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トリプシン/キモトリプシンに対する阻害物質スクリーニングキット QuantiFluo Trypsin / Chymotrypsin Inhibitor Assay Kit

掲載日情報:2024/10/18 現在Webページ番号:70927

トリプシン(Trypsin、EC 3.4.21.4)またはキモトリプシン(Chymotrypsin、EC 3.4.21.1)に対する阻害物質を蛍光法または蛍光偏光(Fluorescence Polarization、FP)法により簡便かつ迅速にスクリーニングするキットです。

蛍光法による阻害曲線例 蛍光偏光法による阻害曲線例
QuantiFluo Trypsin
Inhibitor Assay Kit

(#DTRI-100
QuantiFluo Trypsin Assay Kit(#DTRI-100)の蛍光法による阻害曲線例 QuantiFluo Trypsin Assay Kit(#DTRI-100)の蛍光偏光法による阻害曲線例
QuantiFluo Chymotrypsin
Inhibitor Assay Kit

(#DCTI-100
QuantiFluo Chymotrypsin Assay Kit(#DCTI-100)の蛍光法による阻害曲線例 QuantiFluo Chymotrypsin Assay Kit(#DCTI-100)の蛍光偏光法による阻害曲線例
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BioAssay Systems社では、2018年1月1日より緑化推進のために製品へのプロトコルの添付を廃止しました。各製品のプロトコルについては、BioAssay Systems社ホームページよりダウンロードしてご利用下さい。


トリプシン/キモトリプシンとは

トリプシン(Trypsin、EC 3.4.21.4)は、タンパク質分解に関わる消化酵素セリンプロテアーゼの一種で、多くの真核生物および原核生物において食物タンパク質を加水分解します。トリプシンは主にリジンおよびアルギニンアミノ酸のカルボキシ基側でペプチド鎖を切断しますが、プロリンの前では切断しません。

キモトリプシン(Chymotrypsin、EC 3.4.21.1)は、多くの真核生物および原核生物において食物タンパク質を加水分解する消化酵素セリンプロテアーゼの一種です。キモトリプシンは、主に芳香族アミノ酸であるフェニルアラニン、トリプトファン、およびチロシンアミノ酸のカルボキシ基側でペプチド鎖を切断します。

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測定原理

本アッセイは、クエンチャーにより消光されたFITC標識のトリプシンまたはキモトリプシンの合成基質をそれぞれ使用しています。試料中の酵素(トリプシンまたはキモトリプシン)によって、合成基質が切断されるとクエンチャーによる消光がなくなり、FITCの蛍光(λex/em = 485/530 nm)が発せられます。それぞれの酵素に対する試験化合物の阻害活性に応じて合成基質の切断は阻害され蛍光強度または蛍光偏光(FP)が減衰することから、試験化合物の阻害活性を評価およびスクリーニングを行えます。

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特長

  • 試験化合物のトリプシンまたはキモトリプシン阻害活性やIC50を簡便、迅速かつ高感度で測定でき、ハイスループットスクリーニングにも対応しています。
  • フォーマット:96ウェルプレート
  • 測定時間:約45分(室温)
  • 測定試料:試験化合物(トリプシンまたはキモトリプシンの活性に影響を与える化合物)
  • 測定方法蛍光法または蛍光偏光(Fluorescence Polarization、FP)
  • 測定波長:励起 485 nm/蛍光 530 nm
  • Z'ファクター:>0.7(QuantiFluo Trypsin Inhibitor Assay Kit)、>0.8(QuantiFluo Chymotrypsin Inhibitor Assay Kit)
  • アッセイ数:100 tests

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トリプシン/キモトリプシン活性の算出


Trypsin / Chymotrypsin Activity(%) = FCompound−FBlank/FControl−FBlank × 100%

  • FCompound:試験化合物の蛍光強度または蛍光偏光(FP)値
  • FControl:阻害物質なしの蛍光強度または蛍光偏光(FP)値
  • FBlank:酵素なしの蛍光強度または蛍光偏光(FP)値

各測定値は、λex/em = 485/530 nmにおける蛍光強度またはFP値です。

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キット内容

  • Assay buffer*
  • Substrate*

キットにより内容は異なります。
キットには、酵素(トリプシンまたはキモトリプシン)、阻害物質コントロール、および黒色・平底96ウェルプレートは含まれていません。別途ご用意下さい。
測定には蛍光プレートリーダーが別途必要です。

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関連製品

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品名 CAS No. メーカー 商品コード
Trypsin Inhibitor(soybean) 9035-81-8 CAY 14502
PMSF<Phenylmethylsulfonyl Fluoride> 329-98-6 RSD 4486/50
Trypsin 9002-07-7 WOR TRTPCK
Chymotrypsin 9004-07-3 WOR CDTLCK


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価格

[在庫・価格 :2025年02月12日 13時35分現在]

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QuantiFluo Trypsin Inhibitor Assay Kit
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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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