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3'3'-cGAMPを高感度かつ特異的に定量するキット 3'3'-cGAMP ELISA Kit(Cayman Chemical社)

掲載日情報:2024/02/07 現在Webページ番号:70652

試料中の3'3'-cyclic GMP-AMP(3'3'-cGAMP)を、競合法により比色定量するELISAキットです。
高感度かつ特異的であり、またLC-MS/MSで検証されているため、正確で信頼性の高い結果が得られます。


3'3'-cGAMP ELISA Kitの検量線例

図1. 3'3'-cGAMP ELISA Kitの検量線例

3'3'-cGAMPとは

3'3'-cGAMPは細菌の環状ジヌクレオチド(CDN)セカンドメッセンジャーであり、ファージ応答、浸透圧ストレス応答、細菌の運動性、バイオフィルム形成などのプロセスを制御することが示されています1。コレラ菌(Vibrio cholerae)では、3'3'-cGAMPはCD-NTase(cGAS/DncV-like nucleotidyltransferase)スーパーファミリーに属するDncVによってATPとGTPから合成されます(図2参照)が、デルタプロテオバクテリアでは、3'3'-cGAMPはHyprGGDEFタンパク質によって合成されます。DncVは、真核生物で2'3'-cGAMPを合成する環状GMP-AMP合成酵素(cGAS)に構造的に類似しています。3'3'-cGAMPは、粘液細菌(Myxococcus xanthus)ではPmxA、コレラ菌ではV-cGAP1、V-cGAP2、V-cGAP3、VcEALなどのホスホジエステラーゼ(PDE)によって分解されます。3'3'-cGAMPは、組換えヒトSTING(Stimulator of interferon genes)に結合することができ、特定のマウス組織においてIFN-βおよびIL-10応答を誘導します2,3

3'3'-cGAMPの合成および分解

図2. 3'3'-cGAMPの合成および分解

参考文献:
1. Yoon, S.H. and Waters, C.M., Curr. Opin. Microbiol., 60:96~103 (2021). [PMID:33640793]
2. Zhang, X., et al., Mol. Cell, 51(2):226~235 (2013). [PMID:23747010]
3. Martin, T.L., et al., Vaccine, 35(18):2511~2519 (2017). [PMID:28343781]



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特長

  • キットには高感度かつ特異的で交差反応が少ない抗3'3'-cGAMPモノクローナル抗体を使用しています。
  • 必要な試薬はすべて含まれており、3時間以内に結果が得られます。
  • 測定動物種:細菌、哺乳動物
  • 測定試料:細胞ライセート、細胞培養上清
  • 検出限界:26 pM(17.5 pg/ml)
  • 測定範囲:78~10,000 pM(52.6~6,744 pg/ml)
  • 感度(80% B/B0):210 pM(142 pg/ml)
  • Mid-point(50% B/B0):818 pM(552 pg/ml)
  • 測定法:競合ELISA
  • 検出方法:呈色
  • 測定波長:450 nm
  • アッセイ数:96 well

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測定原理

試料(またはスタンダード)中の遊離3'3'-cGAMPとHRP標識3'3'-cGAMP(3'3'-cGAMP-HRPトレーサー)が競合して、抗3'3'-cGAMPモノクローナル抗体に結合します。吸光度はHRP標識3'3'-cGAMP量に比例し、試料中の3'3'-cGAMP濃度に反比例します。

3'3'-cGAMP ELISA Kitの操作方法概略

図3. 3'3'-cGAMP ELISA Kitの操作方法概略図


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交差性

物質名 交差性
3'3'-cGAMP 100%
3'2'-cGAMP 0.018%
2'3'-cGAMP 0.006%
Cyclic di-GMP 0.004%
2'2'-cGAMP 0.002%
pApG 0.002%
ATP <0.001%
GTP <0.001%
AMP <0.001%
GMP <0.001%
cAMP <0.001%
cGMP <0.001%
Cyclic di-AMP <0.001%

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使用例

下記の画像をクリックすると、3'3'-cGAMP ELISA Kit(#502130)、Cyclic di-AMP ELISA Kit(#501960)、Cyclic di-GMP ELISA Kit(#501780)を使用したApplication Note(PDFファイル)がダウンロードできます。

Quantification of Cyclic Dinucleotides by ELISA


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キット内容

  • 3'3'-cGAMP ELISA monoclonal antibody
  • 3'3'-cGAMP-HRP tracer
  • 3'3'-cGAMP ELISA standard
  • Immunoassay buffer C concentrate
  • Wash buffer concentrate
  • Polysorbate 20
  • Goat anti-mouse IgG-coated plate
  • TMB substrate solution
  • HRP stop solution
  • ELISA tracer dye
  • ELISA antiserum dye
  • 96-well cover sheet

測定にはマイクロプレートリーダーが別途必要です。


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価格

[在庫・価格 :2024年03月03日 00時00分現在]

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詳細 商品名
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3'3'-cGAMP ELISA Kit (Strip Plate)
2週間程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 1
説明文
試料中の3'3'-cyclic GMP-AMP(3'3'-cGAMP)を、競合法により比色定量するELISAキット。高感度かつ特異的で交差反応が少ない抗3'3'-cGAMPモノクローナル抗体を使用しており、またLC-MS/MSで検証しているため、正確で信頼性の高い結果が得られる。測定試料:細胞ライセート、細胞培養上清,感度:210 pM(142 pg/ml),測定範囲:78~10,000 pM(52.6~6,744 pg/ml),検出方法:呈色,測定波長:450 nm,アッセイ法:競合ELISA,アッセイ数:96 well
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説明文
試料中の3'3'-cyclic GMP-AMP(3'3'-cGAMP)を、競合法により比色定量するELISAキット。高感度かつ特異的で交差反応が少ない抗3'3'-cGAMPモノクローナル抗体を使用しており、またLC-MS/MSで検証しているため、正確で信頼性の高い結果が得られる。測定試料:細胞ライセート、細胞培養上清,感度:210 pM(142 pg/ml),測定範囲:78~10,000 pM(52.6~6,744 pg/ml),検出方法:呈色,測定波長:450 nm,アッセイ法:競合ELISA,アッセイ数:96 well
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文献数: 1

説明文 試料中の3'3'-cyclic GMP-AMP(3'3'-cGAMP)を、競合法により比色定量するELISAキット。高感度かつ特異的で交差反応が少ない抗3'3'-cGAMPモノクローナル抗体を使用しており、またLC-MS/MSで検証しているため、正確で信頼性の高い結果が得られる。測定試料:細胞ライセート、細胞培養上清,感度:210 pM(142 pg/ml),測定範囲:78~10,000 pM(52.6~6,744 pg/ml),検出方法:呈色,測定波長:450 nm,アッセイ法:競合ELISA,アッセイ数:96 well
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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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