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三次元培養、オルガノイド・スフェロイド作製用チップ 3D CoSeedis
掲載日情報:2020/10/22 現在Webページ番号:69585
3D CoSeedisは多孔質アガロースを材質とした足場を必要としない三次元培養器材です。
6ウェルまたは24 ウェルのプレートに、対応する3D CoSeedis Chipを入れて使用します。
細胞を播種すると、くぼみに細胞が集まり凝集体(スフェロイド・オルガノイド)ができます。
作製したスフェロイド・オルガノイドは培地、酸素、成長因子などが全方位から供給され、10週間以上の長期培養も可能です。
細胞を混合して共培養する「Contact Co-culture」に加え、距離を置いて共培養する「Distance Co-culture」も可能です。
追加しました。
- コロニー形成アッセイ(CFA, Colony Forming Assay)とは
- 特長
- 製品の種類
- 使用例
- 適用例
- 3D CoSeedisの新しい応用例
- 3D CoSeedis 関連動画集
- 関連資料ダウンロード
- 価格
- 関連製品
コロニー形成アッセイ(CFA, Colony Forming Assay)とは
CFAとその問題点
CFA, は、in vitroでの細胞生存に関する機能試験方法です。CFAでは、コロニーは少なくとも50個の細胞で構成されると定義され、その単一細胞はコロニーに成長する能力に基づいています。このアッセイは、悪性細胞の自己再生に対する化学的、または放射線治療の効果の決定に特に有用で、がん研究に広く用いられています1,2。しかし、CFAの現在のプロトコルは複雑で手間を要し、特にアッセイの分析においては、結果を解釈する人によってはかなりの不一致を引き起こす傾向があります。これは、軟寒天または2Dプロトコルを用いた異なる焦点レベル、および座標でのコロニーのランダムな分布が原因となっています。
参考文献
- Hoffman, Robert, M., Journal of Clinical Laboratory Analysis, 5(2), 133~143 (1991).
- Von, Hoff, DD., "He’s not going to talk about in vitro predictive assays again, is he?" JNCl, 82, 96~101 (1990).
3D CoSeedisとは
3D CoSeedisは、ポリオキシメチレン(POM)ブロックで作製したポリジメチルシロキサン(PDMS)の鋳型に加熱されたアガロースを充填することにより製造された円錐状のアガロース製マイクロウェルアレイ(CAMA、Conical Agarose Microwell Array)です。
参考文献
- Andreas, R. Thomsen, et al., "A deep conical agarose microwell array for adhesion independent three-dimensional cell culture and dynamic volume measurement.", Lab Chip, 18, 179, DOI: 10.1039/c7lc00832e (2018).
3D CoSeedisの効果
3D CoSeedisは、接着非依存細胞用のためのCFAの新しい方法を提供します。この方法は、コロニーを適所かつ局所に固定し、(半)自動のバイナリアッセイを可能にします。
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特長
- 高い再現性が得られます。
- 非常に均一で均質なオルガノイドを容易に大量生産することができます。
- アレイ内の円錐形のマイクロウェルにより、凝集体の体積(細胞増殖)を正確に測定できます。
- 幅広い疾患モデルに適応します。
- ハイスループットスクリーニング(HTS)、ハイコンテントスクリーニング(HCS)に適応しています。
- 培養後パラフィン包埋して染色することもできます。
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製品の種類
商品コードをクリックすると各製品の価格表をご覧いただけます。
品名 | 3D CoSeedis | ||||||
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Chip200 | Chip880 | Chip680 | |||||
製品外観 | |||||||
製品仕様 | |||||||
適合プレート | 6-wells | 24-wells | |||||
1チップ当たりのオルガノイド生成可能数 | 200 | 880 | 680 | ||||
チップ数 | 1 | 6 | 1 | 6 | 1 | 6 | 12 |
商品コード | C200 | C200-6 | C880 | C880-6 | C680 | C680-6 | C680-12 |
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使用例
少分割照射後と温熱療法(HT)併用有無における微小腫瘍のサイズの追跡
チップが多孔性アガロースでできており、作製したオルガノイド・スフェロイドには培地、酸素、成長因子などを全方位から供給できる。長期間(最大10週間)培養できた例もある。
※ Andreas, R. Thomsen, et al., Lab. Chip, 18, 179~189 (2018).
