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操作がより簡便化されたPCR阻害物質除去キット OneStep PCR Inhibitor Removal Kit(New Version)

掲載日情報:2024/10/24 現在Webページ番号:71611

土壌、植物、皮膚、糞便などの試料より抽出したDNAおよびRNAから、PCRなどの酵素反応を阻害する物質を除去するキットです。この度、スピンカラムフォーマット品が使用前の再水和が不要となり、操作がより簡便になりました。
本製品単独では、ゲノムDNAやRNAは抽出できません。
本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。


OneStep PCR Inhibitor Removal Kit(スピンカラムフォーマット品)仕様変更のお知らせ

[2024年10月 ご案内]
OneStep PCR Inhibitor Removal Kit(スピンカラムフォーマット品)は、下記のとおり仕様変更されました。
なお、96ウェルプレートフォーマット品(#D6035)に変更はございません。
ご不明な点がございましたら、当社テクニカルサポート(試薬担当)までお問合せ下さい。

新バージョン
(本ページ掲載)
旧バージョン
(詳細はこちら)
商品コード D6031 D6030
用いている
スピンカラム
ZymoSpin Ⅳ-IR HRC filter ZymoSpin Ⅲ-HRC filter
スピンカラム
外観
ZymoSpin Ⅳ-IR HRC filter外観 ZymoSpin Ⅲ-HRC filter外観
スピンカラム
単品の商品コード
C1010-50 C1058-50
変更点 使用前の再水和が不要 使用前に付属のPrep solutionで再水和させる必要あり
販売状況 2024年9月より販売 2025年6月末で販売終了

特長

  • ポリフェノール、腐植酸、フルボ酸、タンニン、メラニン、インディゴ(染料)などのPCRや逆転写反応を阻害する物質を効果的に除去できます。
  • スピンカラム、または96ウェルプレートに試料を加え、遠心するだけの簡単な操作で阻害物質を除去できます。
  • 得られた核酸は、PCR、逆転写反応、次世代シークエンシング(ショートリード、ロングリード)などに使用できます。
腐植酸構造式

Humic Acid(腐植酸、フミン酸)

メラニン構造式

Melanin(メラニン)


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製品一覧

商品コードをクリックすると各製品の価格表をご覧いただけます。

品名 OneStep
PCR Inhibitor Removal Kit
OneStep-96
PCR Inhibitor Removal Kit
商品コード D6031 D6035
フォーマット スピンカラム 96-Well
処理時間 ≦5 min 10 min
溶出液量 50~200 μl 50~100 μl
DNA・RNA回収率 ≧80%

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操作方法概略

OneStep PCR Inhibitor Removal Kit(#D6031)

OneStep PCR Inhibitor Removal Kit操作方法概略
  1. ZymoSpin Ⅳ-IR HRC filterのスクリューキャップを緩め、フィルター底部先端を折って取り除いた後、Collection tubeにセットして、遠心する。
  2. ZymoSpin Ⅳ-IR HRC filterを新たな1.5 mlチューブにセットした後、試料をアプライして、遠心する。
  3. 得られた核酸溶液は下流のアプリケーションに使用できる。

OneStep-96 PCR Inhibitor Removal Kit(#D6035)

OneStep-96 PCR Inhibitor Removal Kit操作方法概略
  1. Silicon-A-HRC plateをElution plate上にセットして、各ウェルにPrep solutionを添加する。
  2. 5分間静置後に遠心し、Silicon-A-HRC plateを新しいElution plate上にセットする。
  3. 試料をアプライして、遠心する。
  4. 得られた核酸溶液は下流のアプリケーションに使用できる。

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使用例

各種阻害物質の除去

OneStep PCR Inhibitor Removal Kit(#D6031)を用いて、各種阻害物質の除去を行った。

Himic Acid Removal
Hematin Removal
Indigo Removal

阻害物質を除去した試料によるPCR増幅

阻害物質を除去した試料によるPCR増幅

腐植酸を添加したDNA試料ではPCR増幅されなかったが、本キットで処理を行うことで200 bpの増幅産物が得られた。いずれの反応も等量のDNAを用いてPCRを行い、等量の反応産物を2.0%(w/v)アガロース/TAE/EtBrゲルで分析した。DNAラダーはZymoResearch社の100 bp DNA Marker(#M5002)を、ホットスタートPCR酵素はZymoTaq PreMix(#E2003、#E2004)を用いた。


阻害物質を除去した試料によるqPCR解析

阻害物質を除去した試料によるqPCR解析
試料に
含まれる
阻害物質
図中
の色
Cq値
未処理 処理済
インディゴ N/A 15.85
ヘマチン 灰黄緑 N/A 15.61
腐植酸 薄緑 N/A 15.66
胆汁酸塩 N/A 15.61
メラニン N/A 15.66
Positive Ctrl. 15.5
Negative Ctrl. N/A

各種阻害物質を含む溶液をOneStep PCR Inhibitor Removal Kit(#D6031)で処理した。溶出液および未処理溶液にHeLa細胞由来DNAを添加した後、qPCR解析を行った(二重試験)。未処理溶液ではPCR増幅されなかったが、本キット処理液ではPCR増幅された。


