HOME> 試薬> 細胞培養> 細胞培養一般試薬> 細胞/組織培養用基材> CellGem™シリーズ

シングルセル単離・培養用マイクロ流路デバイス CellGem™シリーズ

掲載日情報:2020/11/10 現在Webページ番号:67201

CellGem™シリーズはマイクロ流路を用いて,単一細胞の単離と培養(シングルセルクローニング)を行うことができるデバイスです。デバイス以外に専用の器具を必要とせず,一般的な実験器材があれば使用できます。FACSなどの専用機器と比較して遥かに安価かつ同等の高効率を実現し,モノクローナル抗体の作製や安定発現細胞株の樹立に有用です。

CellGemの外観図

CellGem™の外観図

既存のシングルセルクローニング法との比較

単一の細胞を単離し,培養するシングルセルクローニングは,単一クローン由来の細胞株を樹立するために必須の手法であり,モノクローナル抗体の作製過程におけるハイブリドーマ細胞株の樹立や,外部から導入した遺伝子を安定的に発現する細胞株の樹立などに用いられています。

シングルセルクローニングを行うための伝統的な手法である限界希釈法は大掛かりな機器を必要とせず,安価かつ精度の高い手法です。しかし,長時間の顕微鏡下での作業を必要とするため作業効率が低いうえに,大量のプレートと培地を用いるため多くの培養スペースが必要であるという問題がありました。限界希釈法以外の方法としてはFACSなどの専用機器を用いる方法があり,高効率での単一細胞の単離が可能となっています。しかし,これらの専用機器は大型かつ非常に高額であり,加えて単離した細胞へのダメージが問題となることがあります。

一方で,OriGem社で開発されたCellGem™は使い捨てのポリスチレン製マイクロ流路デバイスによって単一細胞の単離・培養を実現しています。CellGem™を用いた細胞の単離操作はピペット,ピンセット,遠心分離機,顕微鏡といった,ほとんどの研究室で保有している器具類で行えるため追加の機材を導入する必要はありません。単離効率も専用機器並みの高効率を実現しているため,限界希釈法と比較して培養を行うスペース,培地を節約することが可能です。さらに,価格の面でも専用機器に比べれば遥かに安価です。このように,CellGem™はシングルセルクローニングを,専用機器を持たない研究者にとっても身近な手法にする画期的な製品です。

シングルセルクローニングを行う際に必要となる培地とプレート数の比較

シングルセルクローニングを行う際に必要となる培地,プレート数の比較
左:CellGem™を用いた場合,右:限界希釈法を用いた場合

目次に戻る

原理

CellGem™デバイスの内部スペースには,細胞1つだけが入るサイズのごく微小なウェルと単離した細胞を培養するためのウェルが,図のように上下に向かい合う形で配置されています。細胞を単離する際には単離用のウェルが下に来る向きにデバイスを置き,細胞懸濁液を注入することで,このウェルに細胞がトラップされます。その後,トラップされなかった細胞を洗い流してからデバイスを裏返すことで,トラップされた細胞が向かい側の培養用のウェルに落下し,そのまま培養に移ることができるという仕組みになっています。培地の交換を行いながら培養を継続し,細胞が十分に増えてからデバイスを開封して細胞を回収することでシングルセルクローニングが完了します。CellGem™デバイスに配置されたウェルのうち70~80%が単一細胞を回収できることが確認されています(接着細胞,浮遊細胞を含む10種類の細胞での試験結果)。

CellGemによるシングルセルクローニングの仕組み CellGemによる各種細胞での使用実績

CellGem™によるシングルセルクローニングの仕組みと各種細胞での使用実績

CellGemによって単離された細胞と培養例

CellGem™によって単離された細胞と培養例

目次に戻る

アプリケーション

  • モノクローナル抗体の作製におけるハイブリドーマ細胞株の樹立
  • 外来遺伝子を恒常的に発現する安定発現株の樹立
  • 単一細胞レベルでの表現型解析および遺伝子発現解析

目次に戻る

製品内容・外観

単離したい細胞のサイズに応じてS(直径8~12μmの細胞向け), M(直径11~17μmの細胞向け) , L(直径14~25μmの細胞向け)の3種類がラインナップされています。製品の付属物は下記のとおりです。

