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ミトコンドリア膜電位と活性型カスパーゼを同時検出するキット Dual Sensor MitoCasp
掲載日情報：2018/01/16 現在Webページ番号：3862
細胞毒性が無い膜透過性の異なる2種類の蛍光色素を用いることにより、カスパーゼ活性とミトコンドリア膜電位（⊿Ψ）をフローサイトメーターまたは蛍光顕微鏡で定性的または定量的に同時検出するキットです。アポトーシス誘導物質などによるアポトーシスの進行を解析する新しいアプローチとして注目されています。
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使用例
Jurkat細胞をDMSO（A）またはStaurosporine（B）で3時間処理し、本キットを用いて標識し、フローサイトメトリーで分析した（励起488 nm／蛍光FL1およびFL2）。
A：健常細胞はミトコンドリアに損傷が無いことを示す強い赤色蛍光を発し、またカスパーゼ活性を示す緑色蛍光が見られない。
B：アポトーシス細胞では、ミトコンドリア膜電位の消失に伴い赤色蛍光が消失し（y軸）、また活性型カスパーゼに伴う緑色蛍光が見られる（x軸）。
HeLa細胞をDMSO（A）またはStaurosporine（B）で3時間処理し、本キットを用いて標識し、フローサイトメトリーで分析した（励起488 nm／蛍光FL1およびFL2）。
C：健常細胞はミトコンドリアに損傷が無いことを示す強い赤色蛍光を発し、またカスパーゼ活性を示す緑色蛍光が見られない。
D： アポトーシスを発生した細胞では、ミトコンドリア膜電位の消失に伴い赤色蛍光が消失し（y軸）、また活性型カスパーゼに伴う緑色蛍光が見られる（x軸）。
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特長
- 本キットと他の抗体や染色方法とを組み合わせて解析を行うことが可能です。
- 測定試料：浮遊細胞、接着細胞
- 測定方法：フローサイトメトリー、蛍光顕微鏡、蛍光プレートリーダー
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製品の種類
商品コードをクリックすると価格表をご覧いただけます。全品の価格表はこちらをご覧下さい。
| 品名 | MitoCasp | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Poly caspase | Caspase-1 | Caspase-3/7 | Caspase-8 | Caspase-9 | ||
| 商品 コード |
25 tests | MITCAP100-1 | MITCAP600-1 | MITCAP200-1 | MITCAP300-1 | MITCAP400-1 |
| 100 tests | MITCAP100-2 | MITCAP600-2 | MITCAP200-2 | MITCAP300-2 | MITCAP400-2 | |
| 測定 条件 |
フローサイトメトリー | 励起488 nm／蛍光FL1およびFL2チャンネル | ||||
| 蛍光顕微鏡、 蛍光プレートリーダー |
・カスパーゼ活性：励起488 nm／蛍光515～530 nm ・ミトコンドリア膜電位の検出：励起488 nm（または549 nm）／蛍光600 nm（または574 nm） |
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| キット 内容 |
Mitochondria Membrane Potential Dye (Cationic Dye) |
● | ● | ● | ● | ● |
| Fluorescent substrate for caspase detection | FAM-VAD-FMK | FAM-YVAD-FMK | FAM-DEVD-FMK | FAM-LETD-FMK | FAM-LEHD-FMK | |
| Dilution buffer | ● | ● | ● | ● | ● | |
| Wash buffer | ● | ● | ● | ● | ● | |
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測定原理
A. カスパーゼ活性の測定
カスパーゼ酵素は、その基質におけるアスパラギン酸残基を含む4アミノ酸配列を特異的に認識し、アスパラギン酸残基のカルボニル末端で切断します。カスパーゼは、免疫沈降、カスパーゼ特異的抗体を用いたイムノブロッティングまたはカスパーゼによる切断時に蛍光性になる蛍光性基質を用いることで検出できます。MitoCaspは、細胞透過性で細胞無毒性のカスパーゼのペプチド阻害物質、カルボキシフルオレセイン（FAM）標識フルオロメチルケトン（FMK）を用いています。この阻害物質が細胞内に入ると活性型カスパーゼに共有結合し、緑色の蛍光を示します。阻害物質が結合した細胞は、フローサイトメトリーまたは蛍光顕微鏡により分析できます。
