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ハイスループットにDNAのバイサルファイト処理(亜硫酸水素塩処理)を行えるキット BisulFlash DNA Bisulfite Conversion Mag-96 Kit <Methylated DNA, 5-mC>

掲載日情報:2014/09/25 現在Webページ番号:46119

96ウェルプレートを用いて、ハイスループットにDNAのバイサルファイト処理(亜硫酸水素塩処理)を行えるキットです。マグネチックビーズを使用して、DNAの洗浄や精製を簡単に行うことができます。DNAメチル化研究に有用です。

特長

  • 非メチル化DNA中のシトシンからウラシルへの変換からビーズを用いたDNA精製までを、同一プレート上で行えます。
  • シトシンのウラシルへの変換効率は99.99%以上です。
  • 96ウェルフォーマットのため、マニュアル操作およびハイスループット解析のいずれにも適しています。
  • 培養細胞やホルマリン固定パラフィン包埋(FFPE)組織、血清や血漿などの生体試料から抽出したDNA試料を使用できます。
  • 本製品で処理・精製したDNA試料は、PCRやアレイ解析、メチル化DNA特異的PCR(MS-PCR)、次世代シークエンシングなどに使用できます。
  • バイサルファイト処理を含めて操作時間が1時間20分と、短時間で処理することが可能です。
  • 必要試料量:0.1~1μg DNA(100 ngを推奨)

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操作方法概略

BisulFlash DNA Bisulfite Conversion Mag-96 Kit操作方法概略
1. DNA試料とBisulFlash conversion mixを混合し、サーマルサイクラーで80℃で45分間インキュベートする。

2. 1.にDNA binding solution、Binding beadsを添加し、ピペッティングした後に、Mag 96 -well plateに移す。

3. プレートをマグネチックスタンドにセットして2分程度静置した後、ビーズを洗浄する。

4.Desulfonation bufferを添加して室温で15分間インキュベート後、洗浄する。

5. Elution bufferを添加し、ビーズ上のDNAを回収する。

本製品に96ウェルプレートフォーマットのマグネチックスタンドは含まれていません。EpiMag HT Magnetic Separator(下記参照)の使用をお勧めします。

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使用例

BisulFlash DNA Bisulfite Conversion Mag-96 Kitのメチル化DNA特異的qPCR (MS-qPCR)

本製品を用いて、様々な量のヒト由来ゲノムDNAをバイサルファイト処理した後、メチル化DNA特異的qPCR (MS-qPCR)を行った*
Methylamp MS-qPCR Fast Kitを使用。Methylamp MS-qPCR Fast Kitの詳細はこちら



本製品を用いてバイサルファイト処理後のシークエンス解析

DNAメチル化酵素ですべてのCpGサイトをメチル化したゲノムDNAを試料とし、本製品を用いてバイサルファイト処理を行った。その後、CpGサイトを多く含むプロモーターに対するプライマーを用いて、リアルタイムqPCRを行い、シークエンス解析を行った。DNA試料中の非メチル化シトシンのみが正確にチミンに変換されていることが分かる。

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キット内容

  • BisulFlash conversion mix
  • DNA binding solution
  • Desulfonation buffer
  • Elution buffer
  • Binding beads
  • Mag-96 well plate
  • Adhesive cover film

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価格

[在庫・価格 :2024年03月28日 20時15分現在]

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(テクニカルサポート 試薬担当)

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