Custom Antisense Oligo Synthesis Service Dharmacon　カスタムアンチセンスオリゴ（ASO）合成受託サービス

アンチセンスオリゴヌクレオチドは、標的mRNAに相補的な一本鎖DNAオリゴです。細胞に添加すると、ASOは標的mRNAにハイブリダイズし、短い二本鎖断片になります。ASOは、標的mRNAの分解、翻訳停止、RNA結合タンパク質の阻害、およびスプライシング調節など、いくつかの異なるメカニズムを通じてタンパク質発現の変化や阻害を行うことができます。2020年時点で、50を超えるアンチセンスオリゴヌクレオチドが臨床試験中で、現在様々なタイプの疾患の治療について研究が行われています。

ASOは、目的mRNAに対してアンチセンス側で約20塩基長になるように設計されます。ASOは、多くの場合、開始コドン近傍（翻訳の阻害の場合）、またはスプライス部位（スプライシングの阻害の場合）のいずれかを標的とするように設計されます。ASOの設計においては、複数の配列のデザインを試験し、最適配列を見つけることが推奨されます。また、ASOが標的配列にアクセスできなくなる可能性があるため、二次および三次mRNAフォールディングを考慮する必要があります。その際、RNAフォールディングソフトウェア（Sfoldまたはmfoldなど）は、RNA 構造を評価して最適なターゲットを特定するのに役立ちます¹。

siRNAとASOを比較した場合、siRNAは細胞質のRISC（RNA-induced silencing complex）で機能しますが、ASOは核または細胞質のいずれかでmRNAを標的にすることができることにご留意下さい。

ASOはヌクレアーゼによる分解を受けやすいため、オリゴの安定性を高めるために様々な修飾が使用されます。ホスホロチオエート修飾（S-オリゴ）は、一般的なASO修飾方法の1つです。安定性を向上することに加え、これらの修飾はオリゴの細胞への侵入を促進するマイナスの骨格電荷を保持するなど、他の方法で機能を助けると考えられています。

その他に、一般的な修飾として2'-O-メチル修飾、Locked Nucleic Acid修飾、MOE（メトキシエチル）修飾があります。これらの修飾は、多くの場合ヌクレアーゼに対する耐性を高め、また融解温度、またはオリゴの標的mRNAへの親和性を向上させるためるために選ばれます。