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微生物間の相互作用研究に有用なハイスループットの共培養デバイス Co-Culture Duet System

掲載日情報：2024/05/22 現在Webページ番号：71285

セリロ /
Cerillo, Inc
[メーカー略称：CLO]

共培養（Co-culture）を行いつつ、吸光マイクロプレートリーダーによる濁度のリアルタイム測定が可能なデバイスです。
複数の微生物や細胞が共存したときに、お互いの増殖に与える影響を1プレートで18通り可視化できます。
共培養条件の探索や、細胞・微生物が放出する新規化合物の探索を効率的に行えます。


※ 本製品をご購入の際には、専用の『同意書』をご提出いただく必要があります。
※ 本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。


Co-culture Duoの製品概要

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特長

  • マイクロプレート型のCo-Culture Plateフレームに、取り外し可能な共培養カセット（Duet）がセットされた構造です。
  • 1枚のCo-Culture Plateフレームに最大18個の共培養カセットをセットできます。2種類の微生物や細胞が互いの増殖に与える影響を、1枚のプレートで最大18通り、同時にリアルタイムモニタリングできます。
  • 共培養カセットは、低分子物質だけを透過するポリカーボネートフィルター（ポアサイズ0.2 μmまたは0.05μm）を挟んで2つの培養ウェルが横に繋がっています。
  • 共培養カセットの2つの培養ウェルは、光を通す構造です。 各ウェルの濁度を、独立して測定可能です。
  • 底面が透明なため、各ウェルに入れた細胞が混ざらないように維持しつつ、それぞれの濁度を測定することが可能です。
  • 共培養カセットは、詰替用パック（Co-Culture Duet Replacement Pack - 36 Duets）もあります。
  • Cerillo社のAlto, 600 nmやStratus（販売終了品）に対応しています。また、高さ15.0 mmのマイクロプレート（フタ付きで約 17.5mm）が測定可能なプレートリーダーでも使用可能です＊1。
  • Ready-to-Useで誰でも使いやすく、共培養の実験系を独自で開発する費用や時間を節約できます。
  • EOG滅菌済みです。
    • ＊1 測定可能なプレートリーダーについて、詳細は当社機器・消耗品担当までお問い合わせ下さい。

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Co-Culture Duet Systemの外観

Co-cultureの製品外観


共培養カセットの外観（左）、およびマイクロプレート型のCo-Culture Plateフレームに共培養カセットを取り付けた状態（右）。

Co-cultureを上から見た図

1枚のCo-Culture Plateフレームに18個（3×6）の共培養カセットをセット可能。底面が透明なので、上下方向に光を通して濁度の測定ができる。

半透膜で仕切られたDuet

共培養カセットはポリカーボネート膜を挟んで、2つの培養ウェルが隣接した構造になっている。各ウェルの微生物や細胞は混ざることなく、低分子の物質のみウェル間を自由に移動できる。


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プレートマッピング（CLO社のAltoまたはStratusを使用する場合）

1枚のCo-Culture Plateフレームに、最大18個の共培養カセットをセット可能です。
CLO社以外のプレートリーダーを使用する場合は、下図を参考に、念のため事前にプレートマッピングの確認をお願いいたします。

プレートマッピング

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仕様

Co-Culture Duet System
使用できる測定装置
  • Altoマイクロプレートリーダー
  • Stratusマイクロプレートリーダー（販売終了品）
  • 高さ15.0mm のマイクロプレート（フタ付きで約 17.5mm）が測定可能なプレートリーダー＊2
構成＊3
  • プレート型フレーム：共培養カセットを最大18個セット可能です。
  • 共培養カセット（Duet）：2つの培養ウェルが、フィルターを挟んで横に繋がっています。底面が透明で、上下方向に光を通して濁度の測定が可能です。
培養ウェルの容量
  • 800～1,000 μl（静置培養の場合）
  • 800 μl（振とう培養の場合：ウェルからの液こぼれ防止のため）
サイズ
  • フレーム：127.8W×85.4D×15.2H mm
  • フタ込みの高さ：17.5 mm
  • 共培養カセット：24W×15D×14H mm
  • 共培養カセットの各培養ウェルの内寸：8W×9D×12H mm
質量
  • フレーム：89 g
  • 共培養カセット：3 g（1個あたり）
共培養カセットのフィルター（仕切り）
材質 ポリカーボネート
表面処理 PVP（疎水処理）
ポアサイズ 0.2 μmまたは0.05μm
表面積 50.3 mm2
直径 8 mm
膜厚 25 μm
＊2 測定可能なプレートリーダーについて、詳細は当社機器・消耗品担当までお問い合わせ下さい。
＊3 プレート型フレームは再使用が可能です。共培養カセットはシングルユース推奨の消耗品です。

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Cerillo社Co-Culture Duet Systemのメリット

共培養システムは、生体間の相互作用を解析するために必要不可欠です。しかしこれまでの共培養システムは制限が多く、また独自の共培養システムの構築と検証に多大な時間と費用がかかりました。Cerillo社のCo-Culture Duet Systemは、この課題を解決できる、多用途・ハイスループット・ユーザーフレンドリーな共培養システムです。

Stratusの製品外観_3

自然環境の模倣

環境中の微生物は多くの場合、複雑なコミュニティを形成して存在し、そこで相互作用します。Co-Culture Duet Systemを使用すると、このような自然環境を模倣し、微生物間の相互作用を研究することができます。

Stratusの製品外観_3

細胞-微生物間の相互作用の研究

Co-Culture Duet Systemは、微生物によって生産される新規化合物の同定にも使用できます。たとえば、細胞と微生物も、化学物質などを介した相互作用をすることがあります。