阻害物質を除去した試料によるNGS解析

阻害物質を除去した試料によるNGS解析

土壌試料からQuick-DNA Fecal/Soil Microbe Kit(#D6010)を用いてDNA抽出を行い、得られたDNAの半分量を本キットで処理し、残りの半分を比較対象とした。本キット処理・未処理双方の試料で16S rRNA解析を行い、試料中に存在する微生物の系統をバープロットで示した。なお、本キット未処理試料では、微生物種を決定できなかった。


DNA回収率について他社製品との比較

DNA回収率について他社製品との比較

ZymoResearch社の1 kb DNA Marker(#M5003)をさまざまな濃度に希釈した後、本キットまたは他社キットで処理を行った。得られたDNAの濃度をNanodropまたはQubit(いずれもThermo Fisher Scientific社)を用いて測定して、DNA回収率を求めた。他社製品よりも優れた回収率が確認された。


OneStep PCR Inhibitor Removal Kit(#D6031)のDNA回収率

OneStep PCR Inhibitor Removal KitのDNA回収率
OneStep PCR Inhibitor Removal Kitの回収液量

50、100、200 μlのSalmon Sperm DNA(Thermo Fisher Scientific社)の溶液を本キットで処理した(二重試験にて実施)。いずれの容量でもDNA量ベースの確認では80%以上のDNAが回収され(左)、液量ベースの確認では2分間の遠心でアプライ量と同量の溶液が得られた(右)。


OneStep-96 PCR Inhibitor Removal Kit(#D6035)のDNA回収率

OneStep-96 PCR Inhibitor Removal KitのDNA回収率
OneStep-96 PCR Inhibitor Removal Kitの回収液量

50、100 μlのDNA溶液を本キットで処理した(三重試験にて実施)。DNA量ベースの確認では50 μlで若干の損失が見られたが、100 μlでほぼ100%の回収ができ(左)、液量ベースの確認では3分間の遠心でアプライ量と同量の溶液が得られた(右)。


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ZymoReserach社 核酸クリーンアップキットの適用比較

品名 OneStep PCR Inhibitor Removal Kit
(本ページ掲載)
DNA Clean & Concentrator Kit(DCC)
RNA Clean & Concentrator(RCC)
除去物 腐植酸、タンニン、ポリフェノール、メラニン 塩、タンパク質、遊離の色素・蛍光色素、ヌクレオチド、フェノール
適用 酵素反応のクリーンアップ
阻害物質に富む核酸のクリーンアップ
酵素反応のクリーンアップ
品質の悪い核酸のクリーンアップ

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キット内容

構成品名をクリックすると別売品の価格表をご覧になれます。

OneStep PCR Inhibitor Removal Kit(#D6031)

OneStep-96 PCR Inhibitor Removal Kit(#D6035)

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価格

[在庫・価格 :2024年12月12日 00時01分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。
詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
  • 価格
  • 在庫
  • 法規制等
納期 文献数
OneStep PCR Inhibitor Removal Kit
2週間程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
DNAまたはRNA試料から,PCRなどの酵素反応を阻害する物質を除去するキット。使用前の再水和が不要となり、より簡便操作となった。
法規制等
保存条件 室温 法規備考
掲載カタログ

製品記事 TIPS & TRICKS FOR RNA ISOLATION(Zymo Research社)
関連記事 DNA・RNA精製システムの選択ガイド(ZYMO RESEARCH社)
[ZYR]核酸精製・DNAメチル化検出キット・核酸保存試薬 お試しサンプル品
PCR Inhibitor Removal Kit, OneStep-96 (2×96 preps)
2週間程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
  • メーカーサイト
  • お問い合わせ
説明文
DNAまたはRNA試料から,PCRなどの酵素反応を阻害する物質を除去するキット。
法規制等
保存条件 室温 法規備考
掲載カタログ ニュース2021年1月合併号 p.16
ニュース2020年1月合併号 p.7

製品記事 OneStep PCR Inhibitor Removal Kits
TIPS & TRICKS FOR RNA ISOLATION(Zymo Research社)
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[在庫・価格 :2024年12月12日 00時01分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。

OneStep PCR Inhibitor Removal Kit

文献数: 0

説明文 DNAまたはRNA試料から,PCRなどの酵素反応を阻害する物質を除去するキット。使用前の再水和が不要となり、より簡便操作となった。
法規制等
保存条件 室温 法規備考
掲載カタログ

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PCR Inhibitor Removal Kit, OneStep-96 (2×96 preps)

文献数: 0

説明文 DNAまたはRNA試料から,PCRなどの酵素反応を阻害する物質を除去するキット。
法規制等
保存条件 室温 法規備考
掲載カタログ ニュース2021年1月合併号 p.16
ニュース2020年1月合併号 p.7

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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表示価格に、消費税等は含まれていません。一部価格が予告なく変更される場合がありますので、あらかじめご了承下さい。