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神経変性疾患研究に有用なアミロイドβ(モノマー/オリゴマー/PFF体)タンパク質 Amyloid β(Monomer / Oligomer / Pre-formed Fibril)(StressMarq Biosciences社)

掲載日情報:2022/04/01 現在Webページ番号:67436

StressMarq Biosciences社の神経変性疾患研究に使用されるアミロイドβ モノマー(単量体, Monomer)、オリゴマー(Oligomer)、およびPFF体(Pre-formed fibril、既形成原線維)タンパク質をご紹介します。アルツハイマー病やパーキンソン病などの神経変性疾患の研究に有用です。
原線維とオリゴマーを区別するための抗アミロイドβ抗体については、「Amyloid β Fibril(OC)/ Oligomer(A11)Antibody」をご覧下さい。
その他の神経科学(Neuroscience)製品については「神経科学(Neuroscience)研究用 抗体/タンパク質」をご覧下さい。
本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

アミロイドβとは

Amyloid β(Aβ)はアミロイド前駆体タンパク質(APP)がβセクレターゼおよびγセクレターゼに切断されることで生じる37~49残基のペプチドです。切断されたAβは通常細胞外へ放出されて分解しますが、この過程の調節に異常が生じると蓄積してアミロイド線維を形成し、老人班と呼ばれる沈着を生じます。老人班の主成分はAβ40とAβ42で、Aβ42はより強力な神経毒性を示します。1992年に老人班が神経原線維変化の形成とそれに続く神経細胞死の責任因子であると示唆する報告がなされ、アミロイドカスケード仮説と呼ばれるようになりました。しかし、その後の研究の進展によりアルツハイマー病の発症とプラークの沈着量の相関が低いこと、Amyloid βプラークのない部位でも神経細胞死が生じることや、認知機能に異常のない脳内にもAmyloid βプラークが存在することが明らかになり、さらにアルツハイマー病患者のなかには脳内に病変が観察されないケースがあることも報告されるなど新たな観察が相次ぎ、アミロイドカスケード仮説は見直されるようになってきました。現在では老人班ではなくAmyloid βオリゴマーがアルツハイマー病の主たる病因ではないかというAmyloid βオリゴマー仮説が提唱されるようになり、オリゴマーによるシナプスの構造・機能の障害を標的とするような治療法の開発なども進められています。

オリゴマー、プロトフィブリル、フィブリル像

アミロイドモノマーからプラークへの変異イメージ



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アミロイドβの構造

StressMarq Biosciences社のミロイドβ(1-42)オリゴマーとPFF体(Pre-formed fibril、既形成原線維)は、既知の方法1, 2により1,1,1,3,3,3-HFIP(Hexafluoro-2-propanol)で前処理したアミロイドβペプチド1-42から生成されています。

アミロイドβペプチド(1-42)のPFF体(Pre-formed Fibril):透過型電子顕微鏡(TEM)や原子間力顕微鏡(AFM)で観察すると長鎖を形成し、抗アミロイドβ抗体を用いたウエスタンブロットでユニークな高分子シグナルを示します。

アミロイドβペプチド(1-42)オリゴマー:TEMやAFMで観察すると球状のオリゴマーであり、抗アミロイドβ抗体を用いたウエスタンブロットでユニークな二量体・三量体・オリゴマーのシグナルを示します。

Amyloid β MonomerのTEM像 Amyloid β OligomersのTEM像 Amyloid β Pre-formed FibrilsのTEM像

アミロイドβ モノマー(#SPR-485)、オリゴマー(#SPR-488)、およびPFF体(#SPR-487)の透過型電子顕微鏡(TEM)像


Amyloid βを用いたWB像

アミロイドβを用いたウエスタンブロット像

一次抗体:Anti-Amyloid β antibody(6E10)
左図:Amyloid β(1-42)Monomer(#SPR-485), 中央図:Amyloid β(1-42)Oligomer(#SPR-488), 右図:Amyloid β(1-42)Pre-formed Fibril(#SPR-487),
オリゴマーは、明確な二量体/三量体のバンドと37~75 kDaのシグナルを示し(中央図)、PFF体では100 kDa以上に加え、スタッキングゲルでもシグナルが見られた(右図)。



Amyloid β MonomerのAFM像

アミロイドβ モノマー(#SPR-485)、オリゴマー(#SPR-488)、およびPFF体(#SPR-487)の原子間力顕微鏡(AFM)像

左図:Amyloid β(1-42)Monomer(#SPR-485), 中央図:Amyloid β(1-42)Oligomer(#SPR-488), 右図:Amyloid β(1-42)Pre-formed Fibril(#SPR-487


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使用例

Amyloid β MonomerのTEM像 Amyloid β OligomersのTEM像 Amyloid β Pre-formed FibrilsのTEM像

アミロイドβを添加後のラット初代皮質ニューロン細胞の生存率

異なる濃度の(A)モノマー(#SPR-485)、(B)オリゴマー(#SPR-488)、(C)PFF体(#SPR-487)を処理した14日後のラット初代皮質ニューロンの生存率をMAP2陽性細胞数で定量し、コントロールに対するパーセンテージで表示した。
(C)のPFF体および溶媒コントロールは、最初にBioruptorで超音波処理した。すべての試験は、対応する未処理コントロール及び溶媒コントロールと同じプレート上で実施した。
データは平均 +/- s.e.m.(n=6)として表した。データの全体的な解析は、一元配置分散分析に続いてダネット検定を使用して行った;
** p<0.01 stats vs control; ## p<0.01, #### p<0.0001 stats vs vehicle control. § は未処理のコントロール。


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参考文献

  1. Stine, et al., JBC, 278(13):11612~11622(2003). doi: 10.1074/jbc.M210207200
  2. Ahmed, et al., Nature Structural & Molecular Biology, 17(5):561~567(2010). doi: 10.1038/nsmb.1799
  3. Panza, et al., Nat. Rev. Neurol., 15:73~88(2019).
  4. Shankar, et al., Nat. Med., 14(8):837~842(2008). doi: 10.1038/nm1782
  5. Chromy, et al., Biochemistry, 42:12749~12760(2003). doi: 10.1021/bi030029q
  6. Kayed, et al., Science, 300(5618): 486~489(2003). doi: 10.1126/science.1079469
  7. Want, et al., JAMA Neurol., 73(9):1070~1077(2016). doi: 10.1001/jamaneurol.2016.2078
  8. Kotzbauer, et al., Arch. Neurol., 69(10): 1326~1331(2012). doi: 10.1001/archneurol.2012.1608

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