  • デバイス本体:1枚,3枚,6枚入りのパッケージがあります。
  • プレート:1枚入りおよび3枚入りパッケージでは1枚,6枚入りパッケージでは2枚が付属しています。
  • Priming solution:実験の前にデバイス内部を洗浄するのに用います。
  • Sealing tape:下記のTank_FやTank_Sを取り外したあとにデバイスの蓋をするのに用います。生体適合性ポリオレフィン製です。
  • Tank_F:納品時にあらかじめデバイスに装着されています。使用前のデバイスの洗浄と細胞の注入に使用します。
  • Tank_S:単離した細胞を培養する時にデバイス本体に装着し培地交換に用います。
  • Open tool:培養後の細胞回収時にデバイスを開封するのに用います。
1枚入り、3枚入り、6枚入りパッケージの内容物の画像

1枚入り、3枚入り、6枚入りパッケージの内容物

Tank_FとTank_Sの装着例

Tank_FとTank_Sの装着例

目次に戻る

プロトコルの例・動画

以下に掲載するプロトコルは参考例です。用いる細胞種などによって最適な方法の検討を推奨いたします。

目的とする細胞種に適したCellGem™デバイスの選択

CellGem™には単離用ウェルのサイズに応じてS, M, Lの3種類のラインナップがあります。それぞれの製品と適合する細胞の例は以下の通りです。この表を参考に適切な製品をご選択下さい。

CellGemのサイズ S M L
細胞サイズ(μm) 8~12 11~17 14~25
適用細胞種の例 CHO-K1
Sp2/0-Ag14
Jurkat
Hybridoma
NIH3T3
HEK293
A549
U2OS
HaLa
MSCs

細胞懸濁液の調製とデバイスの事前処理

1. 細胞を5×105~2×106 cells/mlの密度になるように懸濁する。懸濁するバッファーとして以下のバッファーの中から目的の細胞の凝集が起こらないものを用いる。

  • 1×PBS
  • 低血清/無血清培地
  • FACS sorting buffer
  • Cell dissociation buffer

2. 1 mlのPriming solutionをデバイスに注入し,10~30秒間静置する(気泡が入った場合でも次のステップで除去される)。

3. 1 mlのPBSの注入・除去を3回行い,Priming solutionを置換する。デバイス中に気泡が残らないようにする。

単一細胞の単離と培養の準備

CellGemのハンドリング例(下記ステップ9まで)

1. ピペットで1 mlの1×PBSを片方のTank_Fの注入口からデバイス内部に注入する。この時デバイスを傾けて注入し,空気が外部に排出されるようにする。もし気泡がウェルに残る場合は注入口でピペッティングするか,シリンジで大量の1×PBSを注入し除去する。

PBSを片方のTank_Fの注入口からデバイス内部に注入する図

2. 500μlの細胞懸濁液をデバイスの片側から注入し,細胞が単離用のウェルに落下するまで3分間静置する。

細胞懸濁液をデバイスの片側から注入する図

3. デバイスの左右両方のTank_Fの注入口から500μlの1×PBSを加え,3分間静置する。

Tank_Fの注入口から1×PBS注入する図

4. 5 mlの1×PBSを5 mlシリンジで注入し単離されなかった細胞を洗い流す。注入と同時に反対側のTank_Fにあふれてきた細胞懸濁液は逆流しないように適宜除去する。その後3分間静置。
デバイス内部に気泡が入らないように,Tank_Fの注入口は液体に浸った状態を保つようにする。

PBSで細胞を洗い流す図

5. 5 mlの1×PBSを反対側の注入口から4.と同様に注入し単離されなかった細胞を洗い流す。3分間静置。

反対側の注入口からPBSで細胞を洗い流す図

6. 上記の洗浄操作を繰り返す。顕微鏡で観察して,デバイス内に単離されなかった細胞が残っていないことを確認する。

7. 細胞培養用の培地2 mlを注入し,1×PBSと置換する。その後,Tank_Fを取り外す。

培地を注入しPBSと置換してTank_Fを取り外す図

8. 製品付属のシーリングテープでTank_Fを取り外した後の注入口をふさぐ。もし必要な場合はシールする前に少量の培地を注入口に加え,気泡が入らないようにする。デバイスを裏返し,単離した細胞が培養用のウェルに落下するまで20分間静置する(オプション:100 gで2分間遠心でも可能)。

シーリングテープでTank_Fを取り外した後の注入口をふさぐ図

9. 製品付属のプレートにデバイスを収納し,適切な条件で細胞培養を行う。乾燥防止のためプレート中に1×PBSなどを適宜加えておく。

培養中の培地交換と培養後の細胞回収

1. 培養開始2~3日後にデバイスの2つのプラグのうち片側をピンセットで取り外す。プラグを取り外してできた開口部に20μlの培地を加える。

2つのプラグのうち片側をピンセットで取り外す図

2. 開口部にTank_Sを装着し,培地で満たす。もう片方のプラグを取り外しそちらにもTank_Sを装着した後,200μlの培地を加える。片側のTank_Sから100μlの培地を除去し,もう片方のTank_Sに100μlの培地を加える。この操作を2回繰り返す。

