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アルカリホスファターゼ（AP）によるES細胞の分化／未分化モニタリングキット StemTAG Alkaline Phosphatase Staining/Activity Assay Kit

掲載日情報：2020/06/12 現在Webページ番号：65651

セルバイオラボ /
Cell Biolabs. Inc.
[メーカー略称：CBO]

アルカリホスファターゼ（AP：Alkaline Phosphatase）の細胞染色と、AP活性の測定により、幹細胞の分化／未分化状態をモニタリングするキットです。APは、マウス／ヒトの胚性幹細胞（ES細胞）および胚性生殖細胞（EG細胞）で広く用いられているマーカーです。

※本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

胚性幹（ES）細胞のAP染色像

StemTAG Alkaline Phosphatase Staining Kit（#CBA-300）を用いた胚性幹（ES）細胞のAP染色像
左：LIF存在下では、未分化状態が維持されているために高いAP活性を示す。
右：LIF非存在下で5日間培養後、AP染色を実施した。様々な分化事象、細胞の平滑化、および増殖の減少を伴う細胞の拡大が観察された。

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ES細胞とアルカリホスファターゼ（AP）について

胚性幹細胞（ES細胞）は、内部細胞塊（ICM）から単離された継続的に増殖する幹細胞株です。マウスES細胞と同様に、ヒトES細胞は、膜アルカリホスファターゼ（AP）およびICMおよび生殖細胞系列の形成に極めて重要な転写因子であるOct-4を高レベルで発現します。しかし、ヒトES細胞は、マウスES細胞とは異なりstage-specific embryonic antigen（SSEA-1）を発現しません。さらに、ヒトES細胞の長期間の増殖には、一般的にフィーダー細胞として働く初期マウス胚性線維芽細胞（MEF：mouse embryonic fibroblast）との共培養が必要となります。ヒトES細胞株は、白血病抑制因子（LIF：leukemia inhibitory factor）などの外因性サイトカインやゼラチンをコートしたプレートを使用しても、支持フィーダー細胞の非存在下では未分化状態を維持できません。

マウスおよびヒトの多能性幹細胞の比較

マーカー名マウスES細胞マウスEG細胞ヒトES細胞ヒトEG細胞ヒトEC細胞
AP○○○○○
SSEA-1○○－○－
SSEA-4－－○○○
TRA-1-60－－○○○
TRA-1-81－－○○○
Oct-4○○○unknown○

ES細胞：胚性幹細胞（Embryonic stem cell）
EG細胞：胚性生殖細胞（Embryonic germ cell）
EC細胞：胚性がん腫細胞（Embryonic carcinoma cell）


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特長

  • 1つのキットで、胚性幹細胞および胚性生殖細胞におけるアルカリホスファターゼの細胞染色／活性測定をすることができます。
  • アルカリホスファターゼ活性を比色により測定するキット(#CBA-302)をご用意しています。
  • 細胞染色のみを行うキット(紫色染色キット：#CBA-306、赤色染色キット：#CBA-300)、および活性測定のみを行うキット(比色キット：#CBA-301）もあります。

