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免疫沈降により目的表面マーカーを持つエクソソームを精製するキット Exo-Flow Exosome IP Kits

掲載日情報：2020/07/02 現在Webページ番号：8514

システムバイオサイエンス /
System Biosciences, LLC
[メーカー略称：SBI]

血清またはエクソソーム試料から目的の表面マーカーを持つエクソソームを精製するキットです。表面マーカー抗体を結合済みの磁気ビーズに、エクソソームを結合させ、免疫沈降により精製します。

※本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。
※System Biosciences社はエクソソーム濃縮試薬、エクソソームマーカーのELISAキットなどエクソソーム解析用ツールを取りそろえています。使用実績もあり、お勧めの製品です。是非お試し下さい。

293 mediaおよびSerumからエクソソームを精製した

96ウェルの各プレート上で免疫沈降を行います。そのため、さまざまな試料から一度にエクソソームを精製することができます。

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エクソソームとは

(クリックで開閉します)

エクソソームは生体内の細胞および培養細胞から分泌される30～200 nmの膜小胞で、血液、尿、羊水、腹水などの体液や細胞培養液中に存在します。エクソソーム中に含まれるmiRNAやタンパク質は、分泌する細胞の種類や生理条件により異なります。そのため、エクソソーム中のmiRNAやタンパク質の分析は、各種疾患に関与する新たなバイオマーカーの探索に有用です。エクソソーム中のmiRNAやタンパク質の詳細については、ExoCartaデータベースをご覧下さい。

ウシ由来エクソソームを除去したFBS Exo-FBS Exosome-Depleted FBS

ExoQuick（#EXOQ5A-1）を用いて血清から単離したエクソソームの電子顕微鏡写真


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製品の種類

商品コードをクリックすると各製品の価格表をご覧いただけます。

品名 ExoFlow ExoFlow Tetra
32 IP Kit 96 IP Kit 32 IP Kit 96 IP Kit
使用回数 32 reactions 96 reactions 32 reactions 96 reactions
マーカーの種類 CD9 CD63 CD81 CD9 CD63 CD81 CD9, CD63, CD81
商品コード EXOFLOW32A-CD9 EXOFLOW32A-CD63 EXOFLOW32A-CD81 EXOFLOW96A-CD9 EXOFLOW96A-CD63 EXOFLOW96A-CD81 EXOFLOW32A-Tetra EXOFLOW96A-Tetra

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特長

  • 血清、血漿試料に直接ビーズを添加し、免疫沈降させることができます。
  • 細胞培養液、尿、脳脊髄液中のエクソソームを精製したい場合は、あらかじめ試料中のエクソソームを濃縮しておくことをお勧めします＊。
  • CD9＋、CD63＋、CD81＋のエクソソームが精製できます。
  • キットには試料からエクソソームを免疫沈降し、精製するために必要な試薬がすべて含まれています。
  • インタクトなエクソソームが得られるため、精製後はexoRNAやバイオマーカーの機能解析に使用することができます。
  • Exo-Flow Tetra IP Kitには、抗CD9抗体、抗CD63抗体、抗CD81抗体それぞれをコートした、3種類の磁気ビーズが含まれています。
    ExoFlow Tetra IP Kit

＊エクソソームの濃縮にはExo-Quickがお勧めです。

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使用例

ウエスタンブロッティングによる解析

免疫沈降によりエキソソームを精製するキット　Exo-Flow Exosome IP Kit

HEK293 細胞培養液から回収したエクソソームまたは血清から、本製品を用いてエクソソームを免疫沈降した後、ウェスタンブロットを行った。CD63 陽性エクソソームおよびCD9 陽性エクソソームが免疫沈降し、精製できたことが分かる。

粒子解析装置Nanosightによる解析

293 Exosomes, CD81 capture

Serum Exosomes, CD9 capture

Serum Exosomes, CD63 capture

本製品を用いて精製したエクソソームの特性

Exo-Flow Exosome IP Kitを用いてHEK293細胞培養液および血清から精製したエクソソームの粒子径を、粒子解析装置Nanosightを用いて測定した。


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操作方法概略

  1. エクソソーム表面マーカー抗体でコートされた磁性ビーズを、クリアプレートの各ウェルに分注する。
  2. エクソソーム含有試料を、磁性ビーズの入ったウェルに添加し、室温で一晩シェーカーで振とうさせる。
  3. クリアプレートを磁性プレート上に重ね、2分間静置させる。
  4. クリアプレートを磁性プレートに重ねたまま、ウェルの上清をデカントする。
  5. クリアプレートを磁性プレートから外し、洗浄バッファーを加えてから3回ピペッティングし、室温で5分間インキュベートさせる。
  6. 3. ～5. を2回繰り返す。
  7. ウェルの上清をデカントした後、ピペットで残液を除去し、磁性プレートを外したクリアプレートに溶出バッファーを添加する。
  8. クリアプレートをシェーカー上に乗せ、室温で1時間振とうさせる。
  9. クリアプレートを磁性ビーズに重ね、2分間静置させる。
  10. ウェル内の溶出液を、氷上のチューブに取る。

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キット内容

  • 96 well clear plate and cover
  • Capture antibody pre-coupled with magnetic beads*
  • Wash buffer
  • Exosome elution buffer
  • Clearing reagent（to dissolve elution reagent away from exosomes）

※別途、磁性プレートExo-FlowMag96 96-well plate magnet（#EXOFLOWMAG-1、右図）が必要です。
＊ キットにより内容は異なります。

磁性プレート Exo-FlowMag96 96-well plate magnetの写真

Exo-FlowMag96 96-well plate magnet (#EXOFLOWMAG-1)

  • 左：磁性プレート
  • 右：クリアプレートを重ねた磁性プレート

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価格

Exo-Flow IP Kit

[在庫・価格 ：2025年01月24日 17時55分現在]

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Exo-Flow32 CD9 IP Kit(32reactions)
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Exo-Flow32 CD9 IP Kit(32reactions)

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（テクニカルサポート 試薬担当）

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