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メーカー：	Horizon社Dharmacon製品 OriGene Technologies
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DNA特異的な細胞核ライブイメージング試薬 NucleoSeeing^® （Live Nucleus Green）

掲載日情報：2020/09/30 現在Webページ番号：68107

フナコシ /
フナコシ株式会社
[メーカー略称：FNA]

NucleoSeeing^®はDNA特異的に結合し緑色蛍光を発するライブイメージング用核染色試薬です。動物細胞・組織のみならず、シロイヌナズナの葉細胞においても高いS/N比を示し、生細胞における核動態観察に優れています。また、☞ 核内pHセンシングへの応用も可能です。
※本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

NucleoSeeing<sup>®</sup>の使用例 — NucleoSeeing^®を用いた各種試料の染色例

**☞ HeLa細胞（左）**、**☞ シロイヌナズナ表皮細胞および孔辺細胞（中）**、**☞ マウス脳海馬のスライス培養組織（右）**をそれぞれ生細胞イメージングで観察した｡詳細は各データ例をご覧下さい。

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生細胞における細胞核イメージング
原理
特長
アプリケーション
データ例
NucleoSeeing^®ご使用ユーザー様の声
NucleoSeeing^®を用いた核内pHセンシング
原著論文
使用文献
価格

生細胞における細胞核イメージング

細胞核はDNAの貯蔵庫として細胞分裂や遺伝子発現制御などを担う、細胞で最も重要なオルガネラのひとつです。そのため、細胞核のダイナミックな動態をライブイメージングで観察することは、非常に重要な課題とされています。古くより様々な核染色試薬が開発されており、核酸応答性の青色蛍光色素であるHoechstシリーズやDAPIが広く活用されていますが、これら青色蛍光色素は励起光として紫外光を用いるため、光毒性が強く生細胞イメージングに適用できない問題がありました。近年、生細胞に適用可能な核染色試薬として緑色蛍光色素や赤色蛍光色素がいくつか開発されていますが、化合物の細胞毒性や核特異的染色性に課題があるとされています。

NucleoSeeing^® はDNA特異的結合タグを有しDNA存在時に緑色蛍光を発するDNA応答性プローブで、培養細胞、培養組織およびシロイヌナズナの葉の細胞などの植物細胞において、生細胞イメージングが可能です。本製品は細胞毒性が低く、DNA特異的な高いS/Nを示すため、優れた細胞核染色性を示します。固定細胞の観察も可能で、柔軟なアプリケーションを計画できます。
さらに、ユニークなpH依存的な蛍光特性を持ち、細胞核特異的なpHセンシングにも応用可能です。近年、核内pHの重要性が議論される中、核内pH測定の専用試薬としても期待されています。

※ ☞ 核内pH測定についてはこちらをご覧下さい。

各種細胞核染色用試薬の比較

染色試薬名	光特性			化合物の物性			観察方法
染色試薬名	測定波長励起／蛍光（nm）	蛍光色	光毒性^＊	核特異性	細胞膜透過性	細胞毒性	生細胞	固定細胞
NucleoSeeing^®	488 / 520	緑	低い	高い	透過	低い	○	○
Hoechst	350 / 461	青	高い	高い	透過	高い	○	○
DAPI	350 / 461	青	高い	高い	不透過	不明	✕	○
X社製品	485 / 498	緑	低い	中	透過	不明	○	○
Y社製品	646 / 680	赤	低い	高い	透過	高い	○	○

＊光毒性：光照射による細胞毒性

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原理

NucleoSeeing^®は膜透過性を有する緑色核染色試薬で、緑色蛍光色素とDNA特異的結合タグから構成されています。本試薬はDNAの非存在時は折り畳まれた構造を示し、消光状態にありますが、DNA結合時に構造が変わり、緑色蛍光を発することを利用しています。NucleoSeeing^®は細胞内に取り込まれた後、DNAに結合時のみ緑色蛍光を発するため、細胞核を特異的に観察することが可能です。

図をクリックすると拡大します（🔍）

NucleoSeeing^®の模式図

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特長

DNA結合時のみに緑色蛍光を発し、高いS/N比を示します。培地中では消光しているため、培地に添加した状態でも高感度な観察が可能です。
※ 感度を上げたい場合は、染色後に培地交換して観察することを推奨しています。
従来のHoechstなどの試薬と比べ、細胞毒性がほとんど見られません。
培地に本試薬を添加した状態であれば長時間イメージングが可能です。
FBSの影響が少なく、10%FBS条件下でも良好な染色が可能です。
※ FBS存在下では、試薬濃度を上げる必要があります（☞ FBSの影響についてを参照）。
生細胞イメージングのみならず、固定細胞での染色や、生細胞イメージング後に細胞を固定して観察することも可能で、免疫染色実験にも利用可能です。
動物由来培養細胞・組織、植物細胞（シロイヌナズナ葉細胞）で実績があり、いずれも高いS/N比で核染色が可能です。
植物細胞の観察時、葉緑体由来の自家蛍光（Em：＞615 nm）の影響を受けず、核のみを可視化することが可能です。
可逆的な染色が可能です。本試薬で染色後に培地交換することで、培地交換後12～24時間程度でほぼ完全に細胞外に排出されます。
励起／蛍光波長：488 nm / 520 nm
pH依存的な蛍光強度の変化が見られるため、pH6～8の間では、2波長の蛍光強度比（Ex 405 nm, Em 520 nm / 460 nm）を取ることで☞ 核内pHセンサーとして利用できます。

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アプリケーション

動物由来培養細胞の生細胞イメージング
植物細胞の生細胞イメージング
免疫染色における核染色
☞ 核内pHセンサー（pH 6～8）

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データ例

DNA応答性の蛍光特性と核特異的染色

NucleoSeeingの細胞毒性 — 左：**NucleoSeeing^®**はDNA存在時にのみ強い緑色蛍光を示す。励起488 nm。

右：生細胞において、DNA特異的な結合試薬であるHoechst33342（青）と**NucleoSeeing^®**（緑）で共染色を行ったところ、高い一致が見られた。

説明文	DNA特異的に結合し緑色蛍光を発するライブイメージング用の細胞核染色試薬。核特異性が高く，低毒性で，動物細胞・組織，シロイヌナズナの葉細胞において実績がある。核内pHセンシングへの応用も可能。
法規制等
保存条件	-20℃	法規備考
掲載カタログ	ニュース2023年2月15日号 p.20 ニュース2022年10月1日号 p.3
製品記事	生細胞用オルガネライメージング試薬植物研究製品特集
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