開口部にTank_Sを装着して培地を加える図

3. Tank_Sを装着したままのデバイスを製品付属のプレートに収納し,引き続き培養を継続する。


4. 培養開始後1週間程度の後,細胞が十分増殖したタイミングで,細胞回収を行う。まず,Tank_Sに残った培地を除去する。

5. 100μlの1×PBSを片側のTank_Sに加え,もう一方のTank_Sからあふれてきた培地を除去する。100μlのトリプシン溶液を加え3~5分間インキュベートする。

PBSを片側のTank_Sに加えて培地を除去する図

6. 培地を加えトリプシン溶液を置換する。Tank_Sを取り外し,付属のオープンツールでデバイスを開封する。丁寧に内ブタをはがし,2μlピペットで細胞を回収・移植する。

細胞を回収・移植する図

目次に戻る

価格

CellGem Single cell culture, S(8~12μmの細胞向け)

[在庫・価格 :2021年09月18日 00時14分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。
詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
  • 価格
  • 在庫
  • 法規制等
納期 文献数
CellGem Single cell culture, S, one chip set
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
単一細胞の単離・培養(シングルセルクローニング)を行うためのマイクロ流路デバイス。モノクローナル抗体作製時のハイブリドーマ細胞株の樹立や安定発現細胞株の樹立に有用。特別な器具を必要とせずに,専用機器並みの高効率を実現。Sサイズ×1。
法規制等
保存条件 室温 法規備考
掲載カタログ ニュース2021年6月15日号 p.37
ニュース2021年3月1日号 p.30

製品記事 細胞培養汎用品特集
関連記事
CellGem Single cell culture, S, three chips set
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
単一細胞の単離・培養(シングルセルクローニング)を行うためのマイクロ流路デバイス。モノクローナル抗体作製時のハイブリドーマ細胞株の樹立や安定発現細胞株の樹立に有用。特別な器具を必要とせずに,専用機器並みの高効率を実現。Sサイズ×3。
法規制等
保存条件 室温 法規備考
掲載カタログ ニュース2021年3月1日号 p.30

製品記事 細胞培養汎用品特集
関連記事
CellGem Single cell culture, S, six chips set
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
単一細胞の単離・培養(シングルセルクローニング)を行うためのマイクロ流路デバイス。モノクローナル抗体作製時のハイブリドーマ細胞株の樹立や安定発現細胞株の樹立に有用。特別な器具を必要とせずに,専用機器並みの高効率を実現。Sサイズ×6。
法規制等
保存条件 室温 法規備考
掲載カタログ ニュース2021年3月1日号 p.30

製品記事 細胞培養汎用品特集
関連記事

[在庫・価格 :2021年09月18日 00時14分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。

CellGem Single cell culture, S, one chip set

文献数:0

説明文 単一細胞の単離・培養(シングルセルクローニング)を行うためのマイクロ流路デバイス。モノクローナル抗体作製時のハイブリドーマ細胞株の樹立や安定発現細胞株の樹立に有用。特別な器具を必要とせずに,専用機器並みの高効率を実現。Sサイズ×1。
法規制等
保存条件 室温 法規備考
掲載カタログ ニュース2021年6月15日号 p.37
ニュース2021年3月1日号 p.30

製品記事 細胞培養汎用品特集
関連記事

CellGem Single cell culture, S, three chips set

文献数:0

説明文 単一細胞の単離・培養(シングルセルクローニング)を行うためのマイクロ流路デバイス。モノクローナル抗体作製時のハイブリドーマ細胞株の樹立や安定発現細胞株の樹立に有用。特別な器具を必要とせずに,専用機器並みの高効率を実現。Sサイズ×3。
法規制等
保存条件 室温 法規備考
掲載カタログ ニュース2021年3月1日号 p.30

製品記事 細胞培養汎用品特集
関連記事

CellGem Single cell culture, S, six chips set

文献数:0

説明文 単一細胞の単離・培養(シングルセルクローニング)を行うためのマイクロ流路デバイス。モノクローナル抗体作製時のハイブリドーマ細胞株の樹立や安定発現細胞株の樹立に有用。特別な器具を必要とせずに,専用機器並みの高効率を実現。Sサイズ×6。
法規制等
保存条件 室温 法規備考
掲載カタログ ニュース2021年3月1日号 p.30

