、およびヒトiPS細胞における感覚ニューロン特異的イオンチャネル、神経ペプチド、GPCR、細胞接着分子のヒートマップ解析像


自発的神経活動の評価

微小電極アレイ(MEA)を用いて、RealDRGとRealDRGxの自発的神経活動を評価した。自発的な神経活動は2週目から始まり、3週目には90%以上で活動を認めた。
画像をクリックすると拡大します。

自発的神経活動の評価

図. MEAを用いた自発的神経活動の評価


TRPA1+および神経ペプチドの発現解析

RealDRGxは約60%の細胞でTRPA1が発現し、SCN10AとTAC1もこれらの集団内で高発現していた(左図)。トランスクリプトーム解析によるRealDRGとの比較では、RealDRGxにおいてTAC1(Substance P)、CALCA、CALCB(CGRP)などの神経ペプチドの発現レベルが高いことが示された(中図)。ELISAを用いた解析においてもRealDRGxはRealDRGよりもSubstance Pの高い放出レベルを示した(右図)。
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RNAscopeと免疫細胞染色像

図. RNAscopeおよび免疫細胞染色像

トランスクリプトーム解析

図. トランスクリプトーム解析による比較

ELISAを用いたSubstance P放出のレベルの検証

図. ELISAを用いたSubstance P放出レベルの検証

ポスター

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RealDRG QuickGuide

Comparative Transcriptome Profiling of Multiple Human Induced Pluripotent Stem Cell Derived Sensory Neuron Populations and Functional Validation of Pain Targets on Automated Patch Clamp Systems

Anatomic社ヒトiPS細胞由来の感覚神経細胞の選択ツール

どちらの細胞がご自身の研究に適しているか、より詳細に検討したい場合はオンラインツールがあります。詳細は、当社テクニカルサポート(試薬担当)までお問い合わせ下さい。




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成熟化培地

RealDRG、RealDRGx共通の成熟化培地(Senso-MM)

RealDRG(#1020F1-1M、#1020M1-1M)、RealDRGx(#1021F1-1M*1および分化誘導キットのSenso-DM(#1010)を用いて作製した感覚神経細胞の成熟化に使用できます。成熟化した神経細胞は電位依存性Na+チャネル(NaV1.7, NaV1.8, NaV1.9)、カルシウムイオンチャネル(CaV2.2)、TRPチャネル(TRPV1)を発現します*2。Senso-MMで7日間培養した感覚神経細胞は、活動電位の発火と-50 mV付近の静止膜電位を示すようになります。

*1 RealDRGxの成熟化には、Senso-MM(#1030)に加えて、Senso-MMx2(#1032)が必要です。
*2 培養期間によって各イオンチャネルの発現パターンは異なります。
Anatomic社のヒトiPSC由来の感覚神経細胞を培養する場合は、コート用細胞外基質としてiMatrix-511 silkの使用を推奨しています。
ヒトiPS細胞から感覚神経細胞への分化誘導キットは、「Senso-DM」をご覧下さい。


使用例

Senso-MMによって成熟化した感覚神経細胞の発現パターン例。
遺伝子の発現パターンのRNAシークエンスデータについては、当社テクニカルサポート試薬担当までお問い合わせ下さい。

Neurons Product Manual

図. 位相差モルフォロジー(上図)とイオンチャネルの免疫細胞染色像(下図)

Neurons Product Manual

図. ヒト皮膚線維芽細胞に対する相対的な発現倍率


アプリケーションガイド

RealDRG(左)およびカルシウムイメージング(右)の詳細・操作手順は、以下のクイックガイドをご確認下さい。

RealDRG QuickGuide

RealDRG QuickGuide

Calcium Imaging QuickGuide

Calcium Imaging QuickGuide


RealDRGx用の成熟化培地(Senso-MMx2)

RealDRGx(#1021F1-1M*1用の成熟化培地です。

*1 RealDRGxの成熟化には、Senso-MM(#1030)に加えて、Senso-MMx2(#1032)が必要です。
Anatomic社のヒトiPSC由来の感覚神経細胞を培養する場合は、コート用細胞外基質としてiMatrix-511 silkの使用を推奨しています。


アプリケーションガイド

RealDRGxの詳細・操作手順は、以下のクイックガイドをご確認下さい。

RealDRG QuickGuide

RealDRGx QuickGuide



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価格

ヒトiPS細胞由来の感覚神経細胞(RealDRG)

[在庫・価格 :2024年05月25日 08時35分現在]

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1M RealDRG Female #1
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1M RealDRG Male #1
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ヒトiPS細胞由来の感覚神経細胞(RealDRGx)

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RealDRGx

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RealDRG、RealDRGx共通の成熟化培地

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Senso-MM
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Senso-MM

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RealDRGx用の成熟化培地

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Senso-MMx2
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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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