ミニサークル作製用製品 Minicircle DNA System
掲載日情報：2020/06/12 現在Webページ番号：4900
目的遺伝子を発現するMinicircleを作製するためのベクターと宿主E. coli株です。
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- Minicircleとは
- 特長
- 使用例
- 操作方法概略
- Minicircle作製用ベクターおよび宿主E. coli株ご購入時のご注意
- Parental Plasmid
- ポジティブコントロール
- MC-Easy Minicircle DNA Production Kit
- 宿主E. coli株
- 関連試薬
Minicircleとは
Minicircle（MC）は非ウイルス性のDNAで、ΦC31を介した分子内組換えにより、元となるプラスミド（Parental Plasmid）DNAから作製されます。通常のプラスミドDNAと異なりバクテリア由来の複製開始点や抗生物質耐性遺伝子を有していません。また、メチル化やサイレンシングなどの影響を受けないため、Minicircleからの発現は長期間に渡って持続します。
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特長
- 作製したMinicircleは、ウイルスを用いずにReady-to-useでそのままトランスフェクションに使用でき、宿主細胞のゲノムに組み込まれることもありません。
- 作製したMinicircleは、in vivoおよびin vitroでのトランスフェクションに使用できます。
- Minicircleによるタンパク質発現は、通常のプラスミドを用いた場合よりも、高効率かつ長期間（最大14日間）発現が持続します。
- 元となるプラスミド（Parental Plasmid）や、Minicircleに組み込まれないバックボーン部分の混入がなく、免疫応答を引き起こす恐れはありません。
- プロモーターやレポーター遺伝子の異なる製品を多数ラインナップしています。
- 別売品のMC-Easy Minicircle DNA Production Kitは、Minicircleの作製および目的細胞への導入を、高品質かつ再現性高く行うのに有用な培地や試薬類をセットにした製品です。
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使用例
in vitroでの目的遺伝子の長期間発現
1μgのミニサークルDNA（pMC.CMV-MCS-EF1-GFPSV40PolyA, #MN511A-1）をHEK293細胞にトランスフェクションしたところ、1週間以上に渡り、強力に遺伝子発現が行われた。
in vivoでの目的遺伝子の長期間発現
（A）2μgおよび4μgのミニサークルDNA（CMV-GFP-Luc）をマウス尾部から高圧で導入（Hydrodynamic法）したところ、48時間後に優れたタンパク質発現を示した。
（B）プラスミドDNAを用いて導入された遺伝子は急速に発現が失われるが、ミニサークルDNAによって導入された遺伝子は数週間持続し、強力な発現を維持する。上記画像では、40μgのミニサークルDNAをHydrodynamic法でマウスに導入した。
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操作方法概略
- Parental Plasmidに目的遺伝子を挿入する。
- 宿主E. coli ZYCY10P3S2T株にParental Plasmidを導入し、MC-Easy Minicircle DNA Production Kitに含まれるMinicircle Growth Mediumを用いて培養する。
- Arabinoseまたは、MC-Easy Minicircle DNA Production Kitに含まれるInduction Mediumを添加すると、E. coli株内でΦC31インテグラーゼが発現し、Minicircleが作製される。また、SecⅠエンドヌクレアーゼが発現し、Parental Plasmidおよびバックボーンが分解される。
- 市販のプラスミド精製キットでMinicircleを精製する。
- MC-Easy Minicircle DNA Production Kitに含まれるMinicircle-safe DNaseを用いて、混入したParental plasmidおよびE. coliゲノムDNAを分解する。
- MC-Easy Minicircle DNA Production Kitに含まれるPrecipitation bufferおよびDNA Centrifugal filter columnを用いて、酵素を除去する。
- MC-Easy Minicircle DNA Production Kitに含まれるMC-Fectionを用いて、Minicircleを目的細胞に導入する。
E. coli ZYCY10P3S2T株にArabinoseを添加すると、Parental Plasmid（PP）からMinicircle（MC）が作製されていることがわかる。
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Minicircle作製用ベクターおよび宿主E. coli株ご購入時のご注意
Minicircle作製用ベクターおよび宿主E. coli株（価格表に「書類」が表示されている製品）は、大学・官公庁の研究所（Academic）にご所属の方が基礎研究目的で使用される場合にのみご購入いただけます。ご注文の際は、System Biosciences社使用目的確約書に必要事項をご記入の上、販売店担当者にお渡し下さい。
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Parental Plasmid
[在庫・価格 ：2024年04月20日 13時35分現在]
| 詳細 | 商品名 |
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文献数 | ||
|---|---|---|---|---|---|
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pMC.CMV-MCS-SV40PolyA |
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pMC.EF1-MCS-SV40PolyA |
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pMC.CMV-MCS-EF1-GFP-SV40PolyA |
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pMC.CMV-MCS-EF1-RFP-SV40PolyA |
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pMC.EF1-MCS-IRES-GFP-SV40PolyA |
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pMC.EF1-MCS-IRES-RFP-SV40PolyA |