製品記事 細胞培養汎用品特集
関連記事

CellGem Single cell culture, M(11~17μmの細胞向け)

[在庫・価格 :2021年09月18日 00時14分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。
詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
  • 価格
  • 在庫
  • 法規制等
納期 文献数
CellGem Single cell culture, M, one chip set
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
単一細胞の単離・培養(シングルセルクローニング)を行うためのマイクロ流路デバイス。モノクローナル抗体作製時のハイブリドーマ細胞株の樹立や安定発現細胞株の樹立に有用。特別な器具を必要とせずに,専用機器並みの高効率を実現。Mサイズ×1。
法規制等
保存条件 室温 法規備考
掲載カタログ ニュース2021年3月1日号 p.30

製品記事 細胞培養汎用品特集
関連記事
CellGem Single cell culture, M, three chips set
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
単一細胞の単離・培養(シングルセルクローニング)を行うためのマイクロ流路デバイス。モノクローナル抗体作製時のハイブリドーマ細胞株の樹立や安定発現細胞株の樹立に有用。特別な器具を必要とせずに,専用機器並みの高効率を実現。Mサイズ×3。
法規制等
保存条件 室温 法規備考
掲載カタログ ニュース2021年3月1日号 p.30

製品記事 細胞培養汎用品特集
関連記事
CellGem Single cell culture, M, six chips set
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
単一細胞の単離・培養(シングルセルクローニング)を行うためのマイクロ流路デバイス。モノクローナル抗体作製時のハイブリドーマ細胞株の樹立や安定発現細胞株の樹立に有用。特別な器具を必要とせずに,専用機器並みの高効率を実現。Mサイズ×6。
法規制等
保存条件 室温 法規備考
掲載カタログ ニュース2021年3月1日号 p.30

製品記事 細胞培養汎用品特集
関連記事

[在庫・価格 :2021年09月18日 00時14分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。

CellGem Single cell culture, M, one chip set

文献数:0

説明文 単一細胞の単離・培養(シングルセルクローニング)を行うためのマイクロ流路デバイス。モノクローナル抗体作製時のハイブリドーマ細胞株の樹立や安定発現細胞株の樹立に有用。特別な器具を必要とせずに,専用機器並みの高効率を実現。Mサイズ×1。
法規制等
保存条件 室温 法規備考
掲載カタログ ニュース2021年3月1日号 p.30

製品記事 細胞培養汎用品特集
関連記事

CellGem Single cell culture, M, three chips set

文献数:0

説明文 単一細胞の単離・培養(シングルセルクローニング)を行うためのマイクロ流路デバイス。モノクローナル抗体作製時のハイブリドーマ細胞株の樹立や安定発現細胞株の樹立に有用。特別な器具を必要とせずに,専用機器並みの高効率を実現。Mサイズ×3。
法規制等
保存条件 室温 法規備考
掲載カタログ ニュース2021年3月1日号 p.30

製品記事 細胞培養汎用品特集
関連記事

CellGem Single cell culture, M, six chips set

文献数:0

説明文 単一細胞の単離・培養(シングルセルクローニング)を行うためのマイクロ流路デバイス。モノクローナル抗体作製時のハイブリドーマ細胞株の樹立や安定発現細胞株の樹立に有用。特別な器具を必要とせずに,専用機器並みの高効率を実現。Mサイズ×6。
法規制等
保存条件 室温 法規備考
掲載カタログ ニュース2021年3月1日号 p.30

製品記事 細胞培養汎用品特集
関連記事

CellGem Single cell culture, L(14~25μmの細胞向け)

[在庫・価格 :2021年09月18日 00時14分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。
詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
  • 価格
  • 在庫
  • 法規制等
納期 文献数
CellGem Single cell culture, L, one chip set
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
単一細胞の単離・培養(シングルセルクローニング)を行うためのマイクロ流路デバイス。モノクローナル抗体作製時のハイブリドーマ細胞株の樹立や安定発現細胞株の樹立に有用。特別な器具を必要とせずに,専用機器並みの高効率を実現。Lサイズ×1。
法規制等
保存条件 室温 法規備考
掲載カタログ ニュース2021年6月15日号 p.37
ニュース2021年3月1日号 p.30