Stratusの製品外観_3

微生物の相互作用研究、新規化合物の同定

Co-Culture Duet Systemは、微生物がどのように相互作用するかについての知見を提供します。たとえば、ある微生物が別の微生物に利益をもたらす化合物を産生したり、ある微生物が別の微生物の増殖を阻害したりすることがあります。また、ある微生物は別の微生物が存在するときに限り、ある生理活性化合物を産生する場合もあります。これらの相互作用は単独の微生物で研究するのは困難です。

Stratusの製品外観_3

新しい治療薬候補物質の探索

Co-Culture Duet Systemは、新しい治療薬候補物質のスクリーニングに使用できます。たとえば、病原性微生物の増殖を阻害する有益な化合物を産生する微生物を探せば、有用な物質の候補を効率的に探すことができます。



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使用例

緑膿菌とセパシア菌が共存した際に、互いに与える影響の検討

隔膜がDuetでの培養に及ぼす影響

嚢胞性線維症で見られる重複感染モデルとして、緑膿菌（Pseudomonas aeruginosa、PA）とセパシア菌（Burkholderia cepacia、BC）を用たモデル実験を行った。

  • PA：緑膿菌（P. aeruginosa）を一定の菌数で播種したウェル。
  • BC：セパシア菌（B. cenocepacia）を一定の菌数で播種したウェル。
  • Blank：何も播種しなかったウェル。
  • Isolated：片側のウェルにだけ、緑膿菌またはセパシア菌を播種した共培養カセット。
  • Competing：両方のウェルに同種の菌（緑膿菌またはセパシア菌）を播種したの共培養カセット。
  • Co-culture：片側のウェルに緑膿菌、もう片側のウェルにセパシア菌を播種した共培養カセット。
  • 培地：LB培地を記載濃度で共培養カセットに入れた。希釈する場合は、DPBSで行った。
  • 培養条件：37℃、450 rpmで振盪培養。5分毎にOD600測定。3回反復実験。
    • Co-cultureと記載された共培養カセットをみると、緑膿菌（PA）はIsolatedと記載された共培養カセットで培養した場合と同じ程度まで増殖しているが、セパシア菌（BC）はCompetingで培養した場合よりも低い濁度で増殖が頭打ちとなっている。
    • このことから、緑膿菌とセパシア菌が共存すると、セパシア菌の増殖のみが抑制される影響を受けることが分かる。

実験条件
・使用培地：LB培地
・培地希釈液：DPBS（Dulbecco's Phosphate-Buffered Saline）
・播種した量：OD600＝0.0005
・培養器：Co-Culture Duet System
・プレートリーダー：Infinite M200 Pro（Tecan）
・振とう：7.5 Hz（450 RPM）、往復振とう（3 mm）
・培養温度：37℃


共培養条件の探索

バクテロイデス共生の研究アイデア

課題：あるバクテロイデス属の菌（sp. #2）が、インドール産生性のバクテロイデス属の菌（sp. #1）と共存するとき、sp. #2の増殖はどうなるだろうか。
手法：Co-culture Duet中で培養し、継続的にOD600の値をモニタリングする。

微生物―微生物間相互作用の解析

片方が資化能力を持つバクテロイデス共生の研究アイデア

課題：2種類のバクテロイデス属の菌（sp. #1、sp. #2）を共培養するとき、片方（sp. #2）のみが高分子量の多糖類を分解できる場合、この共培養系は効率的な資源の共有をするのだろうか。
手法：Co-culture Duetの両方のウェルをモニタリングし、増殖動態の経時変化を観察する。

微生物-細胞間相互作用の解析

腸の概日リズムがサルモネラ菌に与える影響の研究アイデア

課題：エンテロイド（小腸オルガノイド）の概日リズムが、サルモネラ菌の増殖に影響を与えるだろうか。
手法：同期を行った後、さまざまな時点でのエンテロイドをウェル底に蒔く。隣接するウェルのサルモネラ菌のODと蛍光出力をモニタリングして増殖動態を測定する。

新しい治療薬候補物質の探索

海洋細菌のライブラリーの抗菌作用スクリーニング

課題：海洋細菌のライブラリーを用いて、ヒトの病原菌に抗菌作用を示す物質（シーズ候補）を生産する有用な菌を探せるだろうか。
手法：両方のウェルのODを経時的に測定し、増殖動態をモニタリングする。


その他の使用例

  • 植物細胞と微生物の相互作用解析（植物病理学系）
  • 宿主細胞と病原体の相互作用解析

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同意書について

本製品をご購入いただく際には、下記の『同意書』の提出が必要です。
同意書（原文）の内容を十分にご確認、ご了解の上、ご同意いただける場合は、同意書（署名）にご署名をお願いいたします。ご署名された書類につきましては必要事項をご記入の上、当社販売店にお渡し下さい。
⇒ 同意書（原文付き）はこちら。
⇒ 同意書（署名用）はこちら。

※ 同意書（原文）は、Google ChromeやMicrosoft Edgeで開くと文字化けします。ダウンロードしたPDFファイルをAcrobat Readerにてご確認下さい。
※ ご不明な点がございましたら、当社機器・消耗品担当にお問い合わせ下さい。



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仕切膜の孔径 0.2μm

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仕切膜の孔径 0.05μm

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共培養カセット（Duet）

Co-Culture Duet Systemに含まれる共培養カセット（Duet）のみの詰め替え用バルク製品です。

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お問い合わせ先

（テクニカルサポート 機器・消耗品担当）

kiki@funakoshi.co.jp

製品情報は掲載時点のものですが、価格表内の価格については随時最新のものに更新されます。お問い合わせいただくタイミングにより製品情報・価格などは変更されている場合があります。
表示価格に、消費税等は含まれていません。一部価格が予告なく変更される場合がありますので、あらかじめご了承下さい。

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