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HOME > 試薬 > アポトーシス > アポトーシス細胞の検出／抽出キット > アポトーシス検出キット > TACS2 TdT in situ Apoptosis Detection Kit

TUNEL法によるアポトーシス検出用キット TACS2 TdT in situ Apoptosis Detection Kit

掲載日情報：2020/01/31 現在Webページ番号：471

アールアンドディー システムズ /
R&D Systems, Inc.
[メーカー略称：RSD]

アポトーシスの過程で生じる断片化DNAを、TUNEL法(TdT-mediateddUTPnickendlabeling)により検出するキットです。組織スライド中の断片化DNAをビオチン標識ヌクレオチドで標識した後、HRP標識ストレプトアビジンを反応させて染色します。検出試薬としてDAB、BlueLabel、FITCのいずれかを含む3種類の製品があります。TUNEL法によるアポトーシスした組織・細胞を染色する原理もご紹介します。

※ 本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

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アポトーシスとネクローシス

アポトーシスを起こした細胞は、クロマチンの凝集、DNAの断片化、細胞膜のブレブ（突起物）形成などの様々な形態変化を示し、周囲の貪食細胞に貪食・分解されます。ネクローシスを起こした細胞は、核、細胞質、リソソーム膜が分解し、最終的には細胞が膨張し、破壊されます。
⇒アポトーシスの詳細については、アポートシス特集をご覧ください。


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共通の特長

  • 凍結／パラフィン包埋／プラスチック包埋組織、固定細胞中のアポトーシスを検出できます。
  • 操作に必要な試薬がすべて含まれています。
  • 標識反応に必要なカチオン試薬（コバルトイオン、マグネシウムイオン、マンガンイオン）の使用濃度は最適化済みです。カチオンの選択については各試料別の推奨試薬の組み合わせ（下表参照）を参考にしていただくか、当社テクニカルサポート（試薬担当）までお問い合わせ下さい。
  • 各標識試薬にはTrevigen社独自のバッファーを採用しており、毒性のある成分は含まれていません。
  • TdTは高純度の精製品です。
  • ポジティブコントロール作製用試薬としてTACS-Nucleaseが、組織内に試薬を浸透させやすくするための試薬としてCytoninが添付されています。
  • 抗体などとの二重染色も可能です。

※染色試薬を含まないキット（Core Kit）や、試薬補充用のキット（Replenisher Kit）もあります。

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各キットの特長

■ TACS2 TdT DAB Kit

  • ビオチン標識dNTP、HRP標識ストレプトアビジン、DAB基質を用い、光学顕微鏡で検出します。
  • DAB基質は免疫組織染色で広く用いられています。
  • アポトーシスを起こした細胞を赤褐色に染色します。 対比染色として用いるMethyl Green染色液もキットに添付されています。

■ TACS2 TdT Blue Label Kit

  • ビオチン標識dNTP、HRP標識ストレプトアビジン、Blue Label基質を用い、光学顕微鏡で検出します。
  • Blue Label基質は、DABで指摘されているような発癌性は報告されていません。
  • アポトーシスを起こした細胞を青色に染色します。 対比染色として用いるNuclear Fast Redもキットに添付されています。

■ TACS2 TdT Fluorescein Kit

  • ビオチン標識dNTP、FITC標識ストレプトアビジンを用い、蛍光顕微鏡で検出します。
  • アポトーシスを起こした細胞を緑色蛍光に染色します。

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TUNEL法によるアポトーシスした組織・細胞を染色する原理

TUNEL法の検出原理

DNAの断片化により、DNAの末端に遊離3'-OH基が生じます。これは固定組織や固定細胞でも維持されます。TdT（Terminal deoxynucleotidyl transferase）はこの3'末端にヌクレオチドを転移する酵素で、標識ヌクレオチド（図中のN＊）を用いることで断片化DNAを標識し、染色することができます。

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染色・検出例

DABで検出したマウス胸部のアポトーシス

DABで検出したマウス胸部のアポトーシス
試料：ホルマリン固定／パラフィン包埋マウス胸部組織切片
茶色(DAB)：本製品により検出したアポトーシスを起こした細胞


Blue labelで検出したアルツハイマー患者の前頭皮質のアポトーシス

Blue labelで検出したアルツハイマー患者の前頭皮質のアポトーシス
試料：アルツハイマー病患者の前頭皮質
青色(Blue Label)：本製品により検出したアポトーシスを起こした細胞


