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細胞導入に適したmRNAを合成するキット mRNAExpress mRNA Synthesis Kit

掲載日情報:2012/06/16 現在Webページ番号:6197

哺乳動物細胞への導入に適した高純度なmRNAを合成するキットです。

特  長

  • 高濃度かつ高純度のmRNAを,強力なT7 RNA Polymeraseにより大量(20~40μg)に合成できます。
  • ARCA(anti-reverse cap analog),修飾核酸(5-methylcytidine-5'-triphosphateおよびpseudouridine-5'-triphosphate)と,Poly A tailを有するmRNAを合成できます。そのため,作製したmRNAの安定性が向上し,また宿主細胞への免疫応答を減少させます。
  • Phosphatase処理により,RNA末端の5' triphosphateを除去するため,宿主細胞への免疫応答を減少させます。
  • mRNAであるため,宿主細胞のゲノムに組み込まれることがありません。
  • キットにはスピンカラムが含まれており,合成したmRNAはそのまま使用できます。
  • 合成したRNAの導入量を調節することにより,一過性発現レベルの調節を容易に行えます(図2参照)。
  • 別売りの細胞導入試薬RNAFectionを用いることで,線維芽細胞やリンパ球を含む幅広い細胞種に導入できます。また,卵母細胞へのマイクロインジェクションや,in vitro翻訳にも使用できます。

本システムを用いて作製した,作製済みmRNAについては,フナコシホームページをご覧下さい。

図1:GFP(左)およびRFP(右)のmRNAの導入例
図中#は作製済みmRNAの商品コードを示しています。

図2:HEK293細胞への導入例

HEK293細胞に図中で示した量のmRNAExpress GFPを導入した。

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操作方法概略

1. 目的遺伝子の配列をpMRNAXP vectorにクローニングする。

2. Tail PCRによりPoly A tailを有するDNAテンプレートを作製後,市販のPCR産物精製用キットで精製を行う。

3. ARCAおよび修飾核酸を用いて,in vitro転写によりmRNAを合成する。

4. DNaseによるDNAテンプレートの分解および,phosphatase処理によるRNA末端の5' triphosphateの除去を行う。

5. スピンカラムによるmRNAの精製を行う。

6. mRNAの濃度を測定後,各種実験に用いる。

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キット内容

  • pMRNAXP vector
  • Sequencing primers (forward / reverse)
  • Tail PCR primer mix
  • Nuclease-free water
  • Reaction buffer
  • NTP / Cap mix
  • T7 RNA polymerase mix
  • RNase-free DNase
  • Phosphatase buffer
  • RNase-free phosphatase
  • Collection tube with filter cartridge
  • Collection tube
  • Binding buffer
  • Washing buffer
  • Elution buffer

[在庫・価格 :2019年10月16日 23時08分現在]

※ 納期として表示している期間は弊社発注日からの「目安」となり、納期を保証する物ではございません。実際には長くかかる場合もございます。ご注意ください。
詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
  • 価格
  • 在庫
  • 法規制等
納期 文献数
mRNAExpress mRNA Synthesis Kit (5reactions)
1週間程度  0
説明文
法規制等
保存条件 4℃,-20℃ 法規備考
掲載カタログ

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[在庫・価格 :2019年10月16日 23時08分現在]

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mRNAExpress mRNA Synthesis Kit (5reactions)

文献数:0

  • 商品コード:MR-KIT-1
  • メーカー:SBI
  • 包装:1kit
  • 価格:¥186,000
  • 在庫:無(未発注)
  • 納期:1週間程度 
  • 法規制等:

説明文
法規制等
保存条件 4℃,-20℃ 法規備考
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細胞導入用試薬

[在庫・価格 :2019年10月16日 23時08分現在]

※ 納期として表示している期間は弊社発注日からの「目安」となり、納期を保証する物ではございません。実際には長くかかる場合もございます。ご注意ください。
詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
  • 価格
  • 在庫
  • 法規制等
納期 文献数
RNAFection Transfection Reagent
1週間程度  0
説明文
法規制等
保存条件 4℃ 法規備考
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[在庫・価格 :2019年10月16日 23時08分現在]

※ 納期として表示している期間は弊社発注日からの「目安」となり、納期を保証する物ではございません。実際には長くかかる場合もございます。ご注意ください。

RNAFection Transfection Reagent

文献数:0

  • 商品コード:MR750A-1
  • メーカー:SBI
  • 包装:50μl
  • 価格:¥27,000
  • 在庫:無(未発注)
  • 納期:1週間程度 
  • 法規制等:

説明文
法規制等
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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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