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リアルタイムRT-PCR法による新型コロナウイルス(SARS-CoV-2)RNAスクリーニングキット MutaPLEX Coronavirus real time RT-PCR Kit

掲載日情報:2020/03/26 現在Webページ番号:69282

各種生物学的試料から抽出した新型コロナウイルス(SARS-CoV-2),およびその他のベータコロナウイルス(例:MERS-CoV,SARS-CoV)由来のRNAをリアルタイムRT-PCR法により同時検出するスクリーニングアッセイキットです。

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測定原理

本キットには,各種生物学的試料から抽出したSARS-CoV-2およびその他のベータコロナウイルス(例:MERS-CoV,SARS-CoV)由来のRNAの増幅および同時分析用の特異的プライマーと二重標識プローブが含まれています。RNAの存在は,増幅時におけるプローブの加水分解による蛍光の増加によって検出されます。SARS-CoV-2特異的プローブの蛍光はFAMチャネルで,ベータコロナウイルス特異的プローブの蛍光はCy5チャネルで検出します。

さらに,キットにはRNA抽出の際に試料に添加し,HEX標識プローブにより同じ反応で検出されるControl RNA(Internal Process Control,IPC)が含まれています。このControl RNAによってRT-PCR阻害の検出が可能となり,核酸が生物学的試料から分離されたことを示すコントロールとして機能します。また,キットに含まれるInternal System Control (ISC)は,生物学的試料からの溶出液中に存在するハウスキーピング遺伝子(β-アクチン,複数種)を検出するためのプライマーとプローブで構成されています。これは,不適切な試料の採取法や輸送による偽陰性の結果の防止に役立ちます。β-アクチンの標的配列の増幅は,ROXチャンネルで検出します。

得られる結果

シグナル/Ct値 結果
チャンネル FAM ROX Cy5 HEX
測定対象 SARS-CoV-2 ISC Betacoronaviruses Control RNA
測定結果 Positive Positive or Negative Negative Positive or Negative 新型コロナウイルスRNAを含む
Positive Positive or Negative Positive Positive or Negative 新型コロナウイルスRNAを含む
Negative Positive or Negative Positive Positive or Negative ベータコロナウイルスRNAを含む
Negative Positive Negative ≦34 新型コロナウイルスおよびベータコロナウイルスRNAを含まない。
Negative Negative Negative ≦34 判定不可。試料の量または品質の不十分が考えられる。
Negative Positive Negative Negative or >34 判定不可。リアルタイムRT-PCRの阻害,RNA/DNA抽出のミスが疑われる。
Negative Negative Negative Negative or >34 リアルタイムRT-PCRの阻害,RNA/DNA抽出のミス,もしくは試料の量または品質の不十分が疑われる。

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使用例

RT-PCR1

陽性試料は,FAMチャンネル(SARS-CoV-2)およびCy5チャンネル(その他のベータコロナウイルス)において特異的な増幅を示すが,陰性試料では蛍光シグナルは検出されない。





RT-PCR2

陽性試料と陰性試料のいずれも,コントロールRNAについて特異的なHEXチャンネルでシグナルが示される。陰性試料において,コントロールRNAの増幅シグナルが検出される場合,SARS-CoV-2に特異的なFAMチャネルにおいてシグナルが見られないことがRT-PCRの阻害やDNA/RNA分離の失敗によるものではなく,試料が真の陰性であることを示している。

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MEMO 新型コロナウイルス(SARS-CoV-2)とは

新型コロナウイルス(SARS-CoV-2)とは (クリックで開閉します)

コロナウイルス(CoV)のファミリーには,一般的な風邪の原因ウイルスや,中東呼吸器症候群(MERS-CoV)や重症急性呼吸器症候群(SARS-CoV)などのより深刻な疾患に至る病気を引き起こすウイルスが含まれています。新型コロナウイルス(SARS-CoV-2)は,肺疾患CoViD-19を引き起こす新しい株です。コロナウイルスは人畜共通感染ウイルスで,動物とヒトの間で感染します。詳細な調査によって,SARS-CoVはジャコウネコからヒトに,MERS-CoVはヒトコブラクダからヒトに感染したことが判明しました。いくつかの既知のコロナウイルスは,未だにヒトに感染しておらず動物間を循環しています。

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キット内容

  • Reaction mix
  • Enzyme
  • Positive control
  • Negative control
  • Control RNA

キットにはRNA抽出・精製キットは含まれていません。測定にはリアルタイムRT-PCR装置が必要です。

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適合が確認されているリアルタイムRT-PCR装置

  • LightCycler 480Ⅱ
  • Stratagene Mx3000P/Mx3005P
  • ABI 7500
  • AriaMx
  • Bio-Rad CFX96
  • Rotor-Gene Q/3000/6000
  • Mic qPCR Cycler

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特異性

Eluates with known status MutaPLEX Coronavirus
Beta CoV SARS-CoV-2
Cy5 FAM
HCoV-OC43 Positive Negative
HCoV-229E Negative Negative
MERS-CoV Positive Negative

Cy5 / FAMチャンネルともにNegativeとなるウイルス,微生物種

  • Influenza A H3N2/H5N1, Influenza B, Respiratory Syncytial Virus A/B, Parainfluenzavirus 1/2/3/4
  • Metapneumovirus, Adenovirus, Rhinoviruses, Enteroviruses, Human Bocavirus
  • Legionella pneumophila, Mycoplasma pneumophila, Mycobacterium tuberculosis complex
  • Bordetella pertussis, Bordetella parapertussis, S. aureus, MRSA, MSSA, Streptococcus spp.

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価格

[在庫・価格 :2020年04月06日 19時51分現在]

※ 納期として表示している期間は弊社発注日からの「目安」となり、納期を保証する物ではございません。実際には長くかかる場合もございます。ご注意ください。
詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
  • 価格
  • 在庫
  • 法規制等
納期 文献数
Coronavirus Real time RT-PCR Kit, MutaPLEX (32reactions)
10日程度  0
説明文
法規制等
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Coronavirus Real time RT-PCR Kit, MutaPLEX (32reactions)

文献数:0

  • 商品コード:KGR192632
  • メーカー:IMD
  • 包装:1kit
  • 価格:¥86,000
  • 在庫:無(未発注)
  • 納期:10日程度 
  • 法規制等:

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文献数:0

  • 商品コード:KGR192696
  • メーカー:IMD
  • 包装:1kit
  • 価格:¥206,000
  • 在庫:無(未発注)
  • 納期:10日程度 
  • 法規制等:

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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