わずか1分で抗体のストリッピングが行えるバッファー StripPRO 1 Min Stripping Buffer
掲載日情報：2019/12/05 現在Webページ番号：69194
エナジェネシス バイオメディカル /
Energenesis Biomedical Co., Ltd.（旧 Visual Protein Biotechnology Corp.）
[メーカー略称：VIP]
化学発光検出によるウエスタンブロッティングにおいて、従来は抗体除去に市販のストリッピングバッファーを用いた場合、室温で5～30分間のインキュベートを要しました。本製品は、わずか1～3分間のインキュベートだけでストリッピングを行えるバッファーです。ストリッピング後のメンブレンは、通常通りにリプローブを行うことができ、時間とコストを大幅に節約できます。
ご案内
2016年1月1日、VISUAL PROTEIN BIOTECHNOLOGY社は、ENERGENESIS BIOMEDICAL社と合併しました。それにより、同社製品はENERGENESIS BIOMEDICAL社の製品ラインの一部となりました。VISUAL PROTEINのブランド名および供給体制に変更はありません。両社は、この合併により、研究者の皆様に今後とも一層より良いサービスの提供を目指してまいります。
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使用例
競合品との比較例
複数回のストリッピングとリプローブの繰り返しによる異なる分子量の標的因子の検出
Hela細胞ライセートの2倍段階希釈液（20 μg /well～）をSDS-PAGEにより分離した。タンパク質を0.45um PVDFメンブレンに転写し、☞ BlockPRO 1 Min Protein-Free Blocking Buffer（#BF01-1L）でブロッキング処理後に☞ LumiFlash Ultima Chemiluminescent Substrate、HRPシステム（#LF08）およびChemlux SPX-600V（2x2）を用いてウエスタンブロッティングにより分析した。二次抗体（#115-035-003、3115-035-144、Jackson ImmunoResearch）は、すべて1：10,000濃度で用いた。
- 図A（1回目の検出）：抗Acetyl-CoA carboxylaseモノクローナル抗体（#3676、Cell Signaling Technology社）（1:1,000）で結合させて検出した。
- 図B（ストリッピング）：メンブレンを本製品(#SP01-500)中で室温で1分間インキュベートすることによりストリッピングし、次に1X TBS Tween-20で洗浄後、基質を加えてインキュベートし、ストリッピング効率を確認した。
- 図C（2回目の検出）：再度ブロッキング処理後、抗p38モノクローナル抗体（#ab31828、Abcam社）（1：1,000）を用いてリプローブを行った。
- 図D（2回目のストリッピング）：図Bと同様に、2回目のストリッピングとストリッピング効率の再確認を行った。
- 図E（3回目の検出）：再度ブロッキング処理後、抗GAPDH抗体（#ab8245、Abcam社）（1：10,000）を用いてリプローブを行った。
非リン酸化／リン酸化タンパク質の検出におけるストリッピングとリプローブの評価
Hela細胞ライセートを、PhosSTOP（Roche）を加えたRIPA Cell Lysis Buffer（#RP05）で抽出した。Hela細胞ライセートの2倍段階希釈液（20 μg /well～）をSDS-PAGEで分離した。
- 図A（リン酸化タンパク質の検出）：抗リン酸化ACC抗体を用い、☞ LumiFlash Ultima Chemiluminescent Substrate、HRP System（#LF08）で検出した。
- 図B（ストリッピング）：メンブレンを本製品 (#SP01-500)中で室温で1分間インキュベートすることによりストリッピングした。
- 図C（非リン酸化タンパク質の検出）：再度ブロッキング処理後、抗Acetyl-CoA carboxylase抗体を用いて検出した。
※ 図A/Cいずれも、抗GAPDH抗体をコントロールとして用いた。
メンブレンの種類の違いによるストリッピング＆リプローブ効率の評価
Hela細胞ライセートの1/2倍段階希釈液（20 μg /well～）をSDS-PAGEで分離した。
- 図A（1回目の検出）：タンパク質をニトロセルロース（NC）とPVDFのメンブレンに転写した後、それぞれのメンブレンに抗Acetyl-CoA carboxylase抗体を用い、☞ LumiFlash Ultima Chemiluminescent Substrate、HRP System（#LF08）で検出した。
- 図B（1回目のストリッピング）：メンブレンを本製品(#SP01-500)中で室温で1分間インキュベートすることによりストリッピングを行った。
- 図C（2回目の検出）：ブロットを再度ブロッキングし、抗GAPDH抗体を用いてリプローブを行った。
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製品の種類
商品コードをクリックすると各製品の価格表をご覧いただけます。
| 品名 | StripPRO 1 Min Stripping Buffer | StripPRO 1 Min Stripping Buffer (5X) |
|---|---|---|
| 製品概要 | Ready-to-use | ×5濃度（使用前にddH2Oで要希釈） |
| 商品コード | SP01-500 | SP05-100 |
| 包装 | 500 ml | 100 ml |
| 価格 | ||
| 在庫 |
