HOME
>
受託サービス・特注品
>
遺伝子合成(DNA・RNA・人工遺伝子・アンチセンス)
>
DNA合成
>
GenExact 一本鎖DNA合成受託サービス
HOME
>
受託サービス・特注品
>
遺伝子改変動物
>
遺伝子改変動物作製
>
GenExact 一本鎖DNA合成受託サービス
HOME
>
受託サービス・特注品
>
ゲノミクス・エピジェネティクス
>
ゲノム編集
>
GenExact 一本鎖DNA合成受託サービス
CRISPRノックインに有用です! GenExact 一本鎖DNA合成受託サービス
掲載日情報:2020/06/12 現在Webページ番号:68131

高純度、高精度の一本鎖DNA(ssDNAまたはssODN)を合成する受託サービスです。
CRISPRによる遺伝子ノックイン(KI)でのHDR(相同組換え修復)テンプレートへの一本鎖DNAの使用は、効率的なゲノム編集をもたらし、また目的部位以外(オフターゲット)へのノックインを抑制します。また一本鎖DNAは、in vitro転写(IVT)のテンプレートにも使用されます。
※本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。
追加しました。
- CRISPRによる遺伝子ノックインでのHDRテンプレートへの一本鎖DNA使用の利点
- サービスの特長
- サービスの種類/価格/納期の目安
- CRISPRによる遺伝子編集のメカニズムについて
- 関連資料
- 納品物および品質確認情報
- ご注文方法
- 関連製品:Long ssDNA Preparation Kit for 1.5kb & 3.0kb
CRISPRによる遺伝子ノックインでのHDRテンプレートへの一本鎖DNA使用の利点
- 高い編集効率
- 低い細胞毒性
- オフターゲット効果の減少
- 編集精度の向上
- 初代細胞や幹細胞の編集に最適
- 遺伝子改変動物モデルの作製に最適

CRISPRによる遺伝子ノックインの模式図
追加しました。
サービスの特長
- インサートの長さ:150~5,000 nt
- 合成した一本鎖DNAについてサンガー法シークエンシングにより塩基配列を確認しています。
- 独自の手法により、二本鎖DNA(dsDNA)を検出できないレベルに抑え、塩基損傷を最小限度に抑制します。
- 最大20 μgの合成量で、様々な実験デザインに対応できます。
- テンプレート配列の保管により、同じ配列の再注文に素早く対応します。
- 16年以上にわたる人工遺伝子合成サービスで培った経験とノウハウがあります。
追加しました。
サービスの種類/価格/納期の目安
長 さ | 合成量 | 価 格 | 作業日数の目安* (営業日) |
---|---|---|---|
151~500 nt | 3 μg | \56,000 | 15~18 |
5 μg | \77,000 | ||
10 μg | \112,000 | ||
20 μg | \182,000 | ||
50 μg | \259,000 | ||
100 μg | \336,000 | ||
>100 μg | ご照会 | ||
501~4,000 nt | 3 μg | \112/nt | 18~23 |
5 μg | \140/nt | ||
10 μg | \182/nt | ||
20 μg | \266/nt | ||
50 μg | \420/nt | ||
100 μg | \616/nt | ||
>100 μg | ご照会 | ||
4,000~5,000 nt | ご照会 | ご照会 | ご照会 |
*ご依頼内容により変動しますので、詳しくはお問合せ下さい。
また製品のお届けには、上記の作業日数に加えて4~5日の輸送時間がかかります。
追加しました。
CRISPRによる遺伝子編集のメカニズムについて

CRISPR/Cas9テクノロジーは、標的遺伝子上での適切な二本鎖DNA切断(DSBs)を行うために幅広く用いられています。ガイドRNA(gRNA)は標的DNA上のProtospacer Adjacent Motif(PAM)配列を認識し、Cas9との複合体を形成します。その後、Cas9のエンドンクレアーゼ活性により二本鎖DNAが切断され、その修復のために2種類の機構が引き起こされます。1つはNHEJ(非相同末端結合)で、DSBs部位に挿入または欠損の変異を導入します。もう1つがHDR(相同組換え修復)で、これを利用してドナーDNAを切断部位に挿入することにより、遺伝子ノックインが可能になります。
HDRドナーDNAテンプレートとして、これまで二本鎖DNA(dsDNA)が用いられてきました。近年の研究により、一本鎖DNA(ssDNAまたはssODN)がCRISPRベースの遺伝子挿入、置換および修正において最適であることが示されました。一本鎖DNAは、特に初代細胞や幹細胞の編集、および遺伝子改変動物モデルの開発において、編集効率や特異性の著しい改善、およびオフターゲット効果の減少が示されました。
追加しました。
関連資料
画像をクリックするとPDFをダウンロードできます(英語版)。

A Case Study : Use Single-Stranded DNA Donor Templates (ssDNA or ssODNs) for CRISPR Homology Directed Repair (HDR) Mediated Gene Knock-In
(英語版、6ページ、1 MB)

CRISPR-Cas9 とHDR テンプレートを用いて、初代ヒトT 細胞のハウスキーピング遺伝子RAB11A にGFP 融合タグをノックインした。ssDNA テンプレートを使用した場合(青)、Cas9 とガイドRNA をノックインしないネガティブコントロール(None)と同レベルにオフターゲットを抑制できていることが分かる。
Theodore, L. Roth, et al., Nature, 559(7714), 405~409(2018).[PMID: 29995861]
追加しました。
納品物および品質確認情報
- 一本鎖DNAの凍結乾燥品
- サンガー法シークエンシングによる塩基配列確認
- ゲル電気泳動による純度試験
追加しました。
ご注文方法
詳細については、当社受託・特注品担当までお問い合わせ下さい。
追加しました。
関連製品:Long ssDNA Preparation Kit for 1.5kb & 3.0kb
高い純度で正確な配列を有する長鎖の一本鎖DNA(ssDNA, ~1.5 kb または 1.5~3 kb)を調製できるキットです。本キットで調製した長鎖の一本鎖DNAをドナーDNAとし、CRISPR/Cas9と一緒に導入することで、GFP配列を正確かつ効率よくノックインすることに成功した報告があります。詳細についてはLong ssDNA Preparation Kit for 1.5kb & 3.0kbをご覧下さい。

追加しました。
製品情報は掲載時点のものですが、価格表内の価格については随時最新のものに更新されます。お問い合わせいただくタイミングにより製品情報・価格などは変更されている場合があります。
表示価格に、消費税等は含まれていません。一部価格が予告なく変更される場合がありますので、あらかじめご了承下さい。