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pMC.BESPX-MCS1 (Empty Vector) |
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pMC.BESPX-MCS2 (Empty Vector) |
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[在庫・価格 ：2024年04月20日 13時35分現在]
pMC.CMV-MCS-SV40PolyA
文献数： 0
- 商品コード：MN501A-1
- メーカー：SBI
- 包装：10μg
- 価格：¥147,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
pMC.EF1-MCS-SV40PolyA
文献数： 0
- 商品コード：MN502A-1
- メーカー：SBI
- 包装：10μg
- 価格：¥147,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
pMC.CMV-MCS-EF1-GFP-SV40PolyA
文献数： 0
- 商品コード：MN511A-1
- メーカー：SBI
- 包装：10μg
- 価格：¥171,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
pMC.CMV-MCS-EF1-RFP-SV40PolyA
文献数： 0
- 商品コード：MN512A-1
- メーカー：SBI
- 包装：10μg
- 価格：¥171,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
pMC.EF1-MCS-IRES-GFP-SV40PolyA
文献数： 0
- 商品コード：MN530A-1
- メーカー：SBI
- 包装：10μg
- 価格：¥171,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
pMC.EF1-MCS-IRES-RFP-SV40PolyA
文献数： 0
- 商品コード：MN531A-1
- メーカー：SBI
- 包装：10μg
- 価格：¥171,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
pMC.BESPX-MCS1 (Empty Vector)
文献数： 0
- 商品コード：MN100A-1
- メーカー：SBI
- 包装：10μg
- 価格：¥147,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
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ポジティブコントロール
[在庫・価格 ：2024年04月20日 13時35分現在]
| 詳細 | 商品名 |
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文献数 | ||
|---|---|---|---|---|---|
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pMC.CMV-GFP-SV40PolyA (Positive Control) |
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pMC.CMV-rRFP-SV40PolyA (Positive Control) |
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Pre-made Minicircle CMV-GFP-SV40PolyA (Positive Control) |
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Pre-made Minicircle CMV-rRFP-SV40PolyA (Positive Control) |
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[在庫・価格 ：2024年04月20日 13時35分現在]
pMC.CMV-GFP-SV40PolyA (Positive Control)
文献数： 0
- 商品コード：MN601A-1
- メーカー：SBI
- 包装：10μg
- 価格：¥147,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
pMC.CMV-rRFP-SV40PolyA (Positive Control)
文献数： 0
- 商品コード：MN602A-1
- メーカー：SBI
- 包装：10μg
- 価格：¥147,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
Pre-made Minicircle CMV-GFP-SV40PolyA (Positive Control)
文献数： 0
- 商品コード：MN601MC-1
- メーカー：SBI
- 包装：40μg
- 価格：¥147,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
追加しました。
MC-Easy Minicircle DNA Production Kit
[在庫・価格 ：2024年04月20日 13時35分現在]
| 詳細 | 商品名 |
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文献数 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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MC-Easy Minicircle DNA Production Kit (5preps) |
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MC-Easy Minicircle DNA Production Kit, with ZYCY10P3S2T Producer E. coli Strain (5preps) |
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[在庫・価格 ：2024年04月20日 13時35分現在]
MC-Easy Minicircle DNA Production Kit (5preps)
文献数： 0
- 商品コード：MN910A-1
- メーカー：SBI
- 包装：1kit
- 価格：¥144,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 |
キット内容：Minicircle growth medium, Induction medium, Endotoxin-free water, Minicircle-safe DNase, ATP, DNase buffer, Precipitation buffer, 2 ml DNA Centrifugal filter column, MC-Fection |
