細胞導入に適したmRNAを合成するキット mRNAExpress mRNA Synthesis Kit
掲載日情報：2012/06/16 現在Webページ番号：6197
哺乳動物細胞への導入に適した高純度なmRNAを合成するキットです。
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特長
- 高濃度かつ高純度のmRNAを、強力なT7 RNA Polymeraseにより大量（20～40μg）に合成できます。
- ARCA（anti-reverse cap analog）、修飾核酸（5-methylcytidine-5'-triphosphateおよびpseudouridine-5'-triphosphate）と、PolyA tailを有するmRNAを合成できます。そのため、作製したmRNAの安定性が向上し、また宿主細胞への免疫応答を減少させます。
- Phosphatase処理により、RNA末端の5' triphosphateを除去するため、宿主細胞への免疫応答を減少させます。
- mRNAであるため、宿主細胞のゲノムに組み込まれることがありません。
- キットにはスピンカラムが含まれており、合成したmRNAはそのまま使用できます。
- 合成したRNAの導入量を調節することにより、一過性発現レベルの調節を容易に行えます（図2参照）。
- 別売りの細胞導入試薬RNAFectionを用いることで、線維芽細胞やリンパ球を含む幅広い細胞種に導入できます。また、卵母細胞へのマイクロインジェクションや、in vitro翻訳にも使用できます。
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使用例
図1：GFP（左）およびRFP（右）のmRNAの導入例
※図中#は作製済みmRNAの商品コードを示しています。
図2：HEK293細胞への導入例
HEK293細胞に図中で示した量のmRNAExpress GFPを導入した。
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操作方法概略
1. 目的遺伝子の配列をpMRNAXP vectorにクローニングする。
2. Tail PCRによりPolyA tailを有するDNAテンプレートを作製後、市販のPCR産物精製用キットで精製を行う。
3. ARCAおよび修飾核酸を用いて、in vitro転写によりmRNAを合成する。
4. DNaseによるDNAテンプレートの分解および、phosphatase処理によるRNA末端の5' triphosphateの除去を行う。
5. スピンカラムによるmRNAの精製を行う。
6. mRNAの濃度を測定後、各種実験に用いる。
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キット内容
- pMRNAXP vector
- Sequencing primers (forward / reverse)
- Tail PCR primer mix
- Nuclease-free water
- Reaction buffer
- NTP / Cap mix
- T7 RNA polymerase mix
- RNase-free DNase
- Phosphatase buffer
- RNase-free phosphatase
- Collection tube with filter cartridge
- Collection tube
- Binding buffer
- Washing buffer
- Elution buffer
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価格
[在庫・価格 ：2024年04月20日 00時00分現在]
| 詳細 | 商品名 |
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mRNAExpress mRNA Synthesis Kit (5reactions) |
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[在庫・価格 ：2024年04月20日 00時00分現在]
mRNAExpress mRNA Synthesis Kit (5reactions)
文献数： 0
- 商品コード：MR-KIT-1
- メーカー：SBI
- 包装：1kit
- 価格：¥236,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：医薬用外劇物
| 説明文 | |||
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| 法規制等 | 医薬用外劇物 | ||
| 保存条件 | 4℃,-20℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
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細胞導入用試薬
[在庫・価格 ：2024年04月20日 00時00分現在]
| 詳細 | 商品名 |
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RNAFection Transfection Reagent |
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[在庫・価格 ：2024年04月20日 00時00分現在]
RNAFection Transfection Reagent
文献数： 0
- 商品コード：MR750A-1
- メーカー：SBI
- 包装：50μl
- 価格：¥35,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
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