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痛みのモデリングや末梢神経の再生研究に！ ヒトiPS細胞由来の感覚神経細胞と成熟化培地

掲載日情報：2022/03/02 現在Webページ番号：69782

アナトミック インコーポレイテッド /
Anatomic Incorporated
[メーカー略称：ATM]

ヒトiPS細胞由来の感覚神経細胞（Sensory（DRG）neuron）と各感覚神経細胞に対応した成熟化培地をご紹介します。発現マーカーの異なる2種類の感覚神経細胞（RealDRG、RealDRGx）があり、実験系にあわせてお選びいただけます。また成熟化培地Senso-MMは、分化誘導キットのSenso-DM（#1010）を用いて作製した感覚神経細胞の成熟化にも使用できます。

※ ヒトiPS細胞から感覚神経細胞への分化誘導キットは、「Senso-DM」をご覧下さい。
※ 本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

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製品ラインナップ


ヒトiPS細胞由来の感覚神経細胞必要な成熟化培地
品名ドナー商品コード品名商品コード
RealDRGFemale1020F1-1MSenso-MM1030
Male1020M1-1M
RealDRGxFemale1021F1-1MSenso-MM＊11030
Senso-MMx2＊11032

＊1 RealDRGxの成熟化には、Senso-MM（#1030）に加えて、Senso-MMx2（#1032）が必要です。
※ Anatomic社のヒトiPSC由来の感覚神経細胞を培養する場合は、コート用細胞外基質としてiMatrix-511 silkの使用を推奨しています。


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ヒトiPS細胞由来の感覚神経細胞

2種類の感覚神経細胞 RealDRG（#1020F1-1M、#1020M1-1M）とRealDRGx（#1021F1-1M）では、発現マーカーが異なります。下記の比較データをご確認のうえ、実験系にあわせてお選び下さい。

RealDRGとRealDRGxの比較

ヒートマップ解析

画像をクリックすると拡大します。

ヒートマップ解析像

図. ヒト初代DRG、ヒトiPS細胞由来の感覚ニューロン、およびヒトiPS細胞における感覚ニューロン特異的イオンチャネル、神経ペプチド、GPCR、細胞接着分子のヒートマップ解析像


自発的神経活動の評価

微小電極アレイ（MEA）を用いて、RealDRGとRealDRGxの自発的神経活動を評価した。自発的な神経活動は2週目から始まり、3週目には90％以上で活動を認めた。
画像をクリックすると拡大します。

自発的神経活動の評価

図. MEAを用いた自発的神経活動の評価


TRPA1+および神経ペプチドの発現解析

RealDRGxは約60％の細胞でTRPA1が発現し、SCN10AとTAC1もこれらの集団内で高発現していた（左図）。トランスクリプトーム解析によるRealDRGとの比較では、RealDRGxにおいてTAC1（Substance P）、CALCA、CALCB（CGRP）などの神経ペプチドの発現レベルが高いことが示された（中図）。ELISAを用いた解析においてもRealDRGxはRealDRGよりもSubstance Pの高い放出レベルを示した（右図）。
各画像をクリックすると拡大します。

RNAscopeと免疫細胞染色像

図. RNAscopeおよび免疫細胞染色像

トランスクリプトーム解析

図. トランスクリプトーム解析による比較

ELISAを用いたSubstance P放出のレベルの検証

図. ELISAを用いたSubstance P放出レベルの検証

ポスター

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RealDRG QuickGuide

Comparative Transcriptome Profiling of Multiple Human Induced Pluripotent Stem Cell Derived Sensory Neuron Populations and Functional Validation of Pain Targets on Automated Patch Clamp Systems

Anatomic社ヒトiPS細胞由来の感覚神経細胞の選択ツール

どちらの細胞がご自身の研究に適しているか、より詳細に検討したい場合はオンラインツールがあります。詳細は、当社テクニカルサポート（試薬担当）までお問い合わせ下さい。




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成熟化培地

RealDRG、RealDRGx共通の成熟化培地（Senso-MM）

RealDRG（#1020F1-1M、#1020M1-1M）、RealDRGx（#1021F1-1M）＊1および分化誘導キットのSenso-DM（#1010）を用いて作製した感覚神経細胞の成熟化に使用できます。成熟化した神経細胞は電位依存性Na+チャネル（NaV1.7, NaV1.8, NaV1.9）、カルシウムイオンチャネル（CaV2.2）、TRPチャネル（TRPV1）を発現します＊2。Senso-MMで7日間培養した感覚神経細胞は、活動電位の発火と-50 mV付近の静止膜電位を示すようになります。

＊1 RealDRGxの成熟化には、Senso-MM（#1030）に加えて、Senso-MMx2（#1032）が必要です。
＊2 培養期間によって各イオンチャネルの発現パターンは異なります。
※ Anatomic社のヒトiPSC由来の感覚神経細胞を培養する場合は、コート用細胞外基質としてiMatrix-511 silkの使用を推奨しています。
※ ヒトiPS細胞から感覚神経細胞への分化誘導キットは、「Senso-DM」をご覧下さい。


使用例

Senso-MMによって成熟化した感覚神経細胞の発現パターン例。
※ 遺伝子の発現パターンのRNAシークエンスデータについては、当社テクニカルサポート試薬担当までお問い合わせ下さい。

Neurons Product Manual

図. 位相差モルフォロジー（上図）とイオンチャネルの免疫細胞染色像（下図）

Neurons Product Manual

図. ヒト皮膚線維芽細胞に対する相対的な発現倍率


アプリケーションガイド

RealDRG（左）およびカルシウムイメージング（右）の詳細・操作手順は、以下のクイックガイドをご確認下さい。

RealDRG QuickGuide

RealDRG QuickGuide

Calcium Imaging QuickGuide

Calcium Imaging QuickGuide


RealDRGx用の成熟化培地（Senso-MMx2）

RealDRGx（#1021F1-1M）＊1用の成熟化培地です。

＊1 RealDRGxの成熟化には、Senso-MM（#1030）に加えて、Senso-MMx2（#1032）が必要です。
※ Anatomic社のヒトiPSC由来の感覚神経細胞を培養する場合は、コート用細胞外基質としてiMatrix-511 silkの使用を推奨しています。


アプリケーションガイド

RealDRGxの詳細・操作手順は、以下のクイックガイドをご確認下さい。

RealDRG QuickGuide

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ヒトiPS細胞由来の感覚神経細胞（RealDRG）

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1M RealDRG Male #1
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ヒトiPS細胞由来の感覚神経細胞（RealDRGx）

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RealDRGx

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RealDRG、RealDRGx共通の成熟化培地

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Senso-MM
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Senso-MM

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RealDRGx用の成熟化培地

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Senso-MMx2
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Senso-MMx2

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お問い合わせ先

（テクニカルサポート 試薬担当）

reagent@funakoshi.co.jp

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