Blue labelで検出したラット心筋のアポトーシス</span><br/> 試料：ラット心筋

Blue labelで検出したラット心筋のアポトーシス
試料：ラット心筋
青色(Blue Label)：本製品により検出したアポトーシスを起こした細胞

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各試料別の推奨試薬の組み合わせ例

試 料 カチオン溶液 発色基質 Cytonin Proteinase K
Co2＋ Mn2＋ Mg2＋ DAB Blue Label 1：50 1：200
脳 － ● － ● ● ● － ●
心臓＊ ● ● － － ● － ● －
肺 ● － － ● ● ● － ●
肝臓 ● ● － ● － － ● －
腎臓 － ● － ● ● － ● －
脾臓 ● － － ● － － ● －
十二指腸 ● － － ● － － ● －
大腸 ● ● － ● － ● ● －
小腸 ● ● － ● － ● ● －
結腸 ● － － － － ● ● －
骨・軟骨 － ● － ● ● ● ● －
神経＊ － － － ● － － － －
皮膚＊ － ● － － ● － ● －
培養細胞（乾燥） ● ● － － － ● ● －
培養細胞（新鮮） ● ● － － － ● － ●
上皮細胞 － ● － ● － － ● ●
内皮細胞＊ － ● － － ● － ● ●
線維芽細胞 － ● － ● ● － － －
造血細胞 ● － － ● － － － －
肝細胞 ● ● － ● － － － －
単球 － ● － － ● － － －
腫瘍＊ － ● ● ● － － － －

＊心臓（CardioTACS）、皮膚（DermaTACS）、神経（NueroTACS）、腫瘍（TumorTACS）、血管（VasoTACS）用に最適化されたキットもあります。詳細はフナコシホームページの製品検索をご利用いただくか、当社テクニカルサポート（試薬担当）までお問い合わせ下さい。
※ 使用するカチオンは1種類のみです。
※ 上表の組み合わせは一例です。

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キット内容

Tacs2 TdT Kit
（商品コード）		 DAB
（4810-30-K）		 Blue Label
（4811-30-K）		 Fluorescein
（4812-30-K）		 Core
（4810-30-CK）		 Replenisher
（4810-30-R）		 キット別売品
商品コード
TdT labeling buffer ● ● ● ● － 4810-30-02
TdT stop buffer ● ● ● ● － 4810-30-03
TdT dNTP mix ● ● ● ● ● 4810-30-04
TdT enzyme ● ● ● ● ● 4810-30-05
カチオン溶液（Co2+） ● ● ● ● ● 4810-90-09
カチオン溶液（Mg2+） ● ● ● ● ● 4810-90-10
カチオン溶液（Mn2+） ● ● ● ● ● 4810-90-14
Streptavidin-HRP ● ● － ● ● 4800-30-06
Streptavidin-fluorescein － － ● － － 4800-30-14
DAB solution ● － － － － 4800-30-07
DAB enhancer ● － － － － －
TACS Blue Label － ● － － － －
Blue streptavidin-diluent － ● － － －
Methyl green solution ● － － － － 4800-30-18
Nuclear fast red － ● － － － 4800-30-17
Proteinase K ● ● ● － ● 4800-30-01
Cytonin ● ● ● － － 4876-05-01
TACS-Nuclease ● ● ● － － 4800-30-N
TACS-Nuclease buffer ● ● ● － －

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価格

■TACS2 TdT Kit

[在庫・価格 ：2025年04月25日 16時35分現在]

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TdT In Situ Apoptosis Detection Kit - DAB
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TdT In Situ Apoptosis Detection Kit - DAB

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TdT dNTP Mix
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Terminal Deoxynucleotidyl Transferase (TdT) Enzyme
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Streptavidin, HRP Conjugate
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Streptavidin, FITC Conjugate
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DAB Solution <Diaminobenzidine>
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Methyl Green
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Nuclear Fast Red
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Proteinase K
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Cytonin
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TACS Nuclease
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TdT Labeling Buffer, 10×

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TdT dNTP Mix

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DAB Solution <Diaminobenzidine>

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Proteinase K

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Cytonin

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TACS Nuclease

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