スフェロイド・オルガノイドの粒径分布
ハンギングドロップ(HD)および液体オーバーレイ法(LO)との比較
単一の細胞凝集体の画像。FDA-(緑/生細胞)およびPI-(赤/死細胞)で染色された凝集体の蛍光顕微鏡像。3D CoSeedisは、典型的なネクローシスコアを示す正しい三次元構造を模倣することがわかる。ヒト膵臓がん細胞株MiaPaCaのように、従来のハンギングドロップや液体オーバーレイ法では十分な凝集体が得られなかった細胞であっても、3D CoSeedisによって三次元培養を行うことができる。
三次元共培養
3D CoSeedisは、三次元共培養(3D co-culture)において、接触培養(Contact culture)および遠隔培養(Distance culture)の両方に適用できます。接触培養においては、細胞を混合して播種し(下図左)、遠隔培養においては、例えばフィーダー細胞をモノレイヤーで培養し、その上部でアレイで細胞凝集体を培養します(下図右)。
遠隔共培養では、マイクロウェルとプレート底面で異なる細胞を分けて培養(フィーダー細胞と接触させずに共培養)し、接触培養と同等の結果を得ることができる。また、それぞれの細胞を簡単に分離・回収できる。
接触および遠隔共培養におけるT47D乳がん細胞の増殖およびスフェロイド形成に対するヒトMSCの効果を検証した。ボリュームの決定はd20で行った(n=3)。上図左に4つのスフェロイドのスキャン、下図右に3D CoSeedisのスキャン(上図右)の結果を示した。データは平均値±SEMを示す。 *:P <0.05、 **:P <0.01、***:P <0.001。
- T47D細胞の播種:10 cells/well(cpm)
- 接触共培養用MSC:10 cpm
- 遠隔共培養用MSC:103 cells/cm2
三次元細胞培養の免疫組織染色例
- A:スライドの準備
ホルマリン固定したマイクロウェルアレイを低融点(LMP)アガロースでシーリングする。脱水、パラフィンに浸した後にアレイを反転し、パラフィン包埋してからカセットにマウントする。2μm切片を、後の標準的な染色操作のために準備する。 - B:乳がん関連線維芽細胞(BrCa-aF)、乳がん細胞(BT-474およびMDA-MB-231)、膵臓がん細胞(MIAPaCa-2)の免疫染色像
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適用例
本製品は、以下の細胞、培養において適用を確認済みです。
種別 | 部位 | 細胞名 |
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腫瘍/がん1,2 | 乳房 | B16, BT-474, BT-549, MCF7, MDA-MB-231, T47D, rat MTPa3 |
肺 | A-549 | |
結腸 | HT-29, WiDr | |
類表皮がん | A431 | |
膠芽腫 | GBM4, U251 | |
下咽頭がん | FaDu | |
肝臓がん | Hep3B, HepG2, Huh-7 | |
リンパ腫 | U937 | |
多発性骨髄腫 | L363, U266 | |
膵臓がん | MIAPaCa-2, Panc -1, PSN-1 | |
前立腺がん | LNCap, PC-3, 22Rv14 | |
食道腺がん | OE-193 | |
肝細胞がん | Snu | |
Tリンパ球がん | HuT-78*1 | |
Bリンパ球がん | Raji*1 | |
間葉系幹細胞1,2 | 脂肪組織由来 | Adipo-MSC |
骨髄由来1,2 | BM-MSC | |
線維芽細胞1,2 | 乳がん関連線維芽細胞 | BrCa-aF |
造血幹細胞1,2 | 臍帯血由来 | CD34+ HSC |
上皮細胞1,2 | 肺 | BEAS-2B, NBEC, FBEC |
骨形成分化1~3 | BM-MSC由来 | |
軟骨形成分化1,2 | BM-MSC由来 |
参考文献
- Andreas R. Thomsen, et al., "A deep conical agarose microwell array for adhesion independent three-dimensional cell culture and dynamic volume measurement.", Lab. Chip, DOI 10.1039/C7LC00832E.
- Andreas R. Thomsen, et al., "Modelling gastrointestinal cancer cell interaction with tumor stroma in a 3D microwell array.", poster presented at GBS, (2017).
- Personal communication: Dr. A. R. Thomsen, Universitätsklinikum Freiburg, Germany.
- Personal communication: Dr. C. Zamboglou, Univeristätsklinikum Freiburg, Germany.
