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アデノ随伴ウイルスフリーの発現システム AAV Helper Free Expression System

掲載日情報:2020/06/12 現在Webページ番号:64223

アデノウイルスを用いることなく,組換えアデノ随伴ウイルス(recombinant AAV)粒子を安全に作製することができるシステムです。8種類のウイルスセロタイプからなるAAV Rep-Capプラスミドと8種類のAAV発現ベクターからお好みの組み合わせで選択し,目的の発現システムを構築できます。

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本製品は,大学・官公庁の研究所・非営利機関にご所属の方のみご購入が可能です。

Cell Biolabs社のAAV Helper Free System

AAV Helper Free System図

Cell Biolabs社のAAV Helper Free Expression Systemでは,組換えアデノ随伴ウイルスの作製に必要となるアデノウイルス遺伝子(E2A,E4,VA RNA)はpHelperプラスミドに含まれており,またE1遺伝子は宿主の293細胞の恒常的な発現により供給されます。また,AAV-2のITRを含むウイルスベクターからrep遺伝子とcap遺伝子を除き,pAAV-RCプラスミドに組み込むことにより,ウイルスゲノムへの目的遺伝子の挿入を可能にしています。


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特長

  • ヘルパーウイルスを使用しないため,より安全で簡便な遺伝子導入が行えます。
  • 8種類のAAV Rep-Capプラスミドと8種類のAAV発現ベクターは,それぞれ個別でもご購入いただけます。
  • すべてのベクターは個別包装されているので,コンピテントセルを用いて増幅することが可能です。
  • AAV発現ベクターは選択マーカーの違いや,プロモーターレス,shRNA用,トランスフェクション効率に優れたscAAV (self-complementary AAV)(下図参照)が用意されています。

Wang Z.,et al., Gene Ther., 10, 2105-2111(2003).

ssAAVとscAAVの比較

ssAAVとscAAVの比較

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AAV-DJ / AAV-DJ/8の特長

  • AAV-DJは,DNAファミリーシャッフリングによって8種類の異なる天然型セロタイプ由来のハイブリッドカプシドを形成することにより,in vitroにおいて高い感染率を実現しています(下表参照)。
  • AAV-DJの変異型のAAV-DJ-8は,AAV- 8およびAAV-9と同様に,in vivoにおいて脳および他の組織中に取り込みを増大させます

Grimm D.,et al.,J. Virol., 82(12), 5887~5911(2008).

カプシドDNAファミリーシャッフリング

カプシドDNAファミリーシャッフリングによるAAV-DJの作製

各AAVセロタイプの相対感染率(AAV-2の感染率を100とした場合の相対値)(ND : not determined)

Cell LineCell or Tissues SourceAAV-1AAV-2AAV-3AAV-4AAV-5AAV-6AAV-8AAV-9AAV-DJAAV-DJ/8
Huh-7Hu Liver131002.500.1100.705000.2
HEK293Hu Kidney251002.50.10.150.70.15000.3
HeLaHu Cervix310020.16.710.20.16670.2
HepG2Hu Liver310016.70.31.750.3ND1,2500.5
Hep1AMs Liver201000.210.110.204000.1
911Hu Retina17100110.20.1170.1ND5000
CHOHm Ovary100100141.43335010125,0005
COSSi Kidney33100333.351420.55000.3
MeWoHu Skin10100200.36.71010.22,8571
NIH3T3Ms Fibroblasts101002.92.90.3100.3ND5000.1
A549Hu Lung1410020ND0.5100.50.11,0000.1
HT1180Hu Fibroblasts20100100.10.3330.50.13330.2
MonocytesHu Primary Monocytes1,111100NDND1251429NDND100ND
Immature DCHu Monocyte-derived DC2,500100NDND2222,857NDND200ND
Mature DCHu Monocyte-derived DC2,222100NDND3333,333NDND100ND

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使用例

Glyco-SPOT DNA Repair Assay Kitの使用例1

AAV2-GFPの作製と形質導入
A:トランスフェクション前の293AAV細胞
B:トランスフェクション後48時間経過の293AAV細胞
C:トランスフェクション後48時間経過の293AAV細胞のGFPの発現
D:感染後48時間経過の293AD細胞のGFPの発現

