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循環腫瘍細胞を特異的に捕捉・検出できる抗体 Anti-Cell Surface Vimentin (CSV) モノクローナル抗体(クローン84-1)

掲載日情報:2020/06/12 現在Webページ番号:68120

Cell-Surface Vimentin(細胞表面ビメンチン:CSV)に対する特異的な抗体です。循環腫瘍細胞(CTC)の特異的な捕捉・検出に使用できます。
本抗体は、米国MD Anderson Cancer CenterからAbnova社が独占的販売のライセンスを受けています。
本抗体などを用いてCTCの特異的な捕捉を行う装置CytoQuest CRについては、こちらをご覧下さい。
本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。


各種EMTマーカー

ヒト大腸がん患者由来のCTCの各種EMTマーカー抗体による検出6)
ヒト大腸がん患者由来の循環腫瘍細胞(CTC)を、抗CSV抗体(クローン84-1、緑色)および既知の各種上皮間葉転換(EMT)マーカー抗体(赤色、それぞれFOXC2、TWIST-2、SNAIL、SLUG、EpCAM、E-cadherin)で検出した。対比染色として、DRAQ5で核染色を行った(青色)。


CSV(細胞表面ビメンチン)とがん研究について

CSVと細胞

ビメンチンは、57 kDaのⅢ型中間径フィラメントを構成するタンパク質で、細胞質構築に関与しています1)。また、細胞内における上皮間葉転換(Epithelial Mesenchymal Transition:EMT)のマーカーとしても知られており、がん細胞ではビメンチンが過剰発現し、がんの進行と相関があります。

細胞表面に移動したビメンチンはCell-Surface Vimentin(細胞表面ビメンチン:CSV)と呼ばれ、細胞接着、遊走および細胞シグナル伝達に関係することが確認されています2)。CSVは、自己免疫疾患、ウイルス感染およびがんの進行に関与するという点で重要です。また、活性化マクロファージや血小板、アポトーシス性Tリンパ球でCSVが発現していることが示され、ヒト好中球の自発的アポトーシスへの関与、炎症性疾患、シグナル伝達への関連が裏付けられました3)。CSVはウイルスの内在化促進によりウイルス増殖に関与するため、抗ウイルス薬の標的とみなされています4)

研究によりCSVはがん特異的なEMTマーカーとして同定され、高侵襲性のがんや肉腫におけるCSV発現と転移性表現型の相関が示されました。EMTが生じている細胞において細胞内から表面へ移行するというビメンチンのユニークな特性を利用し、CSV発現細胞の検出および同定によりがん細胞を特異性高く単離できることが示されました5, 6, 7)。さらに現在、ビメンチンの特性を利用したがん治療の可能性の探求が行われています8)


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各種がん由来細胞株におけるCSV(Cell-Surface Vimentin)の発現量

由来動物種細胞株名CSV発現量由来動物種細胞株名CSV発現量
乳がんヒトMCF7大腸がんヒトDLD-1++
SKBR3GEO++
MDA-MB-231OS-187++
MDA-MB-453SW620
MDA-MB-458++SW480
マウス4T1HCT-116
脳腫瘍ヒトSKNAS++HT-29++
SKNBE2+++Caco-2
NGPマウスCT-26
SH-SY5Y++肝臓がんマウスAMC14++
LAN5++膀胱がんヒトRT4V6
KCNT24++
U251膵臓がんヒトPANC-1++
マウスDBTMiaPACA-2

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各種がんマーカーの比較

マーカー名CSV
(細胞表面)
Vimentin
(細胞内)
Plastin-3CD44sCD133Cytokeratin
CTCがんマーカー××××
細胞内局在細胞表面細胞質細胞質細胞表面細胞表面細胞質
CTC捕捉×××
CTC検出
EMTマーカー×××
がん幹細胞マーカー×××××
すべてのがん細胞への適用××××

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本抗体の使用例

HPC-1

HPC-1細胞から作成した細胞塊の抗CSV抗体による検出6)
Geltrex(Thermo Fisher Scientific社)をコートしたプレート上でヒト大腸がん由来HPC-1細胞を培養し、三次元細胞塊モデルを作成した。
本抗体(緑色)で検出したところ、細胞塊表面部分の細胞のみで検出された。表面部分の細胞はより進行性なため、侵襲性な表現型であるβ-カテニン(赤)の核内蓄積の増加と相関が見られた。


