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サブクローニング、制限酵素サイト不要で部位特異的変異導入が行えるキット EZ-Mutation Site-Directed DNA Mutagenesis Kit

掲載日情報:2013/10/28 現在Webページ番号:8133

12 kbp以下(6 ~8 kbp推奨)の鋳型プラスミドに、挿入、欠失、置換などの部位特異的変異導入が行えるキットです。クローニングベクターを使用せず、変異導入プライマーを用いて鋳型プラスミド全体を増幅するため、迅速です。

特長

  • 変異導入プライマー(OP:Opener Primer)を用いて、Inverse PCRによりプラスミド全体を増幅したPCR産物を得ます。メチル化サイトを認識する制限酵素DpnⅠを添加し、鋳型プラスミドを消化します。直鎖状のPCR産物を環状化し、 E. coliに形質転換して変異導入体を得ます。
  • サブクローニング操作が不要なため、最短で翌日には変異導入プラスミドが得られます。
  • クローニング用の制限酵素サイトは不要です。
  • キットに含まれる試薬はほとんどが調製済みで、分注済みのキャップが色分けされており、調製や添加ミスを防ぐことができます。
  • 形質転換用のコンピテントセルFBT5α Super Competent Cell(5×108~5×109 cfu/1μg pUC18)が付属しています。
鋳型プラスミドのサイズ < 12 kbp(推奨サイズ:6~8 kbp)
挿入配列のサイズ < 100 bp
欠失配列のサイズ < 10,000 bp

鋳型プラスミドおよびプライマーは別途ご用意下さい。プライマーの設計には、First Biotech社ウェブサイトの "Project Design Tool" にある、専用アプリケーション(Project Design Manager)をご利用下さい。
12 kbp以上のプラスミドを鋳型として用いる場合は、「GeneEdit Site-Directed DNA Mutagenesis Kit」(詳細はこちら)をご使用下さい。

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操作方法概略

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キット内容

  • Premixed PCR reagent
  • Premixed circularization reagent
  • pUC18 control plasmid
  • Control opener primer
  • RNase and DNase free water
  • FBT5α super competent cell

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価格

[在庫・価格 :2024年03月29日 14時15分現在]

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Site-directed DNA Mutagenesis Kit, EZ-Mutation (8reactions)

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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