*1 abc biopply社内での観察:マイクロウェルに沈殿した古典的な凝集のない浮遊細胞
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3D CoSeedisの新しい応用例
COVID-19関連サイトカイン放出症候群における新規in vitro研究へのアプローチ
COVID-19患者に致命的な病気の進行を引き起こす主要な要因の1つに、サイトカイン放出症候群(CRS, Cytokine Release Syndrome)があります。3D CoSeedisによるin vitro三次元細胞培養技術は、生理学的により適切な条件下においてCRSを研究する新しいアプローチとなることが期待できます。
「上皮細胞」候補は、肺がんまたは正常気道上皮に由来する細胞株より、「間葉系細胞」は、内皮(例えばHUVEC)または間葉系幹細胞(MSC)から選択されます。この三次元共培養プラットフォームは、長期のフォローアップ(継代培養を必要とせずに最大12週間の培養)と、アッセイに支障なく培養上清の繰り返しサンプリングが可能です。感染および化合物への経時応答は、予め定めた間隔での培地のサンプリングにより分析します。分析は、培地に分泌されるサイトカイン、SARS-CoV-2粒子またはウイルス成分(例えば、エンベロープ抗原やRNA)の負荷、凝固関連因子、および全体的なグルコース消費、またはカタボライトのレベルに適応します。
複数の三次元培養間のコミュニケーション
3D CoSeedisを用いた三次元培養を複数組み合わせることにより、非常に効率的で予測的な疾患モデリングの構築が可能となります。
このモデルによって、例えば以下のような事象の研究に応用できます。
- 由来生物種の異なる細胞(例:生物間コミュニケーション)
- 由来臓器の異なる浮遊細胞(例:血球)
- 薬物化合物、感染性粒子、毒素などの生物学的に活性な薬剤に対するシステムの応答または反応
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3D CoSeedis 関連動画集
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関連資料ダウンロード
下の各項目をクリックすると、関連資料()をご覧いただけます。
- Colony Forming Assay with 3D CoSeedis
- Viability and Cytotoxicity Testing with 3D CoSeedis
- Cryo-embedding with 3D CoSeedis
- Easy mass production of homogenous and uniform 3D spheroids for high-throughput screening applications
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価格
3D CoSeedis Chip200(#C200)
[在庫・価格 :2025年01月16日 00時01分現在]
詳細 | 商品名 |
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文献数 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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3D CoSeedis Chip200 |
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3D CoSeedis Chip200 |
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1 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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[在庫・価格 :2025年01月16日 00時01分現在]
3D CoSeedis Chip200
文献数: 1
- 商品コード:C200
- メーカー:ECS
- 包装:1piece
- 価格:¥26,000
- 在庫:無(未発注)
- 納期:2~3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等:
説明文 | 均一で均質なスフェロイド・オルガノイドを容易に大量生産できるディスポーザブルチップ。6-wellプレートに適合し,1チップ当たり200個のスフェロイド・オルガノイドを生成可能。作製したオルガノイド ・スフェロイドは10週間以上の長期培養も可能。 |
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法規制等 | |||
保存条件 | 4℃ | 法規備考 | |
掲載カタログ |
ニュース2021年2月15日号 p.4
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製品記事 | |||
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3D CoSeedis Chip200
文献数: 1
- 商品コード:C200-6
- メーカー:ECS
- 包装:6pieces
- 価格:¥119,000
- 在庫:無(未発注)
- 納期:2~3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等:
説明文 | 均一で均質なスフェロイド・オルガノイドを容易に大量生産できるディスポーザブルチップ。6-wellプレートに適合し,1チップ当たり200個のスフェロイド・オルガノイドを生成可能。作製したオルガノイド ・スフェロイドは10週間以上の長期培養も可能。 |
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法規制等 | |||
保存条件 | 4℃ | 法規備考 | |
掲載カタログ |
細胞培養・再生医療研究カタログ2021-2022 p.58
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3D CoSeedis Chip880(#C880)
[在庫・価格 :2025年01月16日 00時01分現在]
詳細 | 商品名 |
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文献数 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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3D CoSeedis Chip880 |
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3D CoSeedis Chip880 |
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2 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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[在庫・価格 :2025年01月16日 00時01分現在]
3D CoSeedis Chip880
文献数: 2
- 商品コード:C880
- メーカー:ECS
- 包装:1piece
- 価格:¥41,000
- 在庫:無(未発注)
- 納期:2~3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等:
説明文 | 均一で均質なスフェロイド・オルガノイドを容易に大量生産できるディスポーザブルチップ。6-wellプレートに適合し,1チップ当たり880個のスフェロイド・オルガノイドを生成可能。作製したオルガノイド ・スフェロイドは10週間以上の長期培養も可能。 |
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法規制等 | |||
保存条件 | 4℃ | 法規備考 | |
掲載カタログ |
ニュース2021年2月15日号 p.4
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3D CoSeedis Chip880
文献数: 2
- 商品コード:C880-6
- メーカー:ECS
- 包装:6pieces
- 価格:¥208,000
- 在庫:無(未発注)
- 納期:2~3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等:
説明文 | 均一で均質なスフェロイド・オルガノイドを容易に大量生産できるディスポーザブルチップ。6-wellプレートに適合し,1チップ当たり880個のスフェロイド・オルガノイドを生成可能。作製したオルガノイド ・スフェロイドは10週間以上の長期培養も可能。 |
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法規制等 | |||
保存条件 | 4℃ | 法規備考 | |
掲載カタログ |
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3D CoSeedis Chip680(#C680)
[在庫・価格 :2025年01月16日 00時01分現在]
詳細 | 商品名 |
