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タンパク質間の相互作用研究に有用なビオチンリガーゼに対する抗体 抗TurboID(mutated BirA)抗体

掲載日情報:2021/07/26 現在Webページ番号:70013

E.coli由来のビオチンリガーゼ(BirA)を改変した酵素であるTurboIDに対するポリクローナル抗体をご紹介します。
TurboIDを用いた近接依存性標識法(Proximity Labelling)実験は、タンパク質相互作用の研究に有用です。抗TurboID抗体は、近接依存性標識法を用いた実験において、細胞内で発現させたTurboID融合タンパク質の発現確認に使用できます。


近接依存性標識法(Proximity Labelling)とは

近接依存性標識法(Proximity Labelling)は、目的タンパク質の近位にあるタンパク質の標識(この場合はビオチン化)を可能にする実験技術です。この技術は、目的タンパク質とビオチンリガーゼの融合遺伝子を、生細胞内で発現させることによって実現されます。TurboIDは、ビオチンリガーゼBirAを改変した酵素で、著しく高い活性を有し、より高い時間分解能とin vivoでの幅広いアプリケーションを提供します。従来用いられていたBirA改変酵素BioIDは標識に18時間以上要しましたが、TurboIDでは室温でわずか10分で済みます。

TurboID(改良型BirA)を用いた近接依存性標識法の例

TurboIDを用いた近接依存性標識法の例

近接依存性標識法の技術は、下記のようなさまざまな文献に記載されています。



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特長

  • 抗原:TurboID-His6_pET21a(Plasmid #107177)のプラスミドを用いて生成したE.coli由来の改変BirA組換え体(リコンビナント)タンパク質
  • 免疫動物:ウサギ(ポリクローナル)
  • 交差性:TurboID(mutated BirA)
  • 適用:ウエスタンブロット
  • 形状:凍結乾燥品

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使用例

シロイヌナズナ(Arabidopsis thaliana)葉を用いたウエスタンブロット像

図1. シロイヌナズナ(Arabidopsis thaliana)葉を用いたウエスタンブロット像

一次抗体:本製品(#AS20-4440
二次抗体:HRP標識ヤギ抗ウサギIgG抗体(#AS09-602
レーン1:20 μgのA. thaliana - 野生型Col-0(ネガティブコントロール)
レーン2:20 μgのA. thaliana - POI融合TurboIDを発現(Independent line 1)
レーン3:20 μgのA. thaliana - POI融合TurboIDを発現(Independent line 2)
レーン4:20 μgのA. thaliana - POI融合TurboIDを発現(Independent line 3)
レーン5:10 ngの精製TurboID(ポジティブコントロール)


精製TurboIDを用いたウエスタンブロット像

図2. 精製TurboIDを用いたウエスタンブロット像

一次抗体:本製品(#AS20-4440
二次抗体:HRP標識ヤギ抗ウサギIgG抗体(#AS09-602
レーン1:1 ngの精製TurboID
レーン2:5 ngの精製TurboID
レーン3:10 ngの精製TurboID
レーン4:25 ngの精製TurboID
レーン5:50 ngの精製TurboID
レーン6:75 ngの精製TurboID
TurboIDの分子量=35 kDa

米国マサチューセッツ大学アマースト校(Elizabeth Vierling Lab Department of Biochemistry and Molecular Biology)のEli Gordon氏およびDr. Patrick Treffon提供


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参考情報


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