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異種細胞間の相互作用を定量的に測定するキット CytoSelect Endotherium/Epitherium-Leukocyte/Tumor Adhesion Assay シリーズ

掲載日情報:2019/11/12 現在Webページ番号:69189

Cell BioLabs社のCytoSelect Endotherium/Epitherium-Leukocyte/Tumor Adhesion Assay シリーズは,内皮/上皮細胞 ⇔ 白血球および内皮細胞 ⇔ がん細胞といった異種細胞間の相互作用を定量的に測定するためのキットです。内皮または上皮細胞の単層に蛍光染色した白血球またはがん細胞が接着した細胞量を蛍光プレートリーダーを用いて簡単・高感度に定量することができます。
その他のCell Biolabs社製品についてはこちらをご覧下さい。
本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

操作方法概略

測定原理

CytoSelect Cell Adhesion Assay Kitシリーズの測定原理

  1. 内皮細胞*または上皮細胞を培養して単層をつくり,適切な活性化/阻害物質で処理する。
  2. 白血球またはがん細胞をそれぞれLeukoTracker solutionまたはCytoTracker solutionで蛍光標識し,ペレット化した後,洗浄および再懸濁する。
  3. 蛍光標識した白血球またはがん細胞懸濁液を内皮または上皮単層を含むウェルに加え,培養する。
  4. 洗浄後,接着した白血球を溶解して蛍光プレートリーダーを用いて定量する。

内皮細胞で単層を作製する場合(#CBA-210または#CBA-215),キットに含まれるGelatin solutionを前もってウェルにコートします。


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製品ラインナップ

品名をクリックすると各製品のバックグラウンドと測定例を,商品コードをクリックすると価格表をご覧いただけます。

品名 CytoSelect Leukocyte
-Endothelium Adhesion Assay Kit
CytoSelect Leukocyte
-Epithelium Adhesion Assay Kit
CytoSelect Tumor
-Endothelium Adhesion Assay Kit
商品コード CBA-210 CBA-211 CBA-215
フォーマット 96 well plate (100 assays)
測定方法 蛍光
測定波長 励起480 nm / 蛍光520 nm
細胞の種類 内皮細胞(Endothelium)
白血球(Leukocyte)
上皮細胞(Epitherium)
白血球(Leukocyte)
内皮細胞(Endothelium)
がん細胞(Tumor cells)
キット内容 LeukoTracker solution
CytoTracker solution
Gelatin solution
Lysis buffer
Wash buffer
TNFα

キットには細胞,培地およびプレート(96ウェルまたは48ウェル培養プレート)は含まれていません。別途ご用意下さい。
測定には蛍光マイクロプレートリーダーが必要です。


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CytoSelect Leukocyte-Endothelium Adhesion Assay Kit(#CBA-210)

白血球と内皮細胞の接着カスケード (クリックで開閉します)

血管周囲組織への白血球の血管外溢出は,炎症性疾患において重要な役割を果たしています。この溢出には白血球と血管内皮との相互作用を必要とし,循環白血球の捕獲とそれに続く回転,停止,強固な接着および移行を含む,多様で連続したプロセスから成ります(下図参照)。この多段階反応は,白血球における内皮細胞接着分子とそれらに特異的なリガンドとの一連の活性化依存的な相互作用によって実現されます。一過性接着と回転の第1段階は,白血球または内皮細胞セレクチンと,オリゴ糖を有するそれらのリガンドとの相互作用を介して行われることが知られています。白血球の停止と内皮へ強固な接着は,白血球細胞表面におけるβ2インテグリン様Mac-1またはLFA-1の活性化,そしてそれに続くICAM-1のようなIgスーパーファミリーに属する内皮細胞タンパク質との相互作用に依存しています。

内皮細胞と白血球の相互作用

白血球-内皮細胞の接着カスケード


測定例

ヒト単球THP-1細胞の定量

ヒト単球THP-1細胞の定量

LeukoTracker標識したTHP-1細胞を1×PBS中に懸濁させた後,2×Lysis Bufferで溶解した。

ヒト単球THP-1細胞のHUVEC単層への接着

ヒト単球THP-1細胞のHUVEC単層への接着

48ウェルプレート上のHUVEC単層を1 μM PMAで12時間処理した後, LeukoTracker標識THP-1細胞を1時間接着させ,接着した細胞を溶解して定量した。

HUVEC単層

HUVEC単層

THP-1細胞

THP-1細胞

ヒト単球THP-1細胞のHUVEC単層への接着

HUVEC(左)またはTHP-1細胞(右)を,50 ng/mL TNF‐αまたは1 μM PMAで12時間処理した。HUVEC単層にLeukoTracker標識THP-1細胞(50,000 cells/well)を1時間接着させた後,接着細胞を溶解して定量した。

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CytoSelect Leukocyte-Epithelium Adhesion Assay Kit(#CBA-211)

白血球と上皮細胞の接着カスケード (クリックで開閉します)

慢性気管支炎,喘息,肺線維症,成人呼吸窮迫症候群(RDS)などの多くの肺疾患は気道炎症を伴います。循環炎症細胞が気道に流入する際には,細胞間接着分子と可溶性メディエーターの両方が関与します。多形核白血球(PMN)は,血管内皮を横断して気道内に蓄積します。PMNが内皮関門を越えると,走化性シグナルによって,しばしば気道の内腔および粘膜上皮細胞の近くにPMNが蓄積します。気道上皮細胞は,適切な刺激条件下では,PMNに作用するケモカインの供給源となり,またPMNの重要な接着リガンドである細胞間接着分子-1(ICAM-1)も発現します。したがって,気道上皮細胞は,PMNの保持と活性化にだけではなく,PMNが上皮細胞を横断して気道へ移動する際にも重要と考えられます。


