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培養細胞中のNOを測定するキット OxiSelect Intracellular Nitric Oxide(NO) Assay Kit (Fluorometric)

掲載日情報:2019/05/31 現在Webページ番号:68778

培養細胞内の一酸化窒素(NO, Nitric oxide)、または一酸化窒素シンターゼ(NOS, Nitric oxide synthase)活性を蛍光法により迅速かつ高感度で測定するキットです。

使用例 RAW 264.7細胞におけるNOS誘導の測定

RAW 264.7細胞を96-well plateに100,000 cells/wellで播種した。50 ng/ml LPSと10 ng/ml IFN-γで20時間処理し、NOSを誘導した。

蛍光プレートリーダー(2時間インキュベーション:
エンドポイント測定)によるNOSの測定

  • 左:ネガティブコントロール(NOS誘導なし)
  • 中央:NOS誘導
  • 右:NOS誘導後、50μM L-NNAで2時間処理

蛍光顕微鏡によるNOS誘導の検出

  • 左:ネガティブコントロール(NOS誘導なし)
  • 右:NOS誘導

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活性窒素(RNS, Reactive nitrogen speicies)と一酸化窒素(NO)

活性窒素種(RNS, Reactive nitrogen speicies)と酸化窒素(NO)(クリックで開閉します)

活性窒素種(RNS, Reactive nitrogen speicies)および活性酸素種(ROS, Reactive oxygen speicies)は共に作用して細胞を損傷し、またいくつかの疾病病因にも関与しています。RNSは、一酸化窒素シンターゼ(NOS, Nitric oxide synthase)とNADPHオキシダーゼ(NADPH oxidase)の媒介により生成される一酸化窒素(NO)とスーパーオキシドアニオン(O2-)由来の分子です(図1)。NOは、血管疾患、糖尿病、腎虚血、アテローム性動脈硬化症、炎症性疾患およびがんのメディエーターであることが実証されています。しかし、その半減期は非常に短いため、NOおよびその生理学的役割の研究は困難でした。

図1 NOとRNS生成で誘導される反応


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特長

  • 耐光性、pH安定性に優れたNO特異的蛍光プローブを用いています。
  • 測定方法:蛍光
  • 測定機器:フローサイトメーター、蛍光顕微鏡、蛍光プレートリーダー
  • 測定波長:励起 480 nm/蛍光 530 nm(蛍光プレートリーダー:エンドポイント/カイネティック)
    FITCフィルターセット(蛍光顕微鏡)

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測定原理

キットに含まれる細胞透過性のNitric oxide fluorometric probeが細胞内に受動的に拡散し、細胞内エステラーゼによって脱アセチル化され、非蛍光性中間物質を生成します。この非蛍光性中間物質は、細胞内NOによってすぐに酸化され、高蛍光性のトリアゾロ-フルオレセイン類似体に変換されます。この際に生じる蛍光強度は、細胞質内のNO濃度に比例します(検出限界~3 nM)。

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キット内容

  • 500× Nitric oxide fluorometric probe
  • 5× Cell lysis buffer
  • NOS inhibitor, L-NNA(Cas No. 2149-70-4、M.W. 219.20)

測定にはフローサイトメーター、蛍光顕微鏡または蛍光プレートリーダーが必要です。

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関連製品

関連製品(クリックで開閉します)

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測定項目 NO(Nitric oxide) ROS(Reactive oxygen spiecies)
品名 OxiSelect In Vitro Nitric Oxide (Nitrite/Nitrate) Assay Kit OxiSelect Intracellular ROS Assay Kit
(Green Fluorescence)

OxiSelect In Vitro ROS/RNS Assay Kit
(Green Fluorescence)
測定方法 比色 蛍光 蛍光
商品コード STA-802 STA-342 STA-347
アッセイ数 100 / 500 assays 96 / 5×96 assays 96 / 5×96 assays
測定試料 血清、血漿、尿、唾液、細胞ライセート、
細胞培養上清
培養細胞 血清、血漿、尿、細胞ライセート、
細胞培養上清
測定波長 405~412 nm 励起 480~490 nm
/蛍光 515~630 nm
励起 530~570 nm
/蛍光 590~600 nm
製品概要 試料中のNitric Oxide(NO、一酸化窒素)の酸化物であるNitrite / Nitrate(NO2- / NO3-、亜硝酸/硝酸塩)を測定することにより、一酸化窒素(NO、Nitric oxide)の総量を定量できるキット。 細胞透過性プローブDCFH-DAを用いて、細胞中の活性酸素種(ROS:Reactive oxygen species)を迅速かつ高感度に測定できる細胞ベースアッセイキット。 活性酸素種ROS(reactive oxygen species)および活性窒素種(RNS)を緑色蛍光により測定するキット。

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価格

[在庫・価格 :2024年04月27日 00時00分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。
詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
  • 価格
  • 在庫
  • 法規制等
納期 文献数
OxiSelect Intracellular Nitric Oxide (NO) Assay Kit (Fluorometric) (96assays)
1週間程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 14
説明文
培養細胞内の一酸化窒素(NO, Nitric oxide),または一酸化窒素シンターゼ(NOS, Nitric oxide synthase)活性を測定するキット。
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 -20℃,暗所保存 法規備考
掲載カタログ ニュース2021年9月15日号 p.12

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OxiSelect Intracellular Nitric Oxide (NO) Assay Kit (Fluorometric) (5×96assays)
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説明文
培養細胞内の一酸化窒素(NO, Nitric oxide),または一酸化窒素シンターゼ(NOS, Nitric oxide synthase)活性を測定するキット。
別包装品 別包装品あり
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掲載カタログ ニュース2021年9月15日号 p.12

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[在庫・価格 :2024年04月27日 00時00分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。

OxiSelect Intracellular Nitric Oxide (NO) Assay Kit (Fluorometric) (96assays)

文献数: 14

説明文 培養細胞内の一酸化窒素(NO, Nitric oxide),または一酸化窒素シンターゼ(NOS, Nitric oxide synthase)活性を測定するキット。
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 -20℃,暗所保存 法規備考
掲載カタログ ニュース2021年9月15日号 p.12

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OxiSelect Intracellular Nitric Oxide (NO) Assay Kit (Fluorometric) (5×96assays)

文献数: 14

説明文 培養細胞内の一酸化窒素(NO, Nitric oxide),または一酸化窒素シンターゼ(NOS, Nitric oxide synthase)活性を測定するキット。
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 -20℃,暗所保存 法規備考
掲載カタログ ニュース2021年9月15日号 p.12

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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