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キット内容

AAV Helper Free
Complete Expression System
AAV Helper Free
Packaging System
pAAV expression vector8種類から選択-
pAAV Rep-Cap plasmid8種類から選択
pHelper vector
pAAV-GFP control vector

●:共通キットコンポーネント

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AAV Helper Free Complete Expression / Packaging Systemベクター単品の商品コード早見表

*3 pAAV-DJ / pAAV-DJ/8製品は,大学・官公庁の研究所・非営利機関にご所属の方のみご購入が可能です。

AAV Rep-Cap Plasmid (Serotype-Specific)
pAAV-
DJ*3
pAAV-
DJ/8*3
pAAV-
RC1
pAAV-
RC2
pAAV-
RC3
pAAV-
RC4
pAAV-
RC5
pAAV-
RC6
VPK-420-DJVPK-420-DJ-8VPK-421VPK-422VPK-423VPK-424VPK-425VPK-426
AAV Helper Free Complete Expression System*2AAV Helper Free Packaging System*1VPK-400-DJVPK-400-DJ-8VPK-401VPK-402VPK-403VPK-404VPK-405VPK-406
pAAV Expression VectorpAAV-MCSVPK-410VPK-410-DJVPK-410-DJ-8VPK-410-SER1VPK-410-SER2VPK-410-SER3VPK-410-SER4VPK-410-SER5VPK-410-SER6
pAAV-IRES-PuroVPK-415VPK-415-DJVPK-415-DJ-8VPK-415-SER1VPK-415-SER2VPK-415-SER3VPK-415-SER4VPK-415-SER5VPK-415-SER6
pAAV-IRES-NeoVPK-416VPK-416-DJVPK-416-DJ-8VPK-416-SER1VPK-416-SER2VPK-416-SER3VPK-416-SER4VPK-416-SER5VPK-416-SER6
pAAV-IRES-HygroVPK-417VPK-417-DJVPK-417-DJ-8VPK-417-SER1VPK-417-SER2VPK-417-SER3VPK-417-SER4VPK-417-SER5VPK-417-SER6
pAAV-IRES-GFPVPK-418VPK-418-DJVPK-418-DJ-8VPK-418-SER1VPK-418-SER2VPK-418-SER3VPK-418-SER4VPK-418-SER5VPK-418-SER6
pAAV-IRES-BsdVPK-419VPK-419-DJVPK-419-DJ-8VPK-419-SER1VPK-419-SER2VPK-419-SER3VPK-419-SER4VPK-419-SER5VPK-419-SER6
pAAV-MCS PromoterlessVPK-411VPK-411-DJVPK-411-DJ-8VPK-411-SER1VPK-411-SER2VPK-411-SER3VPK-411-SER4VPK-411-SER5VPK-411-SER6
pscAAV-MCSVPK-430VPK-430-DJVPK-430-DJ-8VPK-430-SER1VPK-430-SER2VPK-430-SER3VPK-430-SER4VPK-430-SER5VPK-430-SER6
pHelper Vector340202Complete Expression / Packaging Systemに共通*1,*2
AAV Control PlasmidpAAV-GFPAAV-400

表の見方
AAV Helper Free Packaging Systemには,AAV Rep-Cap Plasmidのセロタイプ8種類の中の1種類,pHelper Vector(#340202)およびControl Plasmid AAV-GFP(#AAV-400)を含んでいます。AAV Helper Free Complete Expression Systemは,これらに加えてpAAV Expression Vector 8種類の中の1種類を含んでいます。

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pHelper vector / pAAV-GFP control vectorのベクターマップ

pHelper Vector Map

pHelper vector:各キット共通
1~5,336: Adeno E2A
5,337~8,537: Adeno E4
8,535~9,280: Adeno VA
10,182~11,042: Ampicllin resistance

pAAV-GFP control vector Map

pAAV-GFP control vector:各キット共通
1~141: Left ITR
150 ~812: CMV promoter
820~1,312: human β-globin intron
1,335~2,075: GFP
2,134~2,612: PolyA
2,652~2,792: Right ITR
3,709~4,566: Ampicllin resistance



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AAV Helper Free Complete Expresion Systemの価格

AAV-1 Helper Free Expression Complete System

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AAV-5 Helper Free Bicistronic Expression System (Puro)
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AAV-6 Helper Free Expression Complete System

