ADP測定キット EnzyChrom ADP Assay Kit
掲載日情報：2020/11/16 現在Webページ番号：69598
細胞および他の生物学的試料中のADP（アデノシン二リン酸, Adenosine diphosphate）を96-well plateフォーマットの蛍光法により簡便、迅速かつ高感度で定量するキットです。
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検量線例
ADPの検量線
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BioAssay Systems社では、2018年1月1日より緑化推進のために製品へのプロトコルの添付を廃止しました。各製品のプロトコルについては、メーカーホームページよりダウンロードしてご利用下さい。 |
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ADP（アデノシン二リン酸, Adenosine diphosphate）とは
ADPの役割
ADP（アデノシン二リン酸, Adenosine diphosphate）は、ATPaseによるATPの脱リン酸化産物です。ADPは、ATP合成酵素によってATPに戻すことができます。ADP濃度は、中間代謝に関与するいくつかの酵素を調節します。
ADP測定における問題点
従来のADP濃度の測定は、ADPがATPに変換された後にルシフェラーゼ／ルシフェリンを介したアッセイによって行われています。しかし、これらのアッセイではADPをATPに変換する前に、試料中のATPを測定する必要があるため、発生期のATP濃度がADP濃度よりも大幅に高い場合、ADPシグナルがATPシグナルに打ち消されてしまいます。
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測定原理
本アッセイでは、ATP存在下でもADP濃度を測定できます。ADPは、まずATPとピルビン酸に変換されます。生成されたピルビン酸は、キットに含まれる非蛍光試薬と反応することで蛍光シグナル（Ex 530 nm／Em 590 nm）を発し、この蛍光強度を測定することによりADPを定量することができます。
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特長
- 測定は簡便かつ高感度で、ハイスループットアッセイにも適応しています。
- ATPの存在下でも、ADPレベルの測定が可能です。
- 測定試料：細胞および他の生物学的試料
- 必要試料量：40μl
- 測定方法：蛍光法
- 測定波長：励起 530 nm／蛍光 590 nm
- 測定時間：30分
- 測定範囲：6～20μM
- 検出限界：0.1μM
- アッセイ数：100 tests
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操作方法概略
- Standardを製品データシートに記載された通りに蒸留水で希釈して標準試料を調製する。
- タンパク質を多く含む試料（特にATPase活性の高い試料）は、10％TCAを添加してボルテックスする。次に、遠心分離によって上清を回収し、中和剤を添加して中和する*。
- 各試料40μlを96 wellプレート（黒色平底）の各ウェルに分注する。測定試料にピルビン酸が含まれる場合、ブランク用に2つの別々のウェルに試料を添加する。
- Reagent A/BおよびEnzymeを所定の比率で混合する。試料にピルビン酸が含まれる場合には、ブランク試料を別に用意する。
- 4.で作製した混合溶液80μlを添加し、暗所で30分間インキュベートする。
- 蛍光強度（Ex 530 nm／Em 590 nm）を測定する。
＊ 細胞アッセイでは、少なくとも1×105個の細胞を使用する必要がある。細胞を10％TCAを含むdH2O中でホモジナイズし、上述した方法により除タンパク処理を行う必要がある。除タンパクした試料の測定においては、ΔRFUに所定の希釈率を乗じる必要がある。
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キット内容
- Reagent A/B
- Enzyme
- Standard
- 10％ TCA
- Neutralizer
※ キットにはマイクロプレート（黒色、平底）は付属していません。
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関連製品
品名をクリックすると製品の詳細、商品コードをクリックすると各製品の価格表をご覧いただけます。
| 品名 | 商品コード | 適応 | 測定方法 |
|---|---|---|---|
| EnzyLight ADP Assay Kit | EADP-100 | 濃度測定、薬効評価 | 化学発光 |
| EnzyLight ATP Assay Kit | EATP-100 | ||
| EnzyLight ADP：ATP ratio Assay Kit | ELDT-100 | 存在比（モル比）の決定 |
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価格
[在庫・価格 ：2025年04月25日 20時15分現在]
| 詳細 | 商品名 |
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文献数 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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EnzyChrom ADP Assay Kit (100tests) |
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[在庫・価格 ：2025年04月25日 20時15分現在]
EnzyChrom ADP Assay Kit (100tests)
文献数： 1
- 商品コード：E2ADP-100
- メーカー：BAS
- 包装：1kit
- 価格：¥106,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | |||
|---|---|---|---|
| 法規制等 | |||
| 保存条件 | -20℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
ニュース2021年7月15日号 p.8 ニュース2020年6月1日号 p.4
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| 製品記事 | BioAssay Systems社 アッセイキット選択ガイド／製品リスト Obesity／Diabetes Research Kits（BioAssay Systems社） Metabolism Research Kitシリーズ |
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