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脂質キュービック相法による膜タンパク質結晶化キット LCP Mixer Kit

掲載日情報:2019/07/19 現在Webページ番号:68791

脂質キュービック相(LCP:Lipidic Cubic Phase)法による膜タンパク質結晶化を手動で行うためのデバイスとシリンジのセットです。また、関連製品としてLCP形成用脂質および結晶化条件スクリーニング用試薬キットもあります。

LCP Mixer Kit製品外観

脂質キュービック相(LCP:Lipidic Cubic Phase)法とは

脂質キュービック相(LCP:Lipidic Cubic Phase)法とは(クリックで開閉します)

脂質と水溶液を混合して脂質キュービック相(LCP:Lipidic Cubic Phase)を形成し、そこでタンパク質を結晶化させるLCP法は、膜タンパク質の結晶化のための重要な方法となっています。脂質モノオレインは、安定したLCPを形成させるための第一の選択肢となっており、ここ数年間で、短鎖長の脂質7.7 MAG4~7、7.8 MAG6~8、7.9 MAG5~7がますます一般的になり、最近ではシリアルフェムト秒結晶学(LCP-SFX)1~3において高粘性脂質キュービック相法が適用されています。これは、以下のような利点により、よりLCP法の成功率を高めることが可能です。

  • 結晶を含む粘性LCPを直接XFEL(X線自由電子)ビームに送り込むことにより、液体インジェクターと比較して試料の消費量を低減することができる。
  • LCPで成長したもともとの小さい結晶を利用できる。
  • LCPからのトリッキーな結晶のマウントを避けることができる。

参考文献

  1. Nogly, et al., Nat. Commun., 7, 12314 (2016).
  2. Zhu, et al., Adv. Exp. Med. Biol., 922, 151 (2016).
  3. Batyuk, et al., Sci. Adv., 2, e1600292 (2016).
  4. Coincon, et al., Nat. Struct. Mol. Biol., 23, 248 (2016).
  5. Li, et al., Nat. Commun., 6, 10140 (2015).
  6. Fowler, et al., Structure, 23, 290 (2015).
  7. Caffrey, Acta Cryst. F., 71, 3 (2015).
  8. Li, et al., Nature, 497, 521 (2013).
  9. Misquitta, et al., Journal of Structural Biology, 148, 169 (2004).

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関連動画

使用法ビデオ

"Crystallizing Membrane Proteins for Structure Determination using Lipidic Mesophases", Martin Caffrey and Christopher Porter, JoVE, id1712 (2010).

LCP Mixerの使用法
(画像をクリックすると、別ウインドウでご覧いただけます。)


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特長

  • シリンジの組み立てとデバイスへの取り付けが簡単で手間がかかりません。
  • 操作は簡単です。
  • ニードルをセットし試料を混合後、すぐに使用可能なLCPが形成されてオス側のシリンジ内に入るため、損失はほとんどありません。
  • LCPが形成される直前に生じる軽い曇りや、その他のシリンジ内での変化を容易に確認することができます。
  • シリンジを氷上に数秒間置くと冷却できます。これはLCP形成に役立ちます(17°Cを推奨)。
  • 25~500μlのすべてのハミルトン社製シリンジと互換性があります。
  • ニードルが若干詰まっている場合、それが感覚で分かるため、自動ミキサーを用いるよりもシリンジを割ってしまう危険性が少なくなります。

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キット内容

  • Mixer
  • ハミルトン社製シリンジ(×2)

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関連製品

LCP形成用脂質

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LCP脂質 構造 商品コード 包装
Monoolein 9.9 MAG X-LCP-101構造式 X-LCP-101 1 g
7.7 MAG 7.7MAG X-LCP-105 100 mg
7.8 MAG 7.8MAG X-LCP-106 100 mg
7.9 MAG 7.9MAG X-LCP-107 100 mg
Monopalmitolein 9.7 MAG Monopalmitolein 9.7 MAG X-LCP-102 1 g
Monovaccenin 11.7 MAG Monovaccenin 11.7 MAG X-LCP-103 100 mg
Monovaccenin 11.9 MAG Monovaccenin 11.9 MAG X-LCP-104 1 g

JBScreen LCP

LCP法を用いた結晶化条件の効率的なスクリーニング用に設計された96種類の溶液のセットです。上記のLCP形成用脂質はそれぞれ、JBScreen LCPを用いたで結晶化において安定した脂質キュービック相を形成できます。溶液の96条件は、192種の内在性膜タンパク質の条件検討から得られたもので、in meso法によって結晶後、構造が確認されています。溶液セットは、沈殿剤の濃度および種類によって番号付けられており、組成中にカコジル酸を含んでいません。
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品名 商品コード 処理可能回数
JBScreen LCP CS-340 4×24 solutions (10 ml each)
JBScreen LCP HTS CS-213L 96 solutions (1,7 ml each)

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(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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