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細胞内の活性型低分子量Gタンパク質を検出するキット G-Protein Activation Assay Biochem Kit

掲載日情報:2014/06/05 現在Webページ番号:6289

細胞ライセート中の活性型Rhoファミリータンパク質(Cdc42 / Rac1 / RhoA)および活性型Rasを,分離・検出するキットです。

活性型低分子量Gタンパク質の定量キット G-LISA Small G-Protein Activation Assay Biochem Kit

特  長

  • 各活性型低分子量Gタンパク質(Cdc42 / Rac1 / RhoA / Ras)と特異的に結合するアフィニティビーズを用いて,細胞ライセート中から各低分子量Gタンパク質を分離・検出できます。
  • 活性型Cdc42,Rac1,RhoAの検出用試薬がセットになったCombo Biochem Kit(#BK030)と,各低分子量Gタンパク質を個別に検出するBiochem Kitがあります。
  • キット付属のグルタチオンアガロースビースは着色されているため,操作がしやすくなっています(下図参照)。
着色されたアガロースビーズ

着色されたアガロースビーズ

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検出原理

各低分子量Gタンパク質に対するエフェクター分子の相互作用ドメインがビーズ上にコートされています。試料中の活性型Gタンパク質をプルダウン法により回収します。

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各アフィニティビーズ上にコートされているエフェクタードメイン

低分子量
Gタンパク質
エフェクター分子 エフェクタードメイン 説 明
Cdc42 / Rac1 PAK PAK-PBD PAK(p21 activated kinase 1)のCdc42 / Rac1結合ドメイン(p21 Binding Domain)
RhoA Rhotekin Rhotekin-RBD RhotekinのRho結合ドメイン(Rho Binding Domain)
Ras Raf1 Raf1-RBD Raf1のRas結合ドメイン(Ras Binding Domain)

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操作方法概略

操作方法概略

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解 析 例

活性型Rhoウエスタンブロッティング解析

分離した活性型Rhoファミリータンパク質のウエスタンブロッティング解析

上図に示した各キットを用いて,Swiss 3T3細胞ライセート中の各活性型Rhoファミリータンパク質を検出した。本製品により,活性型Rhoファミリータンパク質のみが分離されており,不活性型Rhoファミリータンパク質は検出されていないことがわかる。
レーン左:組換え体活性型Hisタグ融合Rhoファミリータンパク質(ポジティブコントロール)
レーン中央:GDP処理した細胞ライセート
レーン右:GTPγS処理した細胞ライセート
レーン中央および右は,同量の細胞ライセート試料を使用している。

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キット内容

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共通

  • GTPγS (non-hydrolyzable GTP analog)
  • GDP
  • Cell lysis buffer
  • Wash buffer
  • Loading buffer
  • Stop buffer
  • Protease inhibitor cocktail
キット構成品 商品コード
BK030 BK034-S BK035-S BK008-S BK036-S
BK034 BK035 BK008 BK036
GST-tagged PAK-PBD protein on colored agarose beads
GST-tagged Rhotekin-RBD protein on colored agarose beads
GST-tagged Raf1-PBD protein on colored agarose beads
Cdc42 monoclonal antibody
Rac1 monoclonal antibody
RhoA monoclonal antibody
p21 RAS monoclonal antibody
His-tagged Cdc42 protein
His-tagged Rac1 protein
His-tagged Ras protein
His-tagged RhoA protein
DMSO

キットに付属のアフィニティビーズ,抗体,プロテアーゼ阻害物質カクテルは,個別にご購入いただくことも可能です。詳細は当社テクニカルサポート(試薬担当)までお問い合わせ下さい。

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価格

[在庫・価格 :2019年10月21日 23時07分現在]

※ 納期として表示している期間は弊社発注日からの「目安」となり、納期を保証する物ではございません。実際には長くかかる場合もございます。ご注意ください。
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RhoA/Rac1/Cdc42 Activation Assay Combo Biochem Kit (3×10assays)
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RhoA/Rac1/Cdc42 Activation Assay Combo Biochem Kit (3×10assays)

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Anti-Cdc42, Mouse-Mono

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  • 商品コード:ACD03
  • メーカー:CYO
  • 包装:2x200μl
  • 価格:¥81,000
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  • 商品コード:RT02-B
  • メーカー:CYO
  • 包装:6x2mg
  • 価格:¥342,000
  • 在庫:無(未発注)
  • 納期:1週間程度 
  • 法規制等:

説明文
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 4℃,乾燥状態(デシケータ内)で保存 法規備考
掲載カタログ

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Gタンパク質/環状ヌクレオチド