LM7

蛍光免疫染色例5)
ヒト骨肉腫由来LM7細胞および白血球を、抗CSV抗体(クローン84-1、緑色)および抗CD45抗体(赤色)で検出した。対比染色として、DRAQ5で核染色を行った(青色)。


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CytoQuest CRと本抗体を用いたCTC(循環腫瘍細胞)の捕捉・検出例

膵臓がん患者由来試料からのEMTを起こした細胞とがん幹細胞の検出

試料:7.5 mlの膵臓がん患者由来の肝門静脈血
蛍光免疫染色法:下表のとおり。いずれも対比染色として核をDAPI染色した。
画像中、白矢印で示されていない細胞は白血球
関連抗体セット:上段 #KA4586

画像結果捕捉用抗体蛍光免疫染色で用いた抗体
上段EMTを起こしたCTCを1細胞検出した(画像中の白矢印)。
(PanCK、PLS3、CD45、DAPI
抗EpCAM抗体
(Biotin標識)
抗PanCK抗体
(FITC標識)
抗PLS3抗体
(Alexa Fluor647標識)
抗CD45抗体
(PE標識)
中段EMTを起こしたCTCを1細胞検出した(画像中の白矢印)。
(CSV、EpCAM、CD45、DAPI
抗EpCAM抗体
(Biotin標識)
抗CSV抗体
(FITC標識)
抗EpCAM抗体
(APC標識)
抗CD45抗体
(PE標識)
下段EMTを起こしたCTCおよびがん幹細胞を13細胞検出した(画像中の白矢印)。
(CSV、CD133、CD45、DAPI
抗CSV抗体
(Biotin標識)
抗CSV抗体
(FITC標識)
抗CD133抗体
(Alexa Fluor647標識)
抗CD45抗体
(PE標識)

膵がん

卵巣乳頭漿液性嚢胞腺がん患者由来試料からのCTC捕捉・検出の比較

試料:4 mlの卵巣乳頭漿液性嚢胞腺がん患者由来の末梢血
蛍光免疫染色法:下表のとおり。いずれも対比染色として核をHoechst染色した。
画像中、白矢印で示した細胞がCTC。
関連抗体セット:上段 #KA4439、下段 #KA4819

画像結果捕捉用抗体蛍光免疫染色で用いた抗体
上段CTCを検出できなかった
(PanCK、CD45、Hoechst
抗EpCAM抗体
(Biotin標識)
抗PanCK抗体
(FITC標識)
抗CD45抗体
(PE標識)
下段CTCを5細胞検出した
(CSV、CD45、Hoechst
抗CSV抗体
(Biotin標識)
抗CSV抗体
(FITC標識)
抗CD45抗体
(PE標識)

卵巣がん

転移性去勢抵抗性前立腺がん患者由来試料からのEMTを起こした細胞とがん幹細胞の検出

試料:7.5 mlの転移性去勢抵抗性前立腺がん患者由来の末梢血
蛍光免疫染色法:下表のとおり。対比染色として核をHoechst染色した。
画像中、白矢印で示した細胞がEMTを起こしたCTCおよびがん幹細胞。示していない細胞は白血球。
関連抗体セット:#KA4818

結果捕捉用抗体蛍光免疫染色で用いた抗体
EMTを起こしたCTCおよびがん幹細胞を5細胞検出した
(CSV、CD45、Hoechst
抗CSV抗体
(Biotin標識)
抗CSV抗体
(FITC標識)
抗CD45抗体
(PE標識)

前立腺がん

肺腺がん患者由来試料からのEMTを起こした細胞とがん幹細胞の検出

試料:20 mlの肺腺がん患者由来の胸水
蛍光免疫染色法:下表のとおり。対比染色として核をDAPI染色した。
画像中、白矢印で示した細胞がEMTを起こしたCTC。黄矢印で示した細胞は白血球。

結果捕捉用抗体蛍光免疫染色で用いた抗体
EMTを起こしたCTCおよびがん幹細胞を62細胞検出した
(PanCK、CD45、DAPI
抗CSV抗体
(Biotin標識)
抗PanCK抗体
(FITC標識)
抗CD45抗体
(PE標識)

肺腺がん

多形性膠芽腫患者由来試料からのCTCの検出

試料:4 mlの多形性膠芽腫患者由来の末梢血
蛍光免疫染色法:下表のとおり。いずれも対比染色として核をHoechst染色した。
画像中、白矢印で示した細胞がEMTを起こしたCTC。黄矢印で示した細胞は白血球。
関連抗体セット:上段 #KA4905、下段 #KA4906

