HOME> 試薬> 免疫化学> 抗体の作製> 抗体標識キット> ChromaLink Biotin Antibody-Labeling Kit
(抗体ビオチン標識キット)

標識試薬のトレースが可能なAll-in-oneの抗体ビオチン標識キット ChromaLink Biotin Antibody-Labeling Kit
(抗体ビオチン標識キット)

掲載日情報:2022/05/23 現在Webページ番号:69265

抗体をビオチン標識するために必要なすべての試薬、バッファー、脱塩カラムなどを含んだキットです。リンカーアームにUVによるトレースが可能な発色団を組み込んだChromaLink Biotinを用いているため、HAVA/AvidinおよびFluoro-Reporterアッセイに必要な標準曲線の作成を必要とせずに、ビオチン標識度(ビオチンの取り込み)をわずか数分間で測定することができ、高い再現性が得られます。

多重免疫蛍光染色

ChromaLink Biotin/Digoxigenin One-Shot Antibody Labeling Kitsにより作製した蛍光標識抗体を用いた多重免疫蛍光染色例

Sprague Dawleyラットの脳組織を、未標識マウス抗ラット/ヒトCalbidin D抗体とインキュベートした後、NorthernLights NL-637(遠赤色蛍光)標識したロバ抗マウス二次抗体で検出した。PBSで洗浄後、同じ組織切片を☞ ChromaLinkビオチン標識マウス抗ラットSynaptotagmin-1抗体と☞ ChromaLinkジゴキシゲニン標識マウス抗ラット/ヒトCART抗体の混合物とともにインキュベートした。これらのマウス一次抗体の検出は、Streptavidin-NorthernLights NL-493標識物(緑色蛍光)と、Rhodamine Red-X(赤色蛍光)標識したマウス抗ジゴキシゲニン抗体の混合物を使用して行った。核対比染色としてDAPI(青色染色)を使用した。

製品の種類へ

SoluLINK製品の取り扱い開始のお知らせ

下の画像をクリックすると、☞ SoluLINK標識キットの製品一覧のご案内をご覧いただけます。

SoluLINK製品の取り扱い開始のお知らせ

SoluLINK社製品は、2020年4月よりVector Laboratories社から販売することとなりました。詳細については、☞ 当社テクニカルサポート部(試薬担当)までお問い合せ下さい。







目次に戻る

ChromaLink Biotinとは

ChromaLink Biotinの構造

ChromaLink Biotinの構造

本製品のビオチン標識試薬には、芳香族の水溶性N-ヒドロキシ-スクシンイミジルエステル官能基(a)が含まれており、温和なリン酸バッファー条件下で抗体のリジン残基を効率的に修飾します。また、リンカー部分(b)にはUVによるトレースが可能な発色団のビスアリールヒドラゾン構造も結合されており、これによって迅速かつ非破壊的にビオチンの取り込みを定量することが可能になります(C)。また、長いPEG3リンカーは、ストレプトアビジン/ビオチンの親和性を保持し、抗体の溶解性を付与しています。

ChromaLink BiotinのUV吸収スペクトル

ChromaLink Biotinの構造

本製品を用いて作製したビオチン標識IgGバッファー溶液のUV吸収スペクトル

354 nmのピークにより、ビオチンの取り込みを定量できます。



目次に戻る

製品の種類

商品コードをクリックすると各製品の価格表をご覧いただけます。

品名 ChromaLink Biotin One-Shot Antibody Biotinylation Kit ChromaLink Biotin Protein Labeling Kit
商品コード B-9007-009K B-9007-020K B-9007-105K
抗体最大標識量 100μg 2 mg 25μg ~ 1 mg*
キット内容 ChromaLink biotin
Modification buffer
PBS
Zeba desalt spin column
Collection tube
Storage tube
Biotinylated bovine IgG
1M Tris HCl
Anhydrous DMF

分子量が20~200 kDaの最大5つの抗体またはタンパク質をビオチン標識および精製できます。
UV-VISまたはNanoDrop分光光度計およびセミミクロ石英キュベットが別途必要です。

