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アデノ随伴ウイルス(Adeno-Associated Virus:AAV)Repタンパク質の定量キット AAV Rep ELISA Kit

掲載日情報:2019/08/16 現在Webページ番号:69127

細胞または組織ライセート中のアデノ随伴ウイルス(Adeno-Associated Virus:AAV)Repタンパク質をサンドイッチ法により検出および定量するELISAキットです。組換えAAVのウイルス産生量の確認に有用です。

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本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。


標準曲線の例

標準曲線の例

アデノ随伴ウイルス(Adeno-Associated Virus:AAV)とは

アデノ随伴ウイルス(Adeno-Associated Virus:AAV)とは (クリックで開閉します)

アデノ随伴ウイルス(AAV)は、一本鎖の非エンベロープDNAウイルスのうち最も小さいウイルス群である、パルボウイルス科のファミリーに属します。現在までに11種類のAAVセロタイプが報告されています。AAVゲノムは、プラス鎖またはマイナス鎖のいずれかの約4.7kbの一本鎖デオキシリボ核酸(ssDNA)から成り、DNA鎖の両端にある逆方向末端反復(Inverted Terminal Repeat:ITR)と、Cap(Capsid)およびRep(Replication)の2つのオープンリーディングフレーム(ORF)で構成されます。Capコード領域は、キャプシドタンパク質VP1、VP2、およびVP3のオーバーラップしたヌクレオチド配列を含み、それぞれ相互作用して1つの正20面体キャプシド構造を形成します。

ゲノムの5 '末端には、p5とp19と呼ばれる2つのプロモーターがあり、そこから長さの異なる2つのオーバーラップしたmRNAを産生します。各mRNA配列はイントロンを含み、スプライシングの有無により、4つの異なるmRNAひいては4種類のRepタンパク質、Rep78、Rep68、Rep52、Rep40をもたらします(下図参照)。Rep78およびRep68は、ITRのヘアピン構造に結合し、ヘアピン内の末端解離部位を切断し、AAVゲノムの組み込みに必要であることが示されました。4つのRepタンパク質はすべてヘリカーゼ活性をもち、ATPへの結合が可能であり、またp40プロモーターからの転写を増加や、p5およびp19プロモーターの両方から転写を減少することが示されています。

AAVゲノムの概略図

AAVゲノムの概略図



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特長

  • セロタイプに関係なく、4種類すべてのAAV Repタンパク質が測定できます。
  • 測定試料:細胞/組織ライセート
  • 必要試料量:100μl/well
  • 測定回数:96アッセイ
  • 測定範囲:31.25~2,000 pg/ml
  • 感度:30 pg/ml
  • 測定方法:比色法
  • 測定波長:450 nm

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使用例

トランスフェクトした293細胞におけるRepタンパク質の検出

トランスフェクトした293細胞におけるRepタンパク質の検出
pAAV-RC2 Vector(#VPK-422)を用いて一過性トランスフェクト、またはモックトランスフェクトした細胞を試料とし、48時間後にRIPAバッファーで溶解して本製品によりタンパク質濃度を測定した。

Neg:細胞ライセート非存在下
Mock:モックトランスフェクトした細胞ライセート(600 ng)
AAV2-Rep:AAV2pAAV-RC2トランスフェクト細胞ライセート(600 ng)


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キット内容

  • Anti-AAV Rep antibody coated plate (96-well)
  • Biotinylated anti-AAV Rep antibody
  • Streptavidin-enzyme conjugate
  • AAV Rep standard
  • Assay diluent
  • Wash buffer
  • Substrate solution
  • Stop solution

測定にはマイクロプレートリーダーが必要です。


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価格表

[在庫・価格 :2024年04月26日 00時00分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。
詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
  • 価格
  • 在庫
  • 法規制等
納期 文献数
AAV Rep ELISA Kit(96 assays)
1週間程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
法規制等 医薬用外劇物
保存条件 4℃,-20℃,-80℃ 法規備考
掲載カタログ

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AAV Rep ELISA Kit(96 assays)

文献数: 0

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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