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高感度かつ5分でマウスモノクローナル抗体のアイソタイプを同定! IsoMax Rapid Mouse Monoclonal Isotyping Kit

掲載日情報:2020/07/31 現在Webページ番号:68197

マウスモノクローナル抗体のクラスおよびサブクラスを決定するための、高感度(ELISAと同等)かつ迅速な(測定時間はわずか5分)ラテラルフローアッセイベースのアイソタイピングキットです。アイソタイプIgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3、IgA、およびIgMを同定できます。
本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。


IsoMax Rapid Mouse Monoclonal Isotyping Kitの2種類cassette

キットに含まれる2種類のアイソタイピングカセットの検出イメージ

抗体のアイソタイプの同定の必要性について

アイソタイプの決定は、最良のイムノグロブリン精製法を選択するための前提条件です。
たとえば、IgAとIgMはサイズ(ゲルろ過)またはイムノアフィニティサポートカラムで精製するのが最適ですが、IgG2aとIgG2bはpH 7~8のプロテインAクロマトグラフィーで精製できます。
アイソタイプの同定は、抗体がペプシンまたはパパインによって消化される場合にも必要です。各アイソタイプは、酵素による消化に対して様々な感度を示すからです。


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特長

  • 従来のELISAでは4~6時間かかった測定時間を、わずか5分に短縮でき、時間の節約になります。
  • 測定試料:組織培養上清、マウス腹水
  • 各キットには、2種類のカセット(IgG1、IgG2a、およびIgG2b検出用カセットと、IgG3、IgA、およびIgM検出用カセット)が、それぞれ5パック(#KDA-005)または10パック(#KDA-010)含まれています。
  • 精製したモノクローナル抗体の純度の評価や、購入したモノクローナル抗体の純度の確認にも使用できます。カセット上に(コントロールの他に)ラインが1本表示された場合は純度が高いことを示し、複数表示された場合は他のアイソタイプとのコンタミネーションを示します。

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測定原理

特定のアイソタイプ抗体を含む適切に希釈された試料をカセットのウェルに滴下すると、メンブレン上の金コロイドと特定のクラスおよびサブクラスの可溶性複合体が形成されます。
複合体はメンブレン上を移動し、抗アイソタイプおよび抗クラス特異的抗体が染み込んだラインに結合して発色します。
カセットの「C」とマークされたラインの発色により、キットが適切に機能しているかどうかを判定できます(内部ポジティブコントロール)。
通常(抗体濃度が10 ng/mlの場合)、抗体を添加後5~10分でカセットを読み取ることで最良の結果が得られます。10分以降に確認された結果は無効です。


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使用例:本製品とELISAフォーマットのアイソタイピングアッセイとの比較

モノクローナル抗体のアイソタイピング結果を比較したところ、2つのアッセイフォーマット間で卓越した相関関係が示された。
また、ELISA(図2および3)はコントロール、ELISAプレート、および基質を必要とし、プレートをコーティングしてブロッキング後、12種類の異なる抗体を用いてアッセイを行うのに8時間を要した。一方、本製品(図1)のピペッティング時間は10分で、20のアッセイすべてを同時に実行した。各カセットは5分で読み取れたため、結果のスコアリングを含めた総時間は20分未満であった。
さらに、各モノクローナル抗体に存在するコンタミネーションの存在も、本製品で正確に確認できた。アイソタイプやサブクラスの形で混入している不純物は、ELISAのデータとよく相関していた。これは、本製品により試験したモノクローナル抗体の純度も確認できることを示している。


本製品(IsoMax Rapid Mouse Monoclonal Isotyping Kit)の結果

図1. 本製品(IsoMax Rapid Mouse Monoclonal Isotyping Kit)の結果


比較したELISAフォーマットアッセイ

図2. 比較したELISAフォーマットアッセイ


ELISAフォーマットアッセイのデータ

図3. ELISAフォーマットアッセイのデータ


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キット内容

  • Cassette with a test strip impregnated with anti-IgG1, anti-IgG2a and anti-IgG2b specific antibodies
  • Cassette with a test strip impregnated with anti-IgG3, anti-IgA and anti-IgM specific antibodies
  • Sample diluent

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価格

[在庫・価格 :2024年04月20日 20時55分現在]

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IsoMax Rapid Mouse Monoclonal Isotyping Kit - 5 pack
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マウスモノクローナル抗体のクラスおよびサブクラスを決定するための,高感度(ELISAと同等)かつ迅速な(測定時間はわずか5分)ラテラルフローアッセイベースのアイソタイピングキット。2種類のカセット(IgG1,IgG2a,およびIgG2b検出用カセットと,IgG3,IgA,およびIgM検出用カセット)が5パックとSample diluentが含まれている。
別名:Isotyping kit,mouse subclass determination,IgG isotype,immunoglobulin isotyping
法規制等
保存条件 法規備考
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IsoMax Rapid Mouse Monoclonal Isotyping Kit - 10 pack
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マウスモノクローナル抗体のクラスおよびサブクラスを決定するための,高感度(ELISAと同等)かつ迅速な(測定時間はわずか5分)ラテラルフローアッセイベースのアイソタイピングキット。2種類のカセット(IgG1,IgG2a,およびIgG2b検出用カセットと,IgG3,IgA,およびIgM検出用カセット)が10パックとSample diluentが含まれている。
別名:Isotyping kit,mouse subclass determination,IgG isotype,immunoglobulin isotyping
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[在庫・価格 :2024年04月20日 20時55分現在]

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IsoMax Rapid Mouse Monoclonal Isotyping Kit - 5 pack

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別名:Isotyping kit,mouse subclass determination,IgG isotype,immunoglobulin isotyping
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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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