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製品ラインナップ

商品コードをクリックすると、直接価格表がご覧いただけます。

品名 StemTAG Alkaline Phosphatase
Staining and Activity Assay Kit		 StemTAG Alkaline Phosphatase
Activity Assay Kit		 StemTAG Alkaline Phosphatase
Staining Kit
Colorimetric Fluorometric Colorimetric Fluorometric Purple Red
商品コード CBA-302 CBA-308 CBA-301 CBA-307 CBA-306 CBA-300
測定法 免疫細胞化学染色（IC）
／AP活性測定		 AP活性測定 免疫細胞化学染色（IC）
測定機器 光学顕微鏡／96ウェルプレートリーダー 光学顕微鏡／蛍光顕微鏡 96ウェルプレートリーダー 蛍光顕微鏡 光学顕微鏡 光学顕微鏡
検出方法 染色／呈色 染色／蛍光 呈色 蛍光 紫色染色 赤色染色
測定波長 405 nm －／励起480 nm／蛍光520 nm 405 nm 励起480 nm／蛍光520 nm －
アッセイ数 2×100 assay 2×100 assay 100 assay 100 assay 100 assay 100 assay
キット内容
Fixing solution ○ ○ － － ○ ○
StemTAG AP staining solution A、B ○ ○ － － － ○
StemTAG AP staining solution － － － － ○ －
StemTAG AP activity assay substrate ○ － ○ － － －
StemTAG AP fluorometric substrate － ○ － ○ － －
Cell lysis buffer ○ ○ ○ ○ － －
Stop solution ○ ○ ○ ○ － －
AP activity assay standard（p-Nitrophenol） ○ － ○ － － －
Reference standard（Sodium Fluorescein in PBS） － ○ － ○ － －

※ キットには細胞および培養用培地は含まれていません。別途ご用意下さい。
※ Activity Assay Kit（Colorimetric）の測定には405 nmで吸光度を測定できる96ウェルマイクロプレートリーダー、Staining Kitには光学顕微鏡が必要です。

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使用例

Colorimetric標準曲線およびAP活性アッセイ

StemTAG Alkaline Phosphatase Activity Assay Kit (Colorimetric)（#CBA-301または#CBA-302）の使用例
A：p-Nitrophenol（pNP）標準曲線
B：マウス胚性D3細胞をLIF存在下または非存在下で5日間培養した各細胞ライセートのAP活性測定結果

Fluorescein標準曲線およびAP活性アッセイ

StemTAG Alkaline Phosphatase Staining Kit (Purple) （#CBA-306）の使用例
高いAP活性はLIF存在下で未分化状態のマウス胚性D3細胞を示している。

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Cell Biolabs社 幹細胞研究用製品一覧

品名をクリックすると各製品群の個別記事がご覧いただけます。

カテゴリー品名製品概要
アルカリホスファターゼ検出StemTAG Alkaline Phosphatase Staining/Activity Assay Kitアルカリホスファターゼ（AP）マーカーを用いた免疫細胞化学染色（ICC）または96ウェルプレートでの比色法／蛍光法による活性定量により、幹細胞の分化または未分化を効率的にモニタリングするキット。
フィーダー細胞SNL Feeder Cell、MEF Feeder Cell幹細胞を未分化状態で維持するために使用される2種類のフィーダー細胞（MEFフィーダー細胞およびSNL 76/7フィーダー細胞）。
幹細胞解析用PCRプライマーStemTAG PCR Primer Set for Stem Cell Characterization幹細胞および三胚葉（内胚葉、中胚葉および外胚葉）マーカーである7種類のプライマー（Oct-4、NANOG、AFP、Flk-1、NCAM、GAPDH、β-Actin）がセットになったキット。RT-PCRにより、ES細胞の分化／未分化を効率的にモニタリングできる。
幹細胞コロニー形成アッセイStemTAG Stem Cell Colony Formation Assay (Cell Recovery Compatible)蛍光検出またはアルカリホスファターゼの活性測定により、ES細胞をわずか7～10日で定量するハイスループットアッセイキット。コロニーを回収し、さらなる培養または解析も可能。
ES細胞総タンパク質Total Protein - Murine Embryonic Stem Cell Line D3マウスES-D3細胞株から単離した総タンパク質。

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価格表

[在庫・価格 ：2025年04月26日 00時00分現在]

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StemTAG Alkaline Phosphatase Staining and Activity Assay Kit, Colorimetric (2×100assays)
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StemTAG Alkaline Phosphatase Staining and Activity Assay Kit, Colorimetric (2×100assays)

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StemTAG Alkaline Phosphatase Activity Assay Kit, Colorimetric (100assays)

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お問い合わせ先

（テクニカルサポート 試薬担当）

reagent@funakoshi.co.jp

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