目次に戻る

特長

  • キットに含まれるChromaLink Biotin試薬は、予め秤量されており、抗体溶液に直接再懸濁することができます。
  • 最適ChromaLink Biotin試薬添加量は、☞ Chromalink Biotin Protein Labeling Calculator(右図)を用いて計算できます。
  • 哺乳動物のIgG(モノクローナル抗体およびポリクローナル抗体)、鳥類のIgYなどのビオチン標識に使用できます。
  • ビオチンの取り込みは、過剰な標識試薬を除去後に試料を非破壊的なUVスキャン(220~440 nm)することで、迅速に決定できます。
  • 抗体100μgからの回収量:60~90μg
  • 抗体1分子当たりのビオチン取り込み:3~8ビオチン分子
Chromalink Biotin Protein Labeling Calculator

製品の種類へ

目次に戻る

適用

本製品は、以下のような用途に用いることができます。

  • 抗体標識
  • アンチセンス/RNAi
  • アプタマー
  • 免疫療法研究
  • In situ 近接ライゲーションアッセイ
  • 自家調整検査(LDT:Laboratory Developed Tests)および分析物特異的試薬(ASR:Analyte Specific Reagents)

製品の種類へ

目次に戻る

操作方法概略

ChromaLink Biotin One-Shot Antibody Biotinylation Kit

操作方法概略
  1. 1 mg/ml濃度で抗体を再懸濁する(0~5分)
  2. UVスキャンにより抗体濃度を確認する(5分)
  3. スピンカラムを用いてバッファーを交換する(10分)
  4. UVスキャンにより抗体濃度を確認する(5分)
  5. 予め秤量されたChromaLink Biotinと共に、抗体をインキュベートする(90分)
  6. スピンカラムを用いてバッファーを交換する(3分)
  7. UVスキャンでビオチン取り込み量を定量する(8分)

ChromaLink Biotin Protein Labeling Kit

操作方法概略

製品の種類へ

目次に戻る

使用例

ヤギ抗マウスIgG抗体のビオチン標識例

ヤギ抗マウスIgG抗体のビオチン標識例

ヤギ抗マウスIgG(100μg凍結乾燥品)をModification buffer 100μl(100 mMリン酸ナトリウム、150 mM NaCl、pH 8.0)に溶解し、1 mg/mlの抗体溶液を作製した。NanoDrop分光光度計により試料を測定した結果(左図)、初期濃度は0.93 mg/mlであった(E1%値:13.60)。スピンカラムを用いてバッファー交換し、試料をスキャンした結果、濃度は0.87 mg/mlであった(中央図)。その後、試料をChromaLink Biotin試薬で60分間標識し、クエンチ後に過剰な試薬を2回目のスピンカラム(PBS)処理で除去した。最後に、標識試料を220~350 nmでスキャンし(右図)、回収した抗体量とモル置換比を算出した結果、それぞれ62μgおよび7.0であった。

ラット抗マウスIgG1抗体のビオチン標識例

ラット抗マウスIgG1抗体のビオチン標識例

市販のラット抗マウスIgG1(500μg凍結乾燥品)をPBS 500μlに溶解し、1 mg/mlの抗体溶液を作製した。NanoDrop分光光度計により試料の一部(2μl)を測定した結果(左図)、初期濃度は0.80 mg/mlであった(E1%値:14.00)。1回目のスピンカラム処理後に試料をスキャンした結果、濃度は0.99 mg/mlであった(中央図)。その後、試料をChromaLink Biotin試薬で60分間標識し、クエンチ後に過剰な試薬を2回目のスピンカラム(PBS)処理で除去した。最後に、標識試料を220~350 nmでスキャンし(右図)、回収した抗体量とモル置換比を算出した結果、それぞれ89μgおよび6.4であった。

ELISAへの適用例

異なるビオチン置換比で標識した同一検出抗体を用いたダイレクトELISAにおけるシグナルの比較

異なるビオチン置換比で標識した同一検出抗体を用いたダイレクトELISAにおけるシグナルの比較

各ウェルを同量(ウェル当たり2 ng)の固定化抗原でコーティングした。MSRが1.3~6.1に増加するのに合わせて、バックグラウンド補正後のシグナルの増加が見られた。

サンドイッチELISAへの適用例

サンドイッチELISAへの適用例

ビオチンMSR 6.35のビオチン標識IL-2抗体を検出抗体に使用し、IL-2サンドイッチELISAにおける応答曲線を作成した。


製品の種類へ

目次に戻る

価格

[在庫・価格 :2024年04月25日 11時15分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。

[在庫・価格 :2024年04月25日 11時15分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。

ChromaLink One Shot Antibody Biotinylation Kit (Labels 100 ug of Ab)

