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脱分極ミトコンドリアを有する細胞を可視化するキット MitoPT Assay Kit

掲載日情報:2020/06/12 現在Webページ番号:7132

電子伝達系、アポトーシス、ミトコンドリア病の研究に ミトコンドリア(Mitochondria)研究用製品特集バナー

アポトーシスや代謝ストレスなどにより脱分極したミトコンドリアを有する細胞の可視化に有用な、蛍光染色キットです。ミトコンドリアの膜電位変化により局在が変化する膜電位感受性色素を用いて、検出を行います。


膜電位感受性色素について

TMRMとTMRE

TMRM(tetramethylrhodamine methyl ester)およびTMRE(tetramethylrhodamine ethyl ester)は、それぞれローダミンのメチルエステル、エチルエステルのカチオン性蛍光色素です。JC-1と同様に、蛍光色素の脂溶性構造により、浸透速度は遅いものの、容易に脂質二重膜に浸透します。膜電位を有するミトコンドリアにおいては、飽和レベルまで高濃度に蓄積し、赤橙色蛍光を発します。一方、アポトーシスや代謝ストレスなどにより、ミトコンドリアが膜電位を消失すると、蛍光色素が細胞全体に拡散し、蛍光強度が顕著に低下します。


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特長

  • 膜電位を失った脱分極ミトコンドリアを有し、アポトーシスを起こしている細胞では、蛍光試薬が拡散します。分極ミトコンドリアを有する正常細胞では、蛍光試薬がミトコンドリアに蓄積し蛍光を発します。これにより、それぞれの細胞を区別することができます。
  • 細胞を試薬と15~30分インキュベートするだけで染色することができます。
  • 蛍光染色した細胞は、フローサイトメトリー解析、蛍光顕微鏡観察や、蛍光プレートリーダーでの蛍光強度測定に用いることができます。
  • アポトーシスや代謝ストレスによる細胞への影響を解析するのに有用です。
  • 各キットには、ミトコンドリアを脱分極させるCCCP(Carbonylcyanide m-chlorophenylhydrazone)が付属しています。
  • 測定試料:培養細胞

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JC-1 Assay Kitの使用例

JC-1 Assay Kitを用いて染色したJurkat細胞の蛍光顕微鏡観察像

正常細胞(左側の2細胞)では、蛍光試薬がインタクトな状態のミトコンドリア内部に蓄積し、赤色蛍光を発している。一方、膜電位を失ったミトコンドリアを有する細胞(右側の3細胞)では、蛍光試薬が単量体フォームで細胞全体に拡散し、緑色蛍光を発している。
正常細胞:赤色
アポトーシスを起こしている細胞:緑色

JC-1 Assay Kitを用いて染色したJurkat細胞のフローサイトメトリー解析結果

DMSO(コントロール)もしくはstaurosporine(アポトーシス誘導)で4時間処理したJurkat細胞を、JC-1 Assay Kitを用いて15分間染色した後、フローサイトメトリー解析を行った。
R2:正常細胞
R3:アポトーシスを起こしている細胞

JC-1 Assay Kitを用いて染色したJurkat細胞の蛍光強度測定結果

DMSO(コントロール)もしくはstaurosporine(アポトーシス誘導)で4時間処理したJurkat細胞を、JC-1 Assay Kitを用いて15分間染色した後、蛍光プレートリーダーを用いて、蛍光強度を測定した。

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TMRM Assay Kitの使用例

Jurkat細胞をstaurosporineの存在下または非存在下で培養し、TMRM Assay Kitを用いて染色した後、蛍光顕微鏡(Nikon Eclipse E800 photomicroscope)で観察した。
アポトーシスを起こしている細胞では、赤色蛍光がわずかにしか観察されない。

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TMRE Assay Kitの使用例

Jurkat細胞をstaurosporineの存在下または非存在下で培養し、TMRE Assay Kitを用いて染色した後、蛍光顕微鏡(Nikon Eclipse E800 photomicroscope)で観察した。
アポトーシスを起こしている細胞では、赤色蛍光がわずかにしか観察されない。

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キット内容

  • MitoPT reagent
  • Assay buffer
  • CCCP mitochondrial depolarizing agent
[メーカー:ITL]
品 名JC-1 Assay KitTMRM Assay KitTMRE Assay Kit
蛍光色素JC-1TMRMTMRE
測定波長励起488 nm/蛍光 527 nm(緑色)、590 nm(赤色) 励起548 nm/蛍光573 nm励起549 nm/蛍光574 nm
商品コードNew924New911New9105New9103
アッセイ数100 tests400 tests500 tests500 tests
価格(¥)27,00053,00069,00069,000
ITL092400ITL091100ITL910500ITL910300

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価格

[在庫・価格 :2024年12月11日 00時00分現在]

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詳細 商品名
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納期 文献数
JC1 Assay Kit, MitoPT (100tests)
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アッセイ数:100 tests,蛍光色素:JC-1,測定波長:励起488 nm/蛍光 527 nm(緑色),590 nm(赤色)
別包装品 別包装品あり
法規制等 医薬用外劇物
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アッセイ数:400 tests,蛍光色素:JC-1,測定波長:励起488 nm/蛍光 527 nm(緑色),590 nm(赤色)
別包装品 別包装品あり
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アッセイ数:500 tests,蛍光色素:TMRM,測定波長:励起548 nm/蛍光573 nm
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MitoPT-TMRE Kit (500tests)
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アッセイ数:500 tests,蛍光色素:TMRE,測定波長:励起549 nm/蛍光574 nm
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JC1 Assay Kit, MitoPT (100tests)

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説明文 アッセイ数:100 tests,蛍光色素:JC-1,測定波長:励起488 nm/蛍光 527 nm(緑色),590 nm(赤色)
別包装品 別包装品あり
法規制等 医薬用外劇物
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説明文 アッセイ数:400 tests,蛍光色素:JC-1,測定波長:励起488 nm/蛍光 527 nm(緑色),590 nm(赤色)
別包装品 別包装品あり
法規制等 医薬用外劇物
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説明文 アッセイ数:500 tests,蛍光色素:TMRM,測定波長:励起548 nm/蛍光573 nm
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説明文 アッセイ数:500 tests,蛍光色素:TMRE,測定波長:励起549 nm/蛍光574 nm
法規制等 医薬用外劇物
保存条件 -20℃,暗所保存 法規備考
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(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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