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アポトーシスを特異的に検出するユニークなツール アポトーシス検出ELISA Kit
掲載日情報：2020/06/12 現在Webページ番号：4951
M30またはM5/M6抗体を用いたサンドイッチELISAにより、試料中のアポトーシスマーカーを高感度で比色定量するキットです。
脂肪性肝疾患の病名と分類法の変更について
2023年6月、欧州肝臓学会（EASL）と米国肝臓病学会（AASLD）、ラテンアメリカ肝疾患研究協会（ALEH）は合同で、脂肪性肝疾患の病名と分類法の変更を発表しました1。日本語での新たな病名は、日本消化器病学会のNAFLD/NASH診療ガイドライン作成委員会と日本肝臓学会の企画広報委員会が合同で検討し、2024年8月に正式に発表されました2。
変更後の病名
- Steatotic Liver Disease（SLD）：脂肪性肝疾患
- Metabolic Dysfunction Associated Steatotic Liver Disease（MASLD）：代謝機能障害関連脂肪性肝疾患
- Metabolic Dysfunction Associated Steatohepatitis（MASH）：代謝機能障害関連脂肪肝炎
参照
- Rinella, M.E., et al., "A multisociety Delphi consensus statement on new fatty liver disease nomenclature.″ Hepatology, 78(6), 1966～1986(2023). [PMID:37363821]
- 一般財団法人日本消化器病学会. "脂肪性肝疾患の日本語病名に関して". 一般財団法人日本消化器病学会. 2024-09-03. https://www.jsge.or.jp/news/20240820-3/?_fsi=ihRE4ghK&_fsi=MEBtvwvp（参照 2024-10-22）
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M30 CytoDEATH抗体とM5/M6 CytoKERATIN抗体について
上皮系細胞においてアポトーシスが起きると、中間径タンパク質のサイトケラチン18（CK18）がカスパーゼにより3つに切断されます。
M30 CytoDEATH抗体は断片の1つ、neo-epitopeのC末端Asp396を特異的に認識します。この抗体は、上皮由来の細胞や組織切片においてアポトーシスを検出するゴールドスタンダードとして広く用いられています。M5/M6 CytoKERATIN抗体はCK18の中間部（aa 284～396）を認識する抗体です。全長およびカスパーゼによる切断片の両方を認識するため、アポトーシスとネクローシスを含む細胞死の検出に有用です。アポトーシスの検出において、カスパーゼ活性は一時的なものであり変化しますが、CK18は蓄積されるため、これらの抗体を用いることで、より正確なアポトーシスの検出が可能です。
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測定原理
- 上皮系細胞においてアポトーシスやネクローシスが起きるとCK18（サイトケラチン18）が細胞から放出される。また、アポトーシスの場合caspase-3により CK18が3つに切断される。
- M65 ELISAは、M5またはM6抗体によりCK18およびその断片を捕捉する。
→細胞死（アポトーシスとネクローシス）を検出。 - M30 ELISAは、caspase-3により3つに切断されたCK18の断片をM5またはM6抗体で捕捉し、Asp396-neo-epitopeをM30抗体で特異的に認識する。
→アポトーシスのみを検出。
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特長
- Caspase活性は一時的であり変化しますが、本製品の検出対象である切断されたCK18断片は蓄積されるため、より正確にアポトーシスの定量ができます。
- 上皮細胞由来のさまざまながんの研究に使用されています。
- M30 CytoDEATH ELISA Kit（#10900）は、ヒト、サルおよびウシ由来の細胞抽出物および細胞培養上清中のアポトーシスマーカーの検出に最適化されています＊2。また、測定可能試料数が多いため、細胞を使用したスクリーニングなどの目的に適しています。
- M30抗体およびM5抗体はげっ歯類のCK18には反応しないことが確認されています。ヒトのがんを移植したマウスを用いた異種移植モデル（Xenograft）で、ヒトがん細胞のアポトーシスを特異的に検出できます。
- スタンダードおよび基質はReady-to-useのため、操作は簡便です。
＊2 #10900は血清および血漿試料の測定には適していません。
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製品の仕様
商品コードをクリックすると価格表をご覧いただけます。
| キット名 | M30 Apoptosense | M30 CytoDEATH |
|---|---|---|
| 商品コード | 10011 | 10900 |
| 検出対象 | アポトーシス | |
| 捕捉用抗体 | M5 | M6 |
| 検出用抗体 | M30 | |
| 測定動物種 | ヒト | ヒト、サル、ウシ |
| 測定試料 | 血清、血漿（EDTA、ヘパリン処理）、 細胞培養上清、細胞抽出液 |
細胞抽出物、細胞培養上清 |
| 測定方法 | 比色 | |
| 測定波長 | 450 nm | |
| 測定範囲 | 75～1,000 U/L | 250～3,000 U/L |
| 測定感度 | 20 U/L | 60 U/L |
| 測定可能試料数 （in duplicate） | － | 44 |
| コントロール | 含む | 含まない |
| スタンダードの測定点数 | 7 | 4 |
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適用
| 研究分野 | 概説 |
|---|---|
| 肝臓学 |
|
| 腫瘍学 |
|
| 毒物学 |
|
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NASHとサイトケラチン18
NASHについて
NASH（非アルコール性脂肪性肝炎）は進行性で深刻なNAFLD（非アルコール性脂肪肝疾患）で、ここ数十年の間に世界的な肝疾患の主要原因の1つとなり人々の健康上の問題となっています。罹患患者数は急速に増加し、NASHは今日の世界人口のかなりの割合を占めています。全世界のNAFLDの発生率は約20～35％であり、このうち約10～30％がNASHです。絶対数では、約3億7,500万人がNASHに相当します。肥満と糖尿病の人口の中で、NAFLDとNASH患者の数ははるかに多く、それぞれ75～95％、40％であると報告されています。
