白血球と内皮細胞の相互作用測定キット CytoSelect Leukocyte-Endothelium Adhesion Kit
掲載日情報：2020/06/12 現在Webページ番号：68622
白血球と内皮細胞の相互作用を測定するためのキットです。蛍光プレートリーダーを用いて、接着した白血球を簡単・高感度に定量することができます。
※ その他のCell Biolabs社製品についてはこちらをご覧下さい。
※本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。
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白血球と内皮細胞との相互作用について
血管周囲組織への白血球の血管外溢出は、炎症性疾患において重要な役割を果たしています。この溢出には白血球と血管内皮との相互作用を必要とし、循環白血球の捕獲とそれに続く回転、停止、強固な接着および移行を含む、多様で連続したプロセスから成ります（下図参照）。この多段階反応は、白血球における内皮細胞接着分子とそれらに特異的なリガンドとの一連の活性化依存的な相互作用によって実現されます。一過性接着と回転の第1段階は、白血球または内皮細胞セレクチンと、オリゴ糖を有するそれらのリガンドとの相互作用を介して行われることが知られています。白血球の停止と内皮へ強固な接着は、白血球細胞表面におけるβ2インテグリン様Mac-1またはLFA-1の活性化、そしてそれに続くICAM-1のようなIgスーパーファミリーに属する内皮細胞タンパク質との相互作用に依存しています。
白血球－内皮細胞の接着カスケード
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操作方法概略
1.Gelatin solutionをコートしたウェル内で内皮細胞を培養して単層をつくり、適切な活性化／阻害物質で処理する。
2.白血球をLeukoTracker solutionで標識し、ペレット化した後、洗浄および再懸濁する。
3.標識済み白血球懸濁液を内皮単層を含むウェルに加え、培養する。
4.洗浄後、接着した白血球を溶解して蛍光プレートリーダーを用いて定量する
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特長
- 内皮細胞に接着性を有する白血球を定量できます。
- キットには、96ウェルプレートで100 assay行うのに十分な試薬が含まれています。
- キットには、内皮細胞活性化用にTNF-αが含まれています。
- 目視の必要はありません。
- 測定波長：励起480 nm / 蛍光520 nm (蛍光法)
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測定例
図1．ヒト単球THP-1細胞の定量
LeukoTracker標識したTHP-1細胞をそれぞれの個数1×PBS中に懸濁させた後、2×Lysis Bufferで溶解した。
図2．ヒト単球THP-1細胞のHUVEC単層への接着
48ウェルプレート上のHUVEC単層を1 μM PMAで12時間処理した後、 LeukoTracker標識THP-1細胞を1時間接着させ、接着した細胞を溶解して定量した。
図3．ヒト単球THP-1細胞のHUVEC単層への接着のサイトカインによる活性化
HUVEC単層(左図)またはTHP-1細胞(右図)を、50 ng/mL TNF‐αまたは1 μM PMAで12時間処理した。HUVEC単層にLeukoTracker標識THP-1細胞（50,000細胞／ウェル）を1時間接着させた後、接着細胞を溶解して定量した。
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キット内容
- LeukoTracker solution
- Gelatin solution
- Lysis buffer
- Wash buffer
- TNF‐α
※ キットには細胞、培地およびプレート（96ウェルまたは48ウェル培養プレート）は含まれていません。別途ご用意下さい。
※ 測定には蛍光マイクロプレートリーダーが必要です。
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価格
[在庫・価格 ：2024年04月19日 10時15分現在]
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CytoSelect 96-well Leukocyte-endothelium Adhesion Kit (96assays) |
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[在庫・価格 ：2024年04月19日 10時15分現在]
CytoSelect 96-well Leukocyte-endothelium Adhesion Kit (96assays)
文献数： 7
- 商品コード：CBA-210
- メーカー：CBO
- 包装：1kit
- 価格：¥136,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：1週間程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 |
白血球と内皮細胞の相互作用を測定するためのキット。蛍光プレートリーダーを用いて，接着細胞を簡単・高感度に定量することができる。アッセイ数：100 assays，検出方法：蛍光，測定波長：励起480 nm / 蛍光520 nm |
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| 法規制等 | |||
| 保存条件 | 4℃,-20℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
ニュース2018年10月15日号 p.28
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| 製品記事 |
CytoSelect Endotherium Adhesion Assay Kit Cell Biolabs（セルバイオラボ）社製品特集 |
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