測定例

ヒト単球THP-1細胞の定量

ヒト単球THP-1細胞の定量

LeukoTracker標識したTHP-1細胞を1×PBS中に懸濁させた後,2×Lysis Bufferで溶解した。

ヒト単球THP-1細胞のHUVEC単層への接着

ヒト単球THP-1細胞のA549単層のへの接着

A549単層を50 ng/ml TNFαまたは1μM PMAで12時間処理した。A549単層にLeukoTracker標識したTHP-1細胞(50,000 cells/well)を1時間接着させた後,接着細胞を溶解して定量した。

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CytoSelect Tumor-Endothelium Adhesion Assay Kit

がん細胞と内皮細胞の接着カスケード (クリックで開閉します)

がんの転移にはいくつかの段階があります。最初に腫瘍細胞が血管内に侵入し(浸潤),血流に流されて移動し,最後に血管から再び出て(溢出),体内の新しい場所に移動します。
腫瘍細胞の血管内皮への最初の捕捉と付着は,血流からの血管外溢出より前に起こる腫瘍転移カスケードの重要なステップです。腫瘍細胞の血管外への溢出は,多くの点で炎症組織への白血球の侵入と同様のステップを取ります。白血球の血管外溢出は,循環白血球の捕捉とその後の白血球のローリング,停止,堅固な接着,および移動を含む複数の連続したプロセスから成ります。腫瘍細胞の内皮細胞内層への接着は,内皮細胞の活性化または内皮の組織特異的な違いの影響を受け,特定の細胞表面分子の発現に依存していることが明らかになりつつあります。E-セレクチンと血管細胞接着分子-1(VCAM-1)は,腫瘍とECの相互作用において極めて重要な役割を果たすと考えられています。


測定例

ヒト単球THP-1細胞の定量

ヒト単球THP-1細胞の定量

CytoTracker標識したヒト乳がんMDA-231細胞を1×PBS中に懸濁させた後,2×Lysis Bufferで溶解した。

ヒト単球THP-1細胞の定量

CytoTracker標識したMDA-231細胞を48ウェルプレート中のHUVEC単層に1時間接着させた。接着した細胞を溶解して定量した。

ヒト単球THP-1細胞のHUVEC単層への接着

48ウェルプレート中のHUVEC単層を50 ng/ml TNFαで12時間処理した。CytoTracker標識したMDA-231細胞(50,000 cells/well)をHUVEC単層に1時間接着させた後,接着細胞を溶解して定量した。

ヒト乳がんMDA-231細胞のHUVEC単層への接着

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関連製品 CytoSelect 48-Well Cell Adhesion Assay

CytoSelect 48-Well Cell Adhesion Assay (クリックで開閉します)

各種細胞外マトリックスタンパク質に対する細胞の接着性を,比色法または蛍光法により簡便,迅速に測定するキットです。品名をクリックすると製品の詳細を,商品コードをクリックすると価格表をご覧いただけます。

細胞外マトリックスタンパク質 測定方法 測定波長 商品コード
Collagen Ⅰ 比色 560 nm CBA-052
蛍光 励起 480 nm/蛍光 520 nm CBA-053
Collagen Ⅳ 比色 560 nm CBA-060
蛍光 励起 480 nm/蛍光 520 nm CBA-061
ECM Array 比色 560 nm CBA-070
蛍光 励起 480 nm/蛍光 520 nm CBA-071
Fibrinogen 比色 560 nm CBA-058
蛍光 励起 480 nm/蛍光 520 nm CBA-059
Fibronectin 比色 560 nm CBA-050
蛍光 励起 480 nm/蛍光 520 nm CBA-051
Laminin 比色 560 nm CBA-056
蛍光 励起 480 nm/蛍光 520 nm CBA-057

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価格

[在庫・価格 :2021年05月08日 00時13分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。
詳細 商品名
  • 商品コード
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  • 価格
  • 在庫
  • 法規制等
納期 文献数
CytoSelect 96-well Leukocyte-endothelium Adhesion Kit (96assays)
1週間程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 7
説明文
白血球と内皮細胞の相互作用を測定するためのキット。蛍光プレートリーダーを用いて,接着細胞を簡単・高感度に定量することができる。アッセイ数:100 assays,検出方法:蛍光,測定波長:励起480 nm / 蛍光520 nm
法規制等
保存条件 4℃,-20℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2018年10月15日号 p.28

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1週間程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 3
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[在庫・価格 :2021年05月08日 00時13分現在]

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CytoSelect 96-well Leukocyte-endothelium Adhesion Kit (96assays)

文献数:7

説明文 白血球と内皮細胞の相互作用を測定するためのキット。蛍光プレートリーダーを用いて,接着細胞を簡単・高感度に定量することができる。アッセイ数:100 assays,検出方法:蛍光,測定波長:励起480 nm / 蛍光520 nm
法規制等
保存条件 4℃,-20℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2018年10月15日号 p.28

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文献数:0

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文献数:3

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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