ホスホリパーゼ D活性測定キット EnzyChrom Phospholipase D Assay Kit
掲載日情報：2021/02/02 現在Webページ番号：69651
試料中のホスホリパーゼ D（Phospholipase D）活性を比色法または蛍光法により簡便、迅速かつ高感度で測定するキットです。ホスホリパーゼ Dの代謝における薬物の影響の研究にも最適です。
※ 本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。
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検量線例
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BioAssay Systems社では、2018年1月1日より緑化推進のために製品へのプロトコルの添付を廃止しました。各製品のプロトコルについては、BioAssay Systems社ホームページよりダウンロードしてご利用下さい。 |
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ホスホリパーゼ Dとは
ホスホリパーゼ D（PLD、Phospholipase D）は、グリセロリン脂質のホスホジエステル結合の加水分解を触媒し、ホスファチジン酸と遊離のヘッドグループを生成します。ホスホリパーゼ Dの発現異常は、ヒトのがんに関連しています。
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測定原理
本アッセイでは、ホスホリパーゼ Dによりホスファチジルコリンをコリンに加水分解します。生成したコリンを、コリンオキシダーゼとH2O2特異的色素を使用して測定します。570 nmでの吸光度または蛍光強度（Ex 530 nm / Em 585 nm）は、試料中のホスホリパーゼ D活性に正比例します。
酵素単位の定義
ホスホリパーゼ Dの1 unitは、pH7.4で、1分当たり1μmolのコロン形成と定義します。
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特長
- ハイスループットスクリーニングにも適応しています。
- 操作は簡便で、単一のWorking reagent（WR）を添加し、インキュベーションするだけで完結します。
- 測定動物種：全動物種
- 測定試料：生体試料
- 必要試料量：10μl
- インキュベーション時間：10分、30分
- フォーマット：96 wellプレート
- アッセイ数：100 assays
※ SHグループを含む試薬（＞5μMのβ-メルカプトエタノール、DTTなど）、アジ化ナトリウム、EDTA、およびドデシル硫酸ナトリウムは、このアッセイに干渉する可能性があるために、試料の準備における使用を避けて下さい。試料にコリンを含む場合は、透析または膜ろ過により除去する必要があります。
| 測定方法 | Colorimetric（比色） | Fluorometric（蛍光） |
|---|---|---|
| 測定波長 | 570 nm（550～585 nm） | 励起 530 nm／蛍光 585 nm |
| 測定範囲 | 0.06～10 U/L | 0.04～1 U/L |
| 検出限界 | 0.06 U/L | 0.04 U/L |
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操作方法概略
比色法
- Standardを希釈して標準溶液を調製する。標準溶液（0、90、180、300μM Calibrator）および試料の各10μlを、透明平底96 wellマイクロプレート（キットには含まれていない）の各ウェルに添加する。
- 製品データシートを参照しWorking reagent（WR）を調製する。WR 90μlを各標準溶液と試料のウェルに加え、プレートをタップして混合し、希望の温度下でインキュベートし、10分および30分後の吸光度570 nm（550～585 nm）を測定する。
蛍光法
- 標準溶液（0、9、18、30μM Calibrator）を調製し、使用する。
- 標準溶液と試料の各10μlを黒色96 wellマイクロプレート（キットには含まれていない）の各ウェルに加える。
- 製品データシートを参照しWorking reagent（WR）を調製する。各ウェルにWR 90μlを加え、プレートをタップして混合し、希望の温度下でインキュベートし、10分および30分後の蛍光強度（Ex 530 nm/Em 585 nm）を測定する。
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キット内容
- Assay buffer
- Enzyme mix
- Dye reagent
- Substrate
- Calibrator
※ キットには、透明平底96 wellマイクロプレートおよび黒色96 wellマイクロプレートは含まれていません。別途ご用意下さい。
※ 比色法による測定にはマイクロプレートリーダー、蛍光法による測定には蛍光プレートリーダーが必要です。
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価格
[在庫・価格 ：2024年04月26日 00時00分現在]
| 詳細 | 商品名 |
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文献数 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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Phospholipase D Assay Kit, EnzyChrom (100tests) |
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[在庫・価格 ：2024年04月26日 00時00分現在]
Phospholipase D Assay Kit, EnzyChrom (100tests)
文献数： 1
- 商品コード：EPPD-100
- メーカー：BAS
- 包装：1kit
- 価格：¥84,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 |
感度：0.04 U/L，測定範囲：0.06-10 U/ (比色)/0.04-1 U/ (蛍光)，検出方法：呈色, 蛍光，測定波長：570, 530/590 nm，アッセイ法：Assay，アッセイ数：100 tests |
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| 法規制等 | |||
| 保存条件 | -20℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
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| 製品記事 |
BioAssay Systems社 アッセイキット選択ガイド／製品リスト |
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