製品記事 細胞培養汎用品特集
関連記事
CellGem Single cell culture, L, three chips set
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
単一細胞の単離・培養(シングルセルクローニング)を行うためのマイクロ流路デバイス。モノクローナル抗体作製時のハイブリドーマ細胞株の樹立や安定発現細胞株の樹立に有用。特別な器具を必要とせずに,専用機器並みの高効率を実現。Lサイズ×3。
法規制等
保存条件 室温 法規備考
掲載カタログ ニュース2021年3月1日号 p.30

製品記事 細胞培養汎用品特集
関連記事
CellGem Single cell culture, L, six chips set
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
単一細胞の単離・培養(シングルセルクローニング)を行うためのマイクロ流路デバイス。モノクローナル抗体作製時のハイブリドーマ細胞株の樹立や安定発現細胞株の樹立に有用。特別な器具を必要とせずに,専用機器並みの高効率を実現。Lサイズ×6。
法規制等
保存条件 室温 法規備考
掲載カタログ ニュース2021年3月1日号 p.30

製品記事 細胞培養汎用品特集
関連記事

[在庫・価格 :2021年09月18日 00時14分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。

CellGem Single cell culture, L, one chip set

文献数:0

説明文 単一細胞の単離・培養(シングルセルクローニング)を行うためのマイクロ流路デバイス。モノクローナル抗体作製時のハイブリドーマ細胞株の樹立や安定発現細胞株の樹立に有用。特別な器具を必要とせずに,専用機器並みの高効率を実現。Lサイズ×1。
法規制等
保存条件 室温 法規備考
掲載カタログ ニュース2021年6月15日号 p.37
ニュース2021年3月1日号 p.30

製品記事 細胞培養汎用品特集
関連記事

CellGem Single cell culture, L, three chips set

文献数:0

説明文 単一細胞の単離・培養(シングルセルクローニング)を行うためのマイクロ流路デバイス。モノクローナル抗体作製時のハイブリドーマ細胞株の樹立や安定発現細胞株の樹立に有用。特別な器具を必要とせずに,専用機器並みの高効率を実現。Lサイズ×3。
法規制等
保存条件 室温 法規備考
掲載カタログ ニュース2021年3月1日号 p.30

製品記事 細胞培養汎用品特集
関連記事

CellGem Single cell culture, L, six chips set

文献数:0

説明文 単一細胞の単離・培養(シングルセルクローニング)を行うためのマイクロ流路デバイス。モノクローナル抗体作製時のハイブリドーマ細胞株の樹立や安定発現細胞株の樹立に有用。特別な器具を必要とせずに,専用機器並みの高効率を実現。Lサイズ×6。
法規制等
保存条件 室温 法規備考
掲載カタログ ニュース2021年3月1日号 p.30

製品記事 細胞培養汎用品特集
関連記事

CellGem Single cell culture, SML(S,M,L各1枚ずつのセット品)

[在庫・価格 :2021年09月18日 00時14分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。
詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
  • 価格
  • 在庫
  • 法規制等
納期 文献数
CellGem Single cell culture, SML, three size set
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
単一細胞の単離・培養(シングルセルクローニング)を行うためのマイクロ流路デバイス。モノクローナル抗体作製時のハイブリドーマ細胞株の樹立や安定発現細胞株の樹立に有用。特別な器具を必要とせずに,専用機器並みの高効率を実現。S, M, Lの3サイズ各1つずつのセットとなります。
法規制等
保存条件 室温 法規備考
掲載カタログ ニュース2021年6月15日号 p.37
ニュース2021年3月1日号 p.30

製品記事 細胞培養汎用品特集
関連記事

[在庫・価格 :2021年09月18日 00時14分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。

CellGem Single cell culture, SML, three size set

文献数:0

説明文 単一細胞の単離・培養(シングルセルクローニング)を行うためのマイクロ流路デバイス。モノクローナル抗体作製時のハイブリドーマ細胞株の樹立や安定発現細胞株の樹立に有用。特別な器具を必要とせずに,専用機器並みの高効率を実現。S, M, Lの3サイズ各1つずつのセットとなります。
法規制等
保存条件 室温 法規備考
掲載カタログ ニュース2021年6月15日号 p.37
ニュース2021年3月1日号 p.30

製品記事 細胞培養汎用品特集
関連記事

目次に戻る

お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

製品情報は掲載時点のものですが、価格表内の価格については随時最新のものに更新されます。お問い合わせいただくタイミングにより製品情報・価格などは変更されている場合があります。
表示価格に、消費税等は含まれていません。一部価格が予告なく変更される場合がありますので、あらかじめご了承下さい。