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染色体に取り込まれずに遺伝子を持続的に発現できるベクター(エピソーマルベクター) Enhanced Episomal Vector (EEV)

掲載日情報:2017/02/16 現在Webページ番号:63198

oriP-EBNA1が組み込まれたエピソーマルベクターは,ウイルスを用いた遺伝子導入とは異なり,導入遺伝子がホストゲノムに組み込まれることがありません。また通常のプラスミドとは異なり,細胞分裂に伴って導入遺伝子が複製される利点があります。

System Biosciences社のEnhanced Episomal Vector (EEV) platformでは,このような従来のエピソーマルベクターの機能に加え,導入遺伝子の発現持続時間を増強するための改良が加えられています。そのため,導入遺伝子をホストゲノムに取り込ませずに長期間に渡って遺伝子を発現させたいアッセイに最適です。

染色体に取り込まれずに遺伝子を持続的に発現できるベクター(エピソーマルベクター) Enhanced Episomal Vector (EEV)のマニュアル 染色体に取り込まれずに遺伝子を持続的に発現できるベクター(エピソーマルベクター) Enhanced Episomal Vector (EEV)のマニュアル

エピソーマルベクター「Enhanced Episomal Vector」の特長

  • 従来のエピソーマルベクターでみられる細胞分裂に伴う導入遺伝子の減少を低減するよう,改良を加えられたエピソーマルベクターです。
  • in vitroアッセイおよびin vivoアッセイにおいて,数ヶ月間に渡っての遺伝子発現維持を期待できます。
  • 哺乳動物細胞,初代細胞,幹細胞に導入できます。
  • Cumate-Inducibleタイプは,導入遺伝子の発現をCumateスイッチで厳密に誘導・制御できます。

Cumateによる遺伝子発現システムについてはこちらをご覧下さい。

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エピソーマルベクター「Enhanced Episomal Vector」のベクターマップ

染色体に取り込まれずに遺伝子を持続的に発現できるベクター(エピソーマルベクター) Enhanced Episomal Vector (EEV)のベクターマップ

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Enhanced Episomal Vectorの使用例

EEVレポーターベクター(#EEV604A-1)のHEK293T細胞への導入例

EEVレポーターベクター(#EEV604A-1)のHEK293T細胞への導入例
左図:CAGs-GFP-Luc(#EEV604A-1)のベクターマップ
右図:遺伝子導入後2日および11日後の細胞の顕微鏡観察像(蛍光/位相差)

Cumate誘導性EEVレポーターベクター(#EEV605A-1)のHEK293T細胞への導入例

Cumate誘導性EEVレポーターベクター(#EEV605A-1)のHEK293T細胞への導入例
レポータ遺伝子の発現を誘導するために,水溶性Cumate(#QM150A-1)を毎日培地に添加した。添加2日後の時点で,GFPの発現を確認できた。その後,72日間(2.5ヵ月)に渡ってGFPの発現を観察できた。
左図:CuO-GFP-Luc(#EEV605A-1)のベクターマップ
右図:Cumate未添加,Cumate添加後の細胞の顕微鏡観察像(蛍光/位相差)

EEVレポーターベクター(#EEV604A-1)のHDDによるマウスへの導入例

EEVレポーターベクター(#EEV604A-1)のHDDによるマウスへの導入例
肝臓におけるルシフェラーゼの発現を,ベクター導入後80日まで観察した。導入後約40日まで,ルシフェラーゼが高発現した。

Cumate誘導性EEVレポーターベクター(#EEV605A-1)のHDDによるマウスへの導入例

Cumate誘導性EEVレポーターベクター(#EEV605A-1)のHDDによるマウスへの導入例
ベクター導入後,水溶性Cumate(#QM150A-1)を腹腔内注射し,ルシフェラーゼの発現を観察した。



System Biosciences社Enhanced Episomal Vectorのご購入時のご注意
営利団体・企業(Commercial Entity)にご所属の方は,Enhanced Episomal Vectorシリーズのうち,Cloning EEV Vector(#EEV600A-1,#EEV610A-1)をご購入いただくことはできません。予めご了承下さい。
ただし,System Biosciences社プラスミド作製サービスをご利用いただくことで,構築済みEEV Vectorを入手可能です。プラスミド作製サービスの詳細については当社受託担当までお問い合わせ下さい。
大学・官公庁研究所(Academic)にご所属の方は,Enhanced Episomal Vectorシリーズをすべてご購入いただけます。

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エピソーマルベクター「Enhanced Episomal Vector」に関するウェビナー

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エピソーマルベクター「Enhanced Episomal Vector」の価格

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Cumate Switchシステムで遺伝子発現誘導に必要なCumate

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