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AAV-6 Helper Free Bicistronic Expression System (GFP)
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AAV-6 Helper Free Bicistronic Expression System (Neo)
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AAV-6 Helper Free Expression System
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AAV-6 Helper Free Promoterless Expression System
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AAV-DJ Helper Free Expression Complete System

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AAV-DJ Helper Free Bicistronic Expression System (Hygro)
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AAV-DJ Helper Free Expression System
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AAV-DJ Helper Free Promoterless Expression System
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scAAV-DJ Helper Free Expression System
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AAV-DJ Helper Free Bicistronic Expression System (GFP)

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説明文 ※営利団体・企業(Commercial Entities)にご所属の方は,ご購入前にライセンス契約の締結が必要です。
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AAV-DJ Helper Free Expression System

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AAV-DJ Helper Free Promoterless Expression System

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AAV-DJ/8 Helper Free Expression Complete System

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AAV-DJ/8 Helper Free Bicistronic Expression System (GFP)
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AAV-DJ/8 Helper Free Bicistronic Expression System (Hygro)
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AAV-DJ/8 Helper Free Bicistronic Expression System (Neo)
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AAV-DJ/8 Helper Free Bicistronic Expression System (Puro)
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AAV-DJ/8 Helper Free Expression System
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AAV-DJ/8 Helper Free Promoterless Expression System
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scAAV-DJ/8 Helper Free Expression System
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AAV-DJ/8 Helper Free Bicistronic Expression System (Blasticidin)

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AAV-DJ/8 Helper Free Bicistronic Expression System (GFP)

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AAV-DJ/8 Helper Free Bicistronic Expression System (Hygro)

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AAV-DJ/8 Helper Free Bicistronic Expression System (Neo)

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AAV-DJ/8 Helper Free Bicistronic Expression System (Puro)

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AAV-DJ/8 Helper Free Expression System

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AAV-DJ/8 Helper Free Promoterless Expression System

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scAAV-DJ/8 Helper Free Expression System

文献数:0

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AAV Helper Free Packaging Systemの価格

既に目的遺伝子を含むAAVコンストラクトをお持ちの方にお勧めします。

[在庫・価格 :2020年11月27日 12時51分現在]

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AAV-1 Helper Free Packaging System
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AAV-2 Helper Free Packaging System
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AAV-3 Helper Free Packaging System
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AAV-4 Helper Free Packaging System
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AAV-5 Helper Free Packaging System
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AAV-6 Helper Free Packaging System
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AAV-DJ Helper Free Packaging System
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AAV-DJ/8 Helper Free Packaging System
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[在庫・価格 :2020年11月27日 12時51分現在]

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AAV-1 Helper Free Packaging System

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AAV-2 Helper Free Packaging System

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AAV-3 Helper Free Packaging System

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AAV-4 Helper Free Packaging System

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AAV-5 Helper Free Packaging System

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AAV-6 Helper Free Packaging System

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AAV-DJ Helper Free Packaging System

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AAV-DJ/8 Helper Free Packaging System

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AAV Rep-Cap Plasmid (Serotype-Specific)の価格

既に別のAAVセロタイプのAAV packaging systemをお持ちの方にお勧めします。

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pAAV-RC2 Vector
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pAAV-RC3 Vector
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pAAV-RC4 Vector
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pAAV-RC5 Vector
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pAAV-RC6 Vector
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pAAV-DJ Vector
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pAAV-DJ/8 Vector
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[在庫・価格 :2020年11月27日 12時51分現在]

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pAAV-RC1 Vector

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pAAV-DJ Vector

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pAAV-DJ/8 Vector

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pAAV Expression Vectorの価格

既に別のAAVセロタイプのAAV Packaging Systemをお持ちで,別のプロモーターまたは選択マーカーで利用されたい場合にお勧めします。

[在庫・価格 :2020年11月27日 12時51分現在]

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詳細 商品名
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pAAV-MCS Expression Vector
1週間程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 2
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pAAV-IRES-Bsd Expression Vector
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pAAV-IRES-GFP Expression Vector
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pAAV-IRES-Hygro Expression Vector
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pAAV-IRES-Neo Expression Vector
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pAAV-IRES-Puro Expression Vector
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pAAV-MCS Promoterless Expression Vector
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pscAAV-MCS Expression Vector
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[在庫・価格 :2020年11月27日 12時51分現在]

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pAAV-MCS Expression Vector

文献数:2