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初代アストロサイトと同様な特徴を示します ヒトiPS細胞株由来のアストロサイト

掲載日情報:2024/11/13 現在Webページ番号:71729

ヒトiPS細胞株由来の大脳皮質アストロサイトおよび脊髄アストロサイトです。アストロサイトマーカーのGFAP(Glial Fibrillary Acidic Protein)とS100βで90%以上の発現を有しています。また、成熟した突起を持つ形態的特徴を示します。

ヒトiPS細胞から分化させた各種神経細胞の前駆細胞はこちらの記事をご覧下さい。
本製品は、HIV、HBV、HCVが陰性であることを確認していますが、取り扱いには十分にご注意下さい。
本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

【BrainXell社のヒトiPSC由来細胞の商用利用について】

BrainXell社のヒトiPS細胞株由来の細胞は、以下のご用途においてはライセンスフリーでご使用いただけます。

  • BrainXell社の細胞を用いた評価試験をCROなどの第三者へ委託する場合
  • CROなどの受託試験機関がBrainXell社の細胞を購入し、得られた評価データをその顧客に提供する場合

その他の用途でご使用の場合やご不明な点につきましては当社テクニカルサポート(試薬担当)までお問い合わせ下さい。


アストロサイトとは

グリア細胞(Glial Cell)の一種であるアストロサイトは、グルタミン酸の調節、軸索誘導、栄養供給、炎症反応、創傷治癒、血液脳関門の形成、神経シナプスの形成など、重要な機能を担っています。ヒトの大脳皮質アストロサイトはげっ歯類と比較して大きく、構造的に複雑で多様であり、細胞外のグルタミン酸に対する反応も異なります。アストロサイトは神経疾患や精神疾患に関与している報告が多数あり、正常および疾患アストロサイトの研究は病態解明に重要であると考えられます。


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BrainXell社のヒトiPS細胞株由来のアストロサイト

アストロサイトの研究には、ヒト初代アストロサイトが必要ですが入手困難なため、多くの場合においてヒトiPS細胞株由来アストロサイトが用いられています。しかし、iPS細胞からのアストロサイト作製には長い時間と労力が必要で大きな課題となっています。BrainXell社は、迅速に作製するためにアストロサイトの分化に重要な転写因子NFIAまたはSOX9の誘導性発現と最適化されたアストロサイト分化培地を用いる新しいプロトコルを開発しました。ヒト大脳皮質および脊髄アストロサイトは、正常または疾患iPS細胞から約2か月で作製でき、主要なアストロサイトマーカーのGFAPとS100βを90%以上で発現し、成熟した突起を持つ形態を示す特徴があります。これらの特徴を備えたBrainXell社のヒトiPS細胞株由来の細胞を用いることで、より臨床的に意義のある研究が可能となります。


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製品ラインナップ

商品コードをクリックすると価格表がご覧いただけます。

品名 由来細胞 内容物 商品コード
Cortical Astrocytes ヒトiPS細胞株 1バイアルの細胞、細胞に対応するサプリメント BX-0600
Spinal Astrocytes BX-0650
細胞数につきましてはお問い合わせ下さい。また、別途輸送費(¥70,000)が必要となります。

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大脳皮質アストロサイト

特長

  • グルタミン酸を取り込みます。
  • 機械的刺激を受けるとカルシウム波を示します。
  • 大脳皮質アストロサイトと共培養すると、神経突起の伸長を促進します。

使用例

Marker Expression and Morphology

図1.マーカー発現と細胞形態
大脳皮質アストロサイトは、アストロサイトマーカーのGFAP(緑色)とS100β(赤色)で90%以上の発現を有し、成熟した突起を持つ形態を示す(青色:DAPI)。

Function Cortical Astrocytes

図2.機能
大脳皮質アストロサイト(#BX-0600)はグルタミン酸を取り込むことが分かる。


Cortical Astrocytes exhibit calcium waves

図3.蛍光染色像
機械的刺激を受けると大脳皮質アストロサイトはカルシウム波を示すことが分かる。


Cortical Astrocytes promote neurite outgrowth

図4.共培養
大脳皮質アストロサイトと共培養すると、神経突起の伸長を促進することが分かる。


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脊髄アストロサイト

特長

  • 脊髄領域に特異的なマーカーであるHOXB4(Homeo Box B4)が発現しています。
  • 運動ニューロンと共培養すると、10日以内にカルシウム流入が促進され、MEAの測定値が上昇します。

使用例

Marker Expression and Morphology-脊髄

図5.マーカー発現と細胞形態
脊髄アストロサイトは、アストロサイトマーカーのGFAP(緑色)とS100β(赤色)で90%以上の発現を有し、成熟した突起を持つ形態を示す(青色:DAPI)。

specific marker HOXB4

図6.蛍光染色像
脊髄領域に特異的なマーカーであるHOXB4(赤色)は、脊髄アストロサイトの領域に特異的に発現していることが分かる(青色:Hoechst)。


Function
図7.機能

脊髄アストロサイトと運動ニューロンを共培養すると、10日以内にカルシウム流入が促進されます。


Co-culture spinal astrocytes
図8.多電極アレイ(MEA)の測定

脊髄アストロサイトと運動ニューロンを共培養すると、MEAの測定値が上昇する。


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操作法概略

アストロサイトの単層培養方法

0日目:アストロサイトを起眠する。
1日目(24時間後):新しい培地で培地交換する。
4日目(96時間後):1日目と同じ量の新しい培地を加える。
7日目:新しい培地で半量の培地交換をする。
週2回の培地交換を行うことで、3週間は接着性のある生きたアストロサイトを維持できます。
より詳しい培養方法はこちらのPDFより、ご確認下さい。⇒  Culturing Astrocytes.pdf

共培養方法(例:イメージングアッセイを行う場合)

アストロサイトの単層培養方法の4日目(96時間後)のプレートにニューロン細胞を加える方法です。
0日目:アストロサイト(4日目、96時間後)のプレートにニューロン細胞を加える。
4日目:0日目と同じ量の新しい培地を加える。
7日目:新しい培地で半量の培地交換をする。11日目、14日目、18日目も同様に半量の培地交換をする。
上記の条件で培養を行うと、4週間は接着性のある生きた細胞を維持することができます。
より詳しい培養方法は以下のPDFより、ご確認下さい。
皮質アストロサイト ⇒  Co-Culture of Neurons and Cortical Astrocytes.pdf
脊髄アストロサイト ⇒  Co-Culture of Neurons and Spinal Astrocytes.pdf

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関連動画

BrainXell社の技術紹介動画(英語、1.5分)

ウェビナ―:iPS細胞由来ヒト神経細胞とその応用(英語、約1時間)



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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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