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セカンドメッセンジャーのc-di-AMP/ c-di-GMP測定キット Cayman Chemical社 Cyclic di-AMP/Cyclic di-GMP ELISA Kits

掲載日情報：2020/04/21 現在Webページ番号：69294

ケイマン ケミカル /
Cayman Chemical Company
[メーカー略称：CAY]

細菌の細胞ライセート中のCyclic di-AMPおよびCyclic di-GMPを競合法により比色定量するELISAキットです。

※「3'3'-cyclic GMP-AMP（3'3'-cGAMP）測定キット」についてはこちらの記事をご覧下さい。
※ 本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

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Cyclic di-AMP/Cyclic di-GMPとは

Cyclic di-AMPとは

Cyclic di-AMPは、細菌の様々な細胞プロセスに関与する細菌のセカンドメッセンジャーです1,2。Cyclic di-AMPは、5'-3'-大員環によって連結されたそれぞれ2つのAMP部分で構成されており、ジアデニル酸シクラーゼによってATPの2つの分子から合成され、また cyclic di-AMP特異的ホシホジエステラーゼ (PDEs, cyclic di-AMP-specific phosphodiesterases)によって2つのAMP、または直鎖5'-phosphoadenyl-(3'-5')-adenosine(pApA)dinucleotideのどちらかに分解されます。Cyclic di-AMPには、トランスポーター、リボスイッチ、転写因子、胞子形成、カリウムホメオスタシス、細胞壁ホメオスタシス、バイオフィルム形成、環境ストレス管理、およびビルレンスなどの多様なプロセスを制御する酵素への結合などを仲介するメカニズムがあります3,4。一例として、B. subtilisのDNA integrity scanning proteinのDisAは、DNAスキャンの後、ジアデニル酸シクラーゼドメインを介してCyclic di-AMPを合成し、DNAを損傷することなく胞子形成を起こすことができます1。

DNAスキャン後の低レベルのCyclic di-AMPは、胞子形成を阻害します。また、Cyclic di-AMPを生産する細菌では、それ自体は生存に不可欠ですが、過剰な蓄積は細菌の細胞死を引き起こします3。真核生物は、パターン認識レセプターのDDX41によってCyclic di-AMPを検出し、細菌感染後にインターフェロン遺伝子の膜貫通タンパク質刺激因子（STING）によるシグナル伝達を誘導することにより、自然免疫システムを活性化します2,5,6。

Cyclic di-GMPとは

Cyclic di-GMPは、細菌の様々な細胞プロセスに関与する細菌のセカンドメッセンジャーです1,7。Cyclic di-GMPは、5'-3'-大員環によって連結された2つのGMP部分で構成され、ジグアニル酸シクラーゼによってGTPの2つの分子から合成され、また直鎖5'-ホスホグアニリル-（3'-5 '）-グアノシン（pGpG）ジヌクレオチドまたはdi-GMP特異的なホスホジエステラーゼ（PDE）によって2分子のGMPに分解されます2。一方、ジグアニル酸シクラターゼのGGDEFドメインへの結合により、非競合的な生成物を阻害し、自身の合成を調節します。Cyclic di-GMPは、転写因子、ATPase、リボスイッチ、キナーゼへの結合などの効果を介して、バイオフィルムの形成や分散、運動性、病原性、細胞周期などの多様なプロセスを制御するメカニズムがあります1,2,7。また、真核細胞は、細菌感染後にCyclic di-GMPがインターフェロン遺伝子の膜貫通タンパク質刺激因子（STING）に結合し、自然免疫系の活性化につながります8,9。

参考文献

  1. Romling, U., et al., Microbiol. MoL Biol., 77(1), 1～52 (2013).
    "Cyclic di-GMP: The first 25 years of a universal bacterial second messenger Rev."
  2. Jenal, U., et al., Not. Rev. Microbiol, 15(5), 271～284 (2017).
    "Cyclic di-GMP: Second messenger extraordinaire. "
  3. Commichau, F.M., et al., J. Bocteriol., 201(1), e00462～18 (2019).
    "Making and breaking of an essential poison: The cyclases and phosphodiesterases that produce and degrade the essential second messenger cyclic di-AMP in bacteria."
  4. Fahmi, T., et al., Infect. Immun., 87(6), e00147～19 (2019).
    "The second messenger c-di-AMP regulates diverse cellular pathways involved in stress response, biofilm formation, cell wall homeostasis, SpeB expression, and virulence in Streptococcus pyogenes."
  5. Sauer, J.D., et al., Infect. Immun., 79(2), 688～694 (2011).
    "The N-ethyl-N-nitrosourea-induced Goldenticket mouse mutant reveals an essential function of Sting in the in vivo interferon response to Listerio monocytogenes and cyclic dinucleotides.
  6. Parvatiyar, K., et al., Not. Immunol., 13(12), 1155～1161 (2012).
    "DDX41 recognizes bacterial secondary messengers cyclic di-GMP and cyclic di-AMP to activate a type I interferon immune response."
  7. Martinez, L.C. and Vadyvaloo, V., Front. Cell. Neurosci., 4(38), 1～15 (2014).
    "Cyclic di-GMP: Mechanisms of post-transcriptional gene regulation in bacterial biofilms."
  8. Schaap, P., IUBMB Life, 65(11), 897～903 (2013).
    "Cyclic di-GMP: Cyclic di-nucleotide signaling enters the eukaryote domain."
  9. Zhang, X., et al., Mol. Cell, 51(2), 226～235 (2015).
    "Cyclic GMP-AMP containing mixed phosphodiester linkages is an endogenous high-affinity ligand for STING."


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品名 Cyclic di-AMP ELISA Kit Cyclic di-GMP ELISA Kit
商品コード 501960 501780
測定試料 細菌の細胞ライセート
フォーマット 96 well*
測定原理 競合法
測定時間 4時間
測定方法 比色
測定波長 450 nm
測定範囲 15.6～2,000 pg/ml 4.6～10,000 pg/ml
検出限界 20.7 pg/ml（0.03 pmol/ml） 5.3 pg/ml（0.008 pmol/ml）
キット内容 Goat anti-mouse IgG-coated plate ● －
Cyclic di-AMP-HRP tracer ● －
Cyclic di-AMP standard ● －
Cyclic-di-AMP ELISA monoclonal antibody ● －
Mouse anti-rabbit IgG-coated plate － ●
Cyclic di-GMP-HRP tracer － ●
Cyclic di-GMP standard － ●
Cyclic-di-GMP ELISA monoclonal antibody － ●
Immunoassay buffer C concentrate ● ●
Wash buffer concentrate ● ●
Polysorbate 20 ● ●
TMB substrate solution ● ●
HRP stop solution ● ●
ELISA tracer dye ● ●
ELISA antiserum dye ● ●
96-well cover sheet ● ●

＊ ストリップウェルプレートと、ソリッドウェルプレートをご選択いただけます。


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操作方法概略

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使用例

下記の画像をクリックすると、3'3'-cGAMP ELISA Kit（#502130）、Cyclic di-AMP ELISA Kit（#501960）、Cyclic di-GMP ELISA Kit（#501780）を使用したApplication Note（PDFファイル）がダウンロードできます。

Quantification of Cyclic Dinucleotides by ELISA


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（テクニカルサポート 試薬担当）

reagent@funakoshi.co.jp

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