B. ミトコンドリア膜電位の測定
本製品では、ミトコンドリア膜電位を視覚化するために、低膜電位では非特異的な細胞透過性で細胞無毒性の陽イオン性色素を使用しています。健常細胞においては、この色素はミトコンドリア中に蓄積し、膜電位（⊿Ψ）に比例して赤色領域の高い蛍光強度をもたらします。ミトコンドリア膜電位が損なわれたアポトーシス細胞では、カチオン性色素はミトコンドリアに蓄積されないため、より低い蛍光シグナルを示します。
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関連製品
商品コードをクリックすると価格表をご覧いただけます。
| 品名 | 商品コード | 測定 方法 |
測定因子 | 測定波長 | 製品概要 | |
|---|---|---|---|---|---|---|
| フローサイトメトリー | 蛍光顕微鏡、 蛍光プレートリーダー |
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| Fluoro ssDNA Caspase 3（DNACasp） | DNACASP3 | 蛍光 | DNA損傷 | 励起488 nm／蛍光530 nm (FL-1) | 励起488 nm／蛍光515～530 nm | アポトーシス細胞における一本鎖DNAの損傷および活性型カスパーゼ3を各々に特異的な抗体を用いて、蛍光法により同時測定するキット |
| 活性型 カスパーゼ-3 |
励起633 nm／蛍光670 nm(LP) (FL-4) | 励起488 nm／蛍光515～530 nm | ||||
追加しました。
アポトーシスとカスパーゼ、ミトコンドリア膜電位の関連性について
アポトーシスは、進化的に保存された細胞死の形態で、特殊な細胞プロセスに従っています。このプロセスの中心的な要素は、カスパーゼと呼ばれるタンパク質分解酵素のカスケードです。この酵素は、アポトーシス促進シグナルに応答して誘導され、タンパク質基質の切断および細胞分解の一連の反応に関与しています。カスパーゼは、C. elegans からヒトに至る生物において同定されています1。
哺乳類のカスパーゼは、アポトーシスおよび炎症において異なる役割を果たしています。アポトーシスでは、カスパーゼは細胞分解（effector caspases）をもたらすタンパク質分解性切断に関与し、上流の調節事象（initiator caspases）に関与しています。活性型カスパーゼは、2つの大きなサブユニット（～20 kDa）と2つの小さなサブユニット（～10 kDa）からなり、そのヘテロ二量体2つからなる四量体を形成します2～4。他のプロテアーゼと同様に、カスパーゼは前駆体として合成され、自己触媒的に、または同様の特異性を有する酵素によるカスケードにおいてタンパク質の分解に携わっています5。
一方で、アポトーシスの特徴としてミトコンドリア膜電位（ΔΨ）の消失が挙げられます。細胞アポトーシスの誘導において、ミトコンドリアの透過性転移は重要なプロセスであり、ミトコンドリア膜を横切る電気化学勾配（ΔΨ）が崩壊します。この崩壊は、二量体化Baxまたは活性化Bid、BakまたはBadタンパク質によるミトコンドリア内の孔の形成によって起こると考えられています。これらのアポトーシス促進性タンパク質が活性化されると、シトクロムcが細胞質に放出されます6～9。
参考文献
- Slee, E. A., et al., Cell Death and Differ., 6, 1,067～1,074 (1999).
- Walker, N. P., et al., Cell, 78, 343～352 (1994).
- Wilson, K. P., et al., Nature, 370, 270～275 (1994).
- Rotonda, J., D. W., et al., Nature Struct. Biol., 3(7), 619～625 (1996).
- Kumar, S., Cell Death and Differ., 6, 1,060～1,066 (1999).
- Desagher, S., et al., J. Cell Biol., 144 (5), 891～901 (1999).
- Narita, M., et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 95, 14,681～14,686 (1998).
- Basanez, G., et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 96, 5,492～5,497 (1999).
- Luo, X., et al., Cell, 94, 481～490 (1998).