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特長
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操作法概略
- ニトロセルロースまたはPVDFメンブレン上の化学発光基質を洗浄除去する。
- StripPRO 1 Min Stripping Bufferを加えて室温下で1～3分間、撹拌しながらインキュベートする。
- StripPRO 1 Min Stripping Bufferを除去し、洗浄バッファー中で3回洗浄する。
- メンブレンを再度ブロッキング処理し、ウエスタンブロッティングを行う。
※ StripPRO 1 Min Stripping Buffer (5X)（#SP05-100）をご使用の際は、あらかじめddH2Oで5倍に希釈して用いて下さい。
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関連製品
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| 品名 | 包装 | 商品コード | 製品概要 | |
|---|---|---|---|---|
| ☞ LumiFlash Ultima Chemiluminescent substrate、HRP System | 1 kit (100 ml) |
LF08-100 | お求め安い価格なのに高感度、低バックグラウンドでコストパーフォーマンスに優れたウェスタンブロッティングおよびELISA用のHRPの化学発光基質。 | |
| 1 kit (500 ml) |
LF08-500 | |||
| ☞ BlockPRO Protein-Free Blocking Buffer | 1 kit (1L) |
BF01-1L | ウエスタンブロット、ELISA、IHCなどの免疫化学実験に有用なブロッキング用バッファー。 | |
| ☞ Western Blot Tool Box | without LuminolPen | 1 kit | BOX12 | ウエスタンブロッティングに必要な試薬と便利な製品を、お求めやすい包装と価格のセット。 |
| with LuminolPen | 1 kit | BOX12-03 | ||
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価格
[在庫・価格 ：2024年04月19日 09時55分現在]
| 詳細 | 商品名 |
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文献数 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
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StripPRO, 1 Min Stripping Buffer (500mL x 1) |
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StripPRO, 1 Min Stripping Buffer (5X) (100mL x 1) |
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[在庫・価格 ：2024年04月19日 09時55分現在]
StripPRO, 1 Min Stripping Buffer (500mL x 1)
文献数： 0
- 商品コード：SP01-500
- メーカー：VIP
- 包装：1bottle
- 価格：¥24,000
- 在庫：1個
- 納期：2週間程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | |||
|---|---|---|---|
| 法規制等 | |||
| 保存条件 | 室温 | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
ニュース2023年10月1日号 p.25 ニュース2023年4月1日号 p.13
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| 製品記事 |
リプローブ(ストリッピング) - ウエスタンブロット(Western Blot)特集 |
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| 関連記事 | |||
StripPRO, 1 Min Stripping Buffer (5X) (100mL x 1)
文献数： 0
- 商品コード：SP05-100
- メーカー：VIP
- 包装：1bottle
- 価格：¥24,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：2週間程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | |||
|---|---|---|---|
| 法規制等 | |||
| 保存条件 | 室温 | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
ニュース2023年10月1日号 p.25 ニュース2023年4月1日号 p.13
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| 製品記事 |
リプローブ(ストリッピング) - ウエスタンブロット(Western Blot)特集 |
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