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マイコプラズマ汚染検出キット MycoDiag Mycoplasma Detection Assay

掲載日情報:2020/12/29 現在Webページ番号:69601

細胞培養上清における、マイコプラズマによる汚染の有無を、PCR法またはqPCR法で2時間以内に、また高い特異性と感度で確認できるキットです。25種類の主要なマイコプラズマ種を検出することができます。また、キットには偽陰性の結果を回避するため、ポジティブ・ネガティブ・内部コントロールが含まれています。

使用例

図をクリックすると拡大図をご覧いただけます。

qPCRで解析の例

figure1

qPCR結果

2%アガロースゲル電気泳動での解析例

figure2

2%アガロースゲル電気泳動結果

  • Lane 1:PUC19 ladder
  • Lane 2:Sample 1(陰性
  • Lane 3:Sample 2(陰性
  • Lane 4:Sample 3(陰性
  • Lane 5:Sample 4(陽性
  • Lane 6:ポジティブコントロール(129~142 bp, 230 bp)
  • Lane 7:ネガティブコントロール(増幅なし)
  • Lane 8:PUC19 ladder

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マイコプラズマのコンタミネーションとは

培養細胞へのマイコプラズマのコンタミネーションは、実験室における重要な問題です。光学顕微鏡では見えないこれらの小さな細菌は、細胞を劇的に変化させ、細胞代謝(細胞死、成長障害、トランスフェクションの効率の低下、細胞の形態および表現型の変化、遺伝子発現プロファイルの障害など)に影響を及ぼし、そのためコンタミネーションを起こした培養細胞を使用して得られたデータの信頼性に深刻な結果をもたらします。継代細胞株の約15~35%がマイコプラズマによってコンタミネーションが起きていることが報告されています1

細胞培養

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特長

  • 操作は簡便で、2時間以内に結果が得られます。
  • マイコプラズマを高い特異性かつ高感度で検出できます。
  • それぞれのqPCR装置に最適化された製品があります。また、通常のPCR後、アガロースゲル電気泳動で確認することも可能です。
  • 酵素活性やHoechst色素での染色による検出を行う製品と比べて、偽陽性を抑制できます。
  • コンタミネーションの原因となる代表的なマイコプラズマ25種を検出できます2
  • 公設および民間の多くの研究機関において、培養細胞のルーティン検査での使用実績があります。

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製品ラインナップ/選択ガイド、価格

お手持ちのqPCR装置の機種をご確認の上、適合するキットをご選択下さい。通常のPCR後、アガロースゲル電気泳動で確認する場合は、任意のキットをご使用になれます。商品コードをクリックすると価格表をご覧いただけます。

会社名 機器名 包装、商品コード、価格価格
20 reactions 50 reactions 100 reactions
Roche LightCycler 1.0 & 2.0 MycoDiag-W20 MycoDiag-W50 MycoDiag-W100
LightCycler 96
LightCycler 480
Applied Biosystems Step One / One Plus Real-Time System MycoDiag-R20 MycoDiag-R50 MycoDiag-R100
ABI 5700 / 7000 / 7300
ABI 7500 (Standard/FAST block)* MycoDiag-LR20 MycoDiag-LR50 MycoDiag-LR100
ABI 7700 / 7900 HT (Standard/FAST block)* MycoDiag-R20 MycoDiag-R50 MycoDiag-R100
ViiA7 (Standard/FAST block)*
QuantStudio 5, 6, 7, 12K Flex System (Standard/Fast block)*
MycoDiag-LR20 MycoDiag-LR50 MycoDiag-LR100
Bio-Rad iCycler iQ / iQ5、MyiQ / MyiQ2 MycoDiag-F20 MycoDiag-F50 MycoDiag-F100
Chromo4、Mini Opticon / Opticon / Opticon 2
CFX Connect / CFX96 / CFX384
MycoDiag-W20 MycoDiag-W50 MycoDiag-W100
Eppendorf Mastercycler ep realplex 2 / 2S / 4 /4S MycoDiag-W20
MycoDiag-R20
MycoDiag-W50
MycoDiag-R50
MycoDiag-W100
MycoDiag-R100
IT-IS Life Science MyGo Pro MycoDiag-W20 MycoDiag-W50 MycoDiag-W100
Stratagene / Agilent Mx3000P / Mx 3005P / Mx4000、AriaMix MycoDiag-LR20 MycoDiag-LR50 MycoDiag-LR100
Techne Quabtica、PrimeQ MycoDiag-F20 MycoDiag-F50 MycoDiag-F100

* 対応したキットを用いた場合でも、Fast Modeでの使用には適していません。



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本キットで検出できるマイコプラズマ種

M. agalactiae M. arginini M. arthritidis M. bovis M. cloacale
M. falconis M. faucium M. fermentans M. gallisepticum M. genitalium
M. hominis M. hyorhinis M. hyosynoviae M. opalescens M. orale
M. pirum M. pneumoniae M129 M. pulmonis M. salivarium M. spermatophilum
M. synoviae M. timone A. laidlawii Spiroplasma U. urealyticum

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操作方法概略

MycoDiag操作方法概略

長期培養した古い細胞培養液中にはPCR阻害物質が蓄積する場合があるため、新しい培地に播種して24時間後、70~80%コンフルエントの細胞培養上清を測定に用いることを強くお勧めします。

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キット内容

  • MycoDiag-Primers
  • InternalCTR-Primers
  • Perfect Master Mix SYBR Green(2×)
  • MycoPOS
  • InternalCTR
  • PCR grade H2O

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参考文献

  1. Tantibhedhyangkul, W., et al., "Anti-Mycoplasma Activity of Daptomycin and Its Use for Mycoplasma Elimination in Cell Cultures of Rickettsiae.", Antibiotics (Basel)., 8(3), 123 (2019)
  2. McGarrity, G., et al., "Mycoplasmas and tissue culture cells." In: Maniloff, J., McElhaney, R.N., Finch, L.R., Baseman, J.B. (Eds.), Mycoplasmas, Molecular Biology and Pathogenesis, American Society for Microbiology, 445~454 (1992).

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価格

[在庫・価格 :2024年04月20日 10時55分現在]

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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