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価格
[在庫・価格 ：2025年05月22日 15時35分現在]
| 詳細 | 商品名 |
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文献数 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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Dual Sensor MitoCasp, Poly Caspase (25 tests) |
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本製品は取扱中止になりました | 4 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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Dual Sensor MitoCasp, Poly Caspase (100 tests) |
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4 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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Dual Sensor MitoCasp, Caspase-3/7 (25 tests) |
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2 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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Dual Sensor MitoCasp, Caspase-3/7 (100 tests) |
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2 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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Dual Sensor MitoCasp, Caspase-8 (25tests) |
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本製品は取扱中止になりました | 0 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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Dual Sensor MitoCasp, Caspase-8 (100tests) |
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本製品は取扱中止になりました | 0 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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Dual Sensor MitoCasp, Caspase-9(25tests) |
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本製品は取扱中止になりました | 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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Dual Sensor MitoCasp, Caspase-9(100tests) |
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本製品は取扱中止になりました | 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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Dual Sensor MitoCasp, Caspase-1 (25tests) |
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0 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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Dual Sensor MitoCasp, Caspase-1 (100tests) |
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0 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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[在庫・価格 ：2025年05月22日 15時35分現在]
Dual Sensor MitoCasp, Poly Caspase (25 tests)
文献数： 4
- 商品コード：MITCAP100-1
- メーカー：CTI
- 包装：1kit
- 本製品は取扱中止になりました
| 説明文 | |||||||
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| 別包装品 | 別包装品あり | ||||||
| 法規制等 | |||||||
| 保存条件 | 法規備考 | ||||||
| 掲載カタログ |
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Dual Sensor MitoCasp, Poly Caspase (100 tests)
文献数： 4
- 商品コード：MITCAP100-2
- メーカー：CTI
- 包装：1kit
- 価格：¥134,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：2～3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | ミトコンドリア膜電位と活性型Poly caspaseを同時検出するキット。アポトーシス誘導物質などによるアポトーシスの進行を解析できる。測定試料：浮遊細胞，接着細胞，測定方法：フローサイトメトリー，蛍光顕微鏡，蛍光プレートリーダー。 |
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| 法規制等 | |||
| 保存条件 | 4℃,暗所保存 | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
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Dual Sensor MitoCasp, Caspase-3/7 (25 tests)
文献数： 2
- 商品コード：MITCAP200-1
- メーカー：CTI
- 包装：1kit
- 価格：¥48,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：2～3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | ミトコンドリア膜電位と活性型Caspase-3/7を同時検出するキット。アポトーシス誘導物質などによるアポトーシスの進行を解析できる。測定試料：浮遊細胞，接着細胞，測定方法：フローサイトメトリー，蛍光顕微鏡，蛍光プレートリーダー。 |
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| 別包装品 | 別包装品あり | ||||||
| 法規制等 | |||||||
| 保存条件 | 4℃,暗所保存 | 法規備考 | |||||
| 掲載カタログ |
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Dual Sensor MitoCasp, Caspase-3/7 (100 tests)
文献数： 2
- 商品コード：MITCAP200-2
- メーカー：CTI
- 包装：1kit
- 価格：¥134,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：ご照会下さい ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | ミトコンドリア膜電位と活性型Caspase-3/7を同時検出するキット。アポトーシス誘導物質などによるアポトーシスの進行を解析できる。測定試料：浮遊細胞，接着細胞，測定方法：フローサイトメトリー，蛍光顕微鏡，蛍光プレートリーダー。 |
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| 別包装品 | 別包装品あり | ||||||
| 法規制等 | |||||||
| 保存条件 | 4℃,暗所保存 | 法規備考 | |||||
| 掲載カタログ |
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Dual Sensor MitoCasp, Caspase-8 (25tests)
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- メーカー：CTI
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Dual Sensor MitoCasp, Caspase-8 (100tests)
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Dual Sensor MitoCasp, Caspase-9(25tests)
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- 商品コード：MITCAP400-1
- メーカー：CTI
- 包装：1kit
- 本製品は取扱中止になりました
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| 保存条件 | 法規備考 | ||
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Dual Sensor MitoCasp, Caspase-9(100tests)
文献数： 1
- 商品コード：MITCAP400-2
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Dual Sensor MitoCasp, Caspase-1 (25tests)
文献数： 0
- 商品コード：MITCAP600-1
- メーカー：CTI
- 包装：1kit
- 価格：¥48,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：2～3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | ミトコンドリア膜電位と活性型Caspase-1を同時検出するキット。アポトーシス誘導物質などによるアポトーシスの進行を解析できる。測定試料：浮遊細胞，接着細胞，測定方法：フローサイトメトリー，蛍光顕微鏡，蛍光プレートリーダー。 |
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| 別包装品 | 別包装品あり | ||||||
| 法規制等 | |||||||
| 保存条件 | 4℃,暗所保存 | 法規備考 | |||||
| 掲載カタログ |
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Dual Sensor MitoCasp, Caspase-1 (100tests)
文献数： 0
- 商品コード：MITCAP600-2
- メーカー：CTI
- 包装：1kit
- 価格：¥134,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：2～3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | ミトコンドリア膜電位と活性型Caspase-1を同時検出するキット。アポトーシス誘導物質などによるアポトーシスの進行を解析できる。測定試料：浮遊細胞，接着細胞，測定方法：フローサイトメトリー，蛍光顕微鏡，蛍光プレートリーダー。 |
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| 別包装品 | 別包装品あり | ||||||
| 法規制等 | |||||||
| 保存条件 | 4℃,暗所保存 | 法規備考 | |||||
| 掲載カタログ |
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| 製品記事 | アポトーシス検出キット特集 ミトコンドリア（Mitochondria）研究用製品特集 |
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製品情報は掲載時点のものですが、価格表内の価格については随時最新のものに更新されます。お問い合わせいただくタイミングにより製品情報・価格などは変更されている場合があります。
表示価格に、消費税等は含まれていません。一部価格が予告なく変更される場合がありますので、あらかじめご了承下さい。