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文献数 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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3D CoSeedis Chip680 |
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3D CoSeedis Chip680 |
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3D CoSeedis Chip680 |
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[在庫・価格 :2025年01月16日 00時01分現在]
3D CoSeedis Chip680
文献数: 0
- 商品コード:C680
- メーカー:ECS
- 包装:1piece
- 価格:¥37,000
- 在庫:無(未発注)
- 納期:2~3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等:
説明文 | 均一で均質なスフェロイド・オルガノイドを容易に大量生産できるディスポーザブルチップ。24-wellsプレートに適合し,1チップ当たり680個のスフェロイド・オルガノイドを生成可能。作製したオルガノイド ・スフェロイドは10週間以上の長期培養も可能。 |
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保存条件 | 4℃ | 法規備考 | |
掲載カタログ |
細胞培養・再生医療研究カタログ2021-2022 p.58
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3D CoSeedis Chip680
文献数: 0
- 商品コード:C680-6
- メーカー:ECS
- 包装:6pieces
- 価格:¥168,000
- 在庫:無(未発注)
- 納期:2~3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等:
説明文 | 均一で均質なスフェロイド・オルガノイドを容易に大量生産できるディスポーザブルチップ。24-wellsプレートに適合し,1チップ当たり680個のスフェロイド・オルガノイドを生成可能。作製したオルガノイド ・スフェロイドは10週間以上の長期培養も可能。 |
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法規制等 | |||
保存条件 | 4℃ | 法規備考 | |
掲載カタログ |
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3D CoSeedis Chip680
文献数: 0
- 商品コード:C680-12
- メーカー:ECS
- 包装:12pieces
- 価格:¥303,000
- 在庫:無(未発注)
- 納期:2~3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等:
説明文 | 均一で均質なスフェロイド・オルガノイドを容易に大量生産できるディスポーザブルチップ。24-wellsプレートに適合し,1チップ当たり680個のスフェロイド・オルガノイドを生成可能。作製したオルガノイド ・スフェロイドは10週間以上の長期培養も可能。 |
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法規制等 | |||
保存条件 | 4℃ | 法規備考 | |
掲載カタログ |
細胞培養・再生医療研究カタログ2021-2022 p.58
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関連製品
[在庫・価格 :2025年01月16日 00時01分現在]
詳細 | 商品名 |
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文献数 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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Spatula for 3D CoSeedis C200/C880, sterile |
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Spatula for 3D CoSeedis C680, sterile |
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3D CoSeedis Aggregation Medium 1 |
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0 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3D CoSeedis Aggregation Medium Supplement |
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0 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3D CoSeedis Aggregation Medium 1 Kit incl. basal medium and supplement |
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0 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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[在庫・価格 :2025年01月16日 00時01分現在]
Spatula for 3D CoSeedis C200/C880, sterile
文献数: 0
- 商品コード:SPT-V1117
- メーカー:ECS
- 包装:1piece
- 価格:¥24,000
- 在庫:無(未発注)
- 納期:2~3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等:
説明文 | 3D CoSeedis Chip200 (#C200), Chip880 (#C880)に適したピンセット。 |
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法規制等 | |||
保存条件 | 法規備考 | ||
掲載カタログ |
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Spatula for 3D CoSeedis C680, sterile
文献数: 0
- 商品コード:SPT-V0919
- メーカー:ECS
- 包装:1piece
- 価格:¥24,000
- 在庫:無(未発注)
- 納期:2~3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等:
説明文 | 3D CoSeedis Chip680 (#C680)に適したピンセット。 |
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法規制等 | |||
保存条件 | 法規備考 | ||
掲載カタログ |
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3D CoSeedis Aggregation Medium 1
文献数: 0
- 商品コード:AM1-V0618
- メーカー:ECS
- 包装:500ml
- 価格:¥22,000
- 在庫:無(未発注)
- 納期:2~3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等:
3D CoSeedis Aggregation Medium Supplement
文献数: 0
- 商品コード:AMS-V0618
- メーカー:ECS
- 包装:25ml
- 価格:¥42,000
- 在庫:無(未発注)
- 納期:2~3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等:
3D CoSeedis Aggregation Medium 1 Kit incl. basal medium and supplement
文献数: 0
- 商品コード:AM1-V0618-Kit
- メーカー:ECS
- 包装:1kit
- 価格:¥59,000
- 在庫:無(未発注)
- 納期:2~3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等:
説明文 | |||
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法規制等 | |||
保存条件 | 法規備考 | ||
掲載カタログ |
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製品情報は掲載時点のものですが、価格表内の価格については随時最新のものに更新されます。お問い合わせいただくタイミングにより製品情報・価格などは変更されている場合があります。
表示価格に、消費税等は含まれていません。一部価格が予告なく変更される場合がありますので、あらかじめご了承下さい。