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|---|---|---|---|
| 法規制等 | |||
| 保存条件 | 室温,4℃,-20℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
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| 製品記事 | |||
| 関連記事 | |||
MC-Easy Minicircle DNA Production Kit, with ZYCY10P3S2T Producer E. coli Strain (5preps)
文献数： 0
- 商品コード：MN920A-1
- メーカー：SBI
- 包装：1kit
- 価格：¥226,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：カルタヘナ該当品
| 説明文 |
大学・官公庁の研究所にご所属の方のみ購入可能。※購入時に使用者確約書が必要です。 キット内容：ZYCY10P3S2T E. coli producer strain, Minicircle growth medium, Induction medium, Endotoxin-free water, Minicircle-safe DNase, ATP, DNase buffer, Precipitation buffer, 2 ml DNA Centrifugal filter column, MC-Fection |
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|---|---|---|---|
| 法規制等 | カルタヘナ該当品 | ||
| 保存条件 | 4℃,-20℃,-80℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
|
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| 製品記事 | |||
| 関連記事 | |||
追加しました。
宿主E. coli株
[在庫・価格 ：2024年04月20日 13時35分現在]
| 詳細 | 商品名 |
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文献数 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
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ZYCY10P3S2T E. coli Minicircle Producer Strain |
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[在庫・価格 ：2024年04月20日 13時35分現在]
ZYCY10P3S2T E. coli Minicircle Producer Strain
文献数： 0
- 商品コード：MN900A-1
- メーカー：SBI
- 包装：5vials
- 価格：¥120,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：カルタヘナ該当品
| 説明文 |
※購入時に使用者確約書が必要です ※大学・官公庁の研究所にご所属の方のみ購入可能。 Minicircle 作製用宿主E. coli株。 |
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|---|---|---|---|
| 法規制等 | カルタヘナ該当品 | ||
| 保存条件 | -80℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
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| 製品記事 |
Bioluminescent and Fluorescent Imaging Vector 幹細胞・iPS細胞研究用製品 System Biosciences社特集 |
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| 関連記事 | |||
追加しました。
関連試薬
[在庫・価格 ：2024年04月20日 13時35分現在]
| 詳細 | 商品名 |
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文献数 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
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Kanamycin Solution, 50mg/ml |
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Arabinose Induction Solution, 20% |
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[在庫・価格 ：2024年04月20日 13時35分現在]
Kanamycin Solution, 50mg/ml
文献数： 0
- 商品コード：MN800A-1
- メーカー：SBI
- 包装：20ml
- 価格：¥17,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | |||
|---|---|---|---|
| 法規制等 | |||
| 保存条件 | 4℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
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| 製品記事 |
幹細胞・iPS細胞研究用製品 System Biosciences社特集 |
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| 関連記事 | |||
Arabinose Induction Solution, 20%
文献数： 0
- 商品コード：MN850A-1
- メーカー：SBI
- 包装：20ml
- 価格：¥17,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | |||
|---|---|---|---|
| 法規制等 | |||
| 保存条件 | 4℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
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| 製品記事 |
幹細胞・iPS細胞研究用製品 System Biosciences社特集 |
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| 関連記事 | |||
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