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ペルオキシダーゼ活性測定キット QuantiChrom Peroxidase Assay Kit

掲載日情報:2020/12/10 現在Webページ番号:69624

ペルオキシダーゼ(Peroxidase)活性を、比色法または蛍光法により簡便かつ迅速に定量するキットです。
本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

ペルオキシダーゼ検量線

96 well比色

ペルオキシダーゼ検量線

96 well 蛍光

キット品バナー

BioAssay Systems社 アッセイキット Metabolism Research Kitシリーズ Obesity Diabete Research Kits
GoGreen画像

BioAssay Systems社では、2018年1月1日より緑化推進のために製品へのプロトコルの添付を廃止しました。各製品のプロトコルについては、BioAssay Systems社ホームページよりダウンロードしてご利用下さい。

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ペルオキシダーゼとは

ペルオキシダーゼ(EC番号1.11.1.x)は、次の酸化還元反応を触媒します。

ROOR' + 電子供与体(2 e-)+ 2H+→ROH + R'OH

多くのペルオキシダーゼにとって最適な基質は過酸化水素(H2O2)ですが、他のペルオキシダーゼは過酸化脂質などの有機ヒドロペルオキシドに対してより活性があります。細胞内では、ペルオキシダーゼは好気性呼吸中に副産物として形成される有毒な水酸化物ラジカルを破壊します。ペルオキシダーゼは、動物(ミエロペルオキシダーゼ様酵素など)、植物、真菌、細菌に幅広く見られる酵素(Horseradish Peroxidase(HRP)のようなシトクロムcペルオキシダーゼ様酵素)です。

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測定原理

このアッセイでは、H2O2とペルオキシダーゼの反応中にレゾルフィンを形成する電子供与色素を使用しています。生成した発色・蛍光産物の吸光度(OD570 nmまたは)蛍光強度(Ex 530 nm/Em 585 nm)を測定することにより、酵素活性を直接決定することができます。

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特長

  • 混合とインキュベーションのみで測定が行えます。
  • 自動分析、ハイスループットスクリーニングにも適応します。
  • 蛍光法の測定では、比色法の約10倍の測定感度が得られます。
  • 測定試料:血清、血漿、尿、組織、培地など
  • 必要試料量:10μl
  • アッセイフォーマット:96 well plate
測定方法 Colorimetric(比色) Fluorometric(蛍光)
測定波長 570 nm 励起 530 nm/蛍光 585 nm
測定範囲 2~50 U/L 0.1~5 U/L
検出限界 2 U/L 0.1 U/L

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操作方法概略

比色法

  1. H2O 100μlとResorufin 100μlを透明平底96 wellマイクロプレートの2つのウェルに加える。Sample Blankには、H2O 10μlを加え、各試料10μlをそれぞれ別のウェルに加える。製品データシート(製品DS)の記載に従って、実験前にWorking Reagent(WR)を調製する。WR 90μlを各試料のウェルに加え、プレートをタップして混合後、室温で10分間インキュベートする。
  2. Stop reagent 100μlを各ウェルに加える。プレートをタップして混合後、吸光度(OD570 nm)を測定する。

蛍光法

  1. 蛍光法を使用する場合、測定範囲は0.1~5 U/Lとなるので、ResorufinをdH2Oで10倍希釈する。
  2. H2O 100μlと1:10希釈Resorufin 100μlを黒色平底96 wellマイクロプレートの2つのウェルに加える。Sample Blankには、H2O 10μlを加え、各試料10μlをそれぞれ別のウェルに加える。製品データシート(製品DS)の記載に従って、実験前にWorking Reagent(WR)を調製する。WR 90μlを各試料のウェルに加え、プレートをタップして混合後、室温で10分間インキュベートする。
  3. Stop reagent 100μlを各ウェルに加える。プレートをタップして混合後、蛍光強度(Ex 53O nm/Em 585 nm)を測定する。

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キット内容

  • Assay buffer
  • Dye reagent
  • Stop reagent
  • 3% Stabilized H2O2
  • Resorufin

キットには、透明平底96 wellマイクロプレート比色)法、および黒色平底96 wellマイクロプレート蛍光)は含まれていません。別途ご用意下さい。

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価格

[在庫・価格 :2024年04月26日 08時35分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。

[在庫・価格 :2024年04月26日 08時35分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。

Peroxidase Assay Kit, QuantiChrom (100tests)

文献数: 9

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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