アセチルコリンエステラーゼ活性測定キット QuantiChrom Acetylcholinesterase Assay Kit
掲載日情報：2021/02/24 現在Webページ番号：69667
試料中のアセチルコリンエステラーゼ（Acetylcholinesterase）活性を、比色法により簡便かつ高感度で測定するキットです。アセチルコリンエステラーゼ対する阻害物質のハイスループットスクリーニングにも最適です。
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測定例
アセチルコリンエステラーゼカイネティック反応曲線例
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BioAssay Systems社では、2018年1月1日より緑化推進のために製品へのプロトコルの添付を廃止しました。各製品のプロトコルについては、BioAssay Systems社ホームページよりダウンロードしてご利用下さい。 |
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アセチルコリンエステラーゼとは
アセチルコリンエステラーゼ（EC 3.1.1.7、AChE）は、RBCコリンエステラーゼとしても知られ、主に血液と神経シナプス中に見られます。血清コリンエステラーゼ活性が低いことは、殺虫剤への曝露または多くの変異遺伝子型の1つに関連している可能性があります。AChEは、神経伝達物質であるアセチルコリンのコリンと酢酸への加水分解を触媒します。この反応は、コリン作動性ニューロンが活性化後に静止状態に戻るために必要です。細胞および血漿中のコリンエステラーゼレベルは、曝露および接触に関する安全予防措置を確立する際のガイドとして、また有機リン系殺虫剤との接触領域から労働者を排除する必要性を判断する際のガイドとして使用されます。
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測定原理
本アッセイは、改良エルマン法（Ellman method）に基づいています。アセチルコリンエステラーゼの作用によって生成されたチオコリンは、5,5'-ジチオビス（2-ニトロ安息香酸）と黄色物質を形成します。その412 nmにおける吸光度は、試料中のアセチルコリンエステラーゼ活性に正比例します。
酵素単位の定義
室温下、pH7.5で1分あたり1μMのチオコリンの生成を触媒する酵素量を1ユニットと定義します。
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特長
- 容易に自動化でき、ハイスループット化に適しています。
- フォーマット：96 wellプレート、キュベット
- 測定試料：血清、血漿、およびその他の生物学的試料
- 必要試料量：10μl
- インキュベーション時間（温度）：2分および10分（室温）
- 測定方法：比色
- 測定波長：412 nm
- 測定範囲：10～600 U/L
- 検出限界：10 U/L
- 測定回数：100 tests
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操作方法概略
- Working reagent（WR）*を測定前30分以内に調製する。各ウェル当たり2 mgのReagentを使用する。
- 水200μlとCalibrator 200μlを、透明平底96 wellマイクロプレートの別々のウェルに加える。試料10μlを各ウェルに加える。
- WR 190μlを各試料のウェルに加え、プレートを軽くタップして混合する。
- プレートリーダーを用いて2分後、および10分後に412 nmにおける吸光度を測定する。
注意事項
- 血液試料は、Assay bufferで40倍希釈する（例、血液 5μlをAssay buffer 195μlと混合する）。
- 組織または細胞ライセートは、0.1Mリン酸バッファー（pH 7.5）中で軽く超音波処理またはホモジナイズを行った後に、14,000 rpmで5分間の遠心分離を行って上清を使用する。
- できれば新鮮試料を測定に使用する。それが無理な場合、冷蔵試料を24時間以内に使用する。
- 希釈率を考慮しないでAChE活性が600 U/Lより高い場合には、Assay bufferで試料をさらに希釈して再度測定し、その後に希釈率を乗じる。
- ＊ Reagent 2 mg当たりAssay buffer 200μlを加えて、ボルテックスにより溶解しWRを調製する。
- 標準の1 mlサイズのキュベットを用いる場合には、水 1 ml、Calibrator 1 ml、試料50μlにWR 950μlを加える。
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キット内容
- Assay buffer（pH 7.5）
- Reagent
- Calibrator（200 U/L）
※ キットには、透明平底96 wellマイクロプレートは含まれていません。別途ご用意下さい。カイネティック反応のため、Working reagent（WR）を標準試料や試料に迅速に追加し、軽くかつ完全に混合する必要があります。そのため、マルチチャンネルピペットの使用を推奨します。
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価格
[在庫・価格 ：2024年04月20日 19時15分現在]
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Acetylcholinesterase Assay Kit, QuantiChrom (100assays) |
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[在庫・価格 ：2024年04月20日 19時15分現在]
Acetylcholinesterase Assay Kit, QuantiChrom (100assays)
文献数： 15
- 商品コード：DACE-100
- メーカー：BAS
- 包装：1kit
- 価格：¥93,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 |
測定試料：血清,血漿,全血，感度：10 U/L，測定範囲：10-600 U/L，検出方法：呈色，測定波長：412 nm，アッセイ法：Assay，アッセイ数：100 tests |
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| 法規制等 | |||
| 保存条件 | 室温 | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
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| 製品記事 |
BioAssay Systems社 アッセイキット選択ガイド／製品リスト |
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