文献数: 0

説明文
法規制等
保存条件 4℃,凍結禁止 法規備考
掲載カタログ

製品記事 SoluLINKバイオコンジュゲーション・標識キットシリーズ
関連記事

ChromaLink Biotin Protein Labeling Kit

文献数: 0

説明文
法規制等
保存条件 4℃,凍結禁止 法規備考
掲載カタログ

製品記事 SoluLINKバイオコンジュゲーション・標識キットシリーズ
関連記事



目次に戻る

関連製品 ChromaLink Digoxegenin One-Shot Antibody Labeling Kit

100μg~2 mgまでの抗体をジゴキシゲニン標識するために必要なすべての試薬、バッファー、脱塩カラムなどを含んだキットです。リンカーアームにUVによるトレースが可能な発色団を組み込んだChromaLink Digoxigeninを用いているため、HAVA/AvidinおよびFluoro-Reporterアッセイに必要な標準曲線の作成を必要とせずに、ジゴキシゲニン標識度(ジゴキシゲニンの取り込み)をわずか数分間で測定することができ、高い再現性が得られます。
品名をクリックすると製品の詳細、商品コードをクリックすると各製品の価格表をご覧いただけます。

品名 ChromaLink Digoxegenin One-Shot Antibody Labeling Kit
商品コード B-9014-009K B-9014-020K
抗体最大標識量 100μg 2 mg

製品の種類へ

目次に戻る

関連製品 その他のビオチン標識試薬

[在庫・価格 :2024年04月25日 11時15分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。
詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
  • 価格
  • 在庫
  • 法規制等
納期 文献数
Biotin (Long Arm) Hydrazide
2週間程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
糖タンパク質,糖脂質,タンパク質のビオチン標識用。立体障害が少ない。M.W.:371.51,反応基:-COOH
法規制等
保存条件 4℃,乾燥状態(デシケータ内)で保存 法規備考
掲載カタログ

製品記事
関連記事
Biotin (Long Arm) NHS <N-Hydroxysuccinimidyl-6-(Biotinamido)Hexanoate>
中止
本製品は取扱中止になりました 0
説明文
法規制等
保存条件 法規備考
掲載カタログ

製品記事
関連記事
Biotin (Long Arm) NHS-Water Soluble <BNHSws> <Sulfosuccinimidyl-6-(Biotinamido)Hexanoate Sodium Salt>
中止
本製品は取扱中止になりました 0
説明文
法規制等
保存条件 法規備考
掲載カタログ

製品記事
関連記事

[在庫・価格 :2024年04月25日 11時15分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。

Biotin (Long Arm) Hydrazide

文献数: 0

説明文 糖タンパク質,糖脂質,タンパク質のビオチン標識用。立体障害が少ない。M.W.:371.51,反応基:-COOH
法規制等
保存条件 4℃,乾燥状態(デシケータ内)で保存 法規備考
掲載カタログ

製品記事
関連記事

Biotin (Long Arm) NHS <N-Hydroxysuccinimidyl-6-(Biotinamido)Hexanoate>

文献数: 0

  • 商品コード:SP-1200
  • メーカー:VEC
  • 包装:50mg
  • 本製品は取扱中止になりました

説明文
法規制等
保存条件 法規備考
掲載カタログ

製品記事
関連記事
中止

Biotin (Long Arm) NHS-Water Soluble <BNHSws> <Sulfosuccinimidyl-6-(Biotinamido)Hexanoate Sodium Salt>

文献数: 0

  • 商品コード:SP-1210
  • メーカー:VEC
  • 包装:50mg
  • 本製品は取扱中止になりました

説明文
法規制等
保存条件 法規備考
掲載カタログ

製品記事
関連記事
中止

目次に戻る

お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

製品情報は掲載時点のものですが、価格表内の価格については随時最新のものに更新されます。お問い合わせいただくタイミングにより製品情報・価格などは変更されている場合があります。
表示価格に、消費税等は含まれていません。一部価格が予告なく変更される場合がありますので、あらかじめご了承下さい。