NAFLDとNASHは、今後10年間で肝臓関連の罹患率と死亡率の主な原因になると予測されています。NASHは、線維症を伴うまたは伴わない炎症、細胞傷害およびバルーニングを伴う単純な脂肪症として特徴付けられます。またNASHは、肝硬変、肝不全および肝細胞がん（HCC）に進行する可能性があり、劇的に増加した肝臓関連および心血管系死亡率にも関連しています。
NASHにおけるサイトケラチン18の役割について
NASHに述べられている肝細胞の炎症は、主にアポトーシスによる肝細胞の細胞死によって引き起こされることで特徴付けられます。肝細胞のアポトーシスの早い段階で、カスパーゼ（プロテアーゼの一種）が活性化され、サイトケラチン18（別名：K18）が切断され、続いて生じたフラグメントが血中に放出されます。VLVbio社のM30 Apoptosense ELISA Kit（#10011）は、このK18フラグメントを高い信頼性で非侵襲的かつ効率的に定量することができ、NASHの検出とスクリーニングにきわめて有用なツールです。
M30 Apoptosense ELISA Kitによるサイトケラチン18の定量
上の結果は、M30 Apoptosense ELISA Kit（#10011）を用いてサイトケラチン18濃度を測定することにより、健康人、NAFL, NASH予備群およびNASH患者間の有意な識別を可能にすることを示しています。
肥満患者の血漿サイトケラチン18（K18）濃度とNAFLDの組織学的スペクトラム
M30 Apoptosense ELISA Kit（#10011）を用いて測定した肥満患者の血漿サイトケラチン18（K18）濃度とNAFLDの組織学的スペクトラム（脂肪化、バルーニング、炎症、線維化およびNAFLD Activity Score）は相関することを示しています。
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技術資料
画像をクリックするとPDFをダウンロードできます。
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キット内容
- Coated microstrip＊3
- HRP conjugate
- Conjugate dilution buffer
- Standard＊3
- Control low and high（#10011のみ）
- TMB substrate
- Stop solution
- Wash tablet
＊3キットにより内容が異なります。
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参考文献
- Roth, G. A. et al., Shock, 22 (3), 218～220 (2004).[PMID:15316390]
- Kramer, G. et al., Br. J. Cancer, 94 (11), 1592～1598 (2006).[PMID:16685278]
- Olofsson, M. H., et al., Clin. Cancer Res., 13 (11), 3198～3206 (2007).[PMID:17545523]
※ この他の参考文献はこちらをご覧下さい。
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関連製品
M30 ELISAとM65 ELISAを組み合わせて使用することで、細胞死をより詳細に解析可能です。
⇒ M65 ELISAはこちらをご覧下さい。
[在庫・価格 ：2025年04月25日 20時55分現在]
| 詳細 | 商品名 |
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文献数 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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M30-Apoptosense ELISA Kit (96tests) |
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M30 CytoDEATH ELISA Kit (96tests) |
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[在庫・価格 ：2025年04月25日 20時55分現在]
M30-Apoptosense ELISA Kit (96tests)
文献数： 0
- 商品コード：10011
- メーカー：PVV
- 包装：1kit
- 価格：¥156,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：2～3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | |||
|---|---|---|---|
| 法規制等 | |||
| 保存条件 | 4℃,凍結禁止 | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
ニュース2021年10月15日号 p.7
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| 製品記事 | アポトーシス検出キット特集 MASLD / MASH研究用試薬 |
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| 関連記事 | |||
M30 CytoDEATH ELISA Kit (96tests)
文献数： 6
- 商品コード：10900
- メーカー：PVV
- 包装：1kit
- 価格：¥128,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：2～3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | ※血清および血漿試料の測定には適していません。 アポトーシスの過程でサイトケラチン18 がcaspasesにより分解されて生じるM30エピトープをELISAで検出するキット。アポトーシスのみを検出可能。感度：60 U/L，測定範囲：250-3,000 U/L，測定波長：450 nm，測定試料：培養上清,ライセート，種交差性：Bovine/Human/Monkey，検出方法：呈色，アッセイ法：ELISA，アッセイ数：96tests |
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|---|---|---|---|
| 法規制等 | |||
| 保存条件 | 4℃,暗所保存,凍結禁止 | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
ニュース2019年10月1日号 p.31 ニュース2017年10月15日号 p.8
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| 製品記事 | |||
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