画像結果捕捉用抗体蛍光免疫染色で用いた抗体
上段CTCを4細胞検出した
(CSV、GFAP、CD45、Hoechst
抗CSV抗体
(Biotin標識)
抗CSV抗体
(FITC標識)
抗GFAP抗体
(APC標識)
抗CD45抗体
(PE標識)
下段CTCを2細胞検出した
(CSV、EGFRvⅢ、CD45、Hoechst
抗CSV抗体
(Biotin標識)
抗CSV抗体
(FITC標識)
抗EGFRvⅢ抗体
(APC標識)
抗CD45抗体
(PE標識)

膠芽腫

神経芽細胞腫患者試料からのCTCおよびDTC(播種性腫瘍細胞)の濃縮・単離

蛍光免疫染色法:下表のとおり。いずれも対比染色として核をHoechst染色した。
関連抗体セット:#KA4911

画像結果試料捕捉用抗体蛍光免疫染色で用いた抗体
上段CTCを15細胞検出した(画像中の白矢印)。
(CSV、CD45、Hoechst
4 mlの末梢血抗CSV抗体
(Biotin標識)
抗CSV抗体
(FITC標識)
抗CD45抗体
(PE標識)
下段DTCを100細胞以上検出した(画像中の白矢印)。
(CSV、CD45、Hoechst
4 mlの骨髄抗CSV抗体
(Biotin標識)
抗CSV抗体
(FITC標識)
抗CD45抗体
(PE標識)

神経芽細胞腫

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CytoQuest CRと本抗体を用いたCSC(循環がん幹細胞)の捕捉・検出例

多形性膠芽腫患者由来試料からのDBA陽性循環がん幹細胞の単離

試料:4 mlの多形性膠芽腫患者由来の末梢血
蛍光免疫染色法:下表のとおり。抗体の他にマメ科植物由来レクチンDBA(Dolichos biflorus Agglutinin)を用いた。また、対比染色として核をHoechst染色した。
画像中、赤矢印で示した細胞ががん幹細胞。黄矢印で示した細胞は白血球。
関連抗体セット:#KA4908

結果捕捉用抗体蛍光免疫染色で用いたもの
循環がん幹細を6細胞検出した
(DBAK、CD45、Hoechst
抗CSV抗体
(Biotin標識)
DBA
(FITC標識)
抗CD45抗体
(PE標識)

CSC

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参考文献


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価格

[在庫・価格 :2024年05月04日 00時00分現在]

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Anti-Cell-Surface Vimentin(CSV), Mouse-mono(84-1)
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ウエスタンブロット適用サンプル:Cell Lysate
別名:FLJ36605
クローン:84-1
Genbank No: 7431
法規制等
保存条件 -20℃ 法規備考
抗原種 免疫動物 Mouse クラス IgG 標識 Unlabeled
交差性 Human 適用 FCM,IF,Western Blot
クロナリティ Monoclonal フォーマット 性状 吸収処理
掲載カタログ ニュース2019年8月15日号 p.34

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ウエスタンブロット適用サンプル:Cell Lysate, Recombinant Protein
別名:FLJ36605
クローン:30682
Genbank No: 7431
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抗原種 免疫動物 Mouse クラス IgG 標識 Unlabeled
交差性 Human 適用 ELISA,FCM,IF,Western Blot
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別名:FLJ36605
クローン:84-1
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クローン:84-1
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交差性 Human 適用 FCM,IF
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Anti-Cell-Surface Vimentin(CSV), Mouse-mono(84-1)

文献数: 12

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交差性 Human 適用 FCM,IF,Western Blot
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クローン:30682
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Genbank No: 7431
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抗原種 免疫動物 Mouse
交差性 Human 適用 FCM,IF
標識 APC 性状
吸収処理 クラス IgG
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クローン:84-1
Genbank No: 7431
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抗原種 免疫動物 Mouse
交差性 Human 適用 FCM,IF
標識 Biotin 性状
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クローン:84-1
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抗原種 免疫動物 Mouse
交差性 Human 適用 FCM,IF
標識 FITC 性状
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抗原種 免疫動物 Mouse
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クローン:84-1
Genbank No: 7431
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抗原種 免疫動物 Mouse
交差性 Human 適用 FCM,IF
標識 Texas Red 性状
吸収処理 クラス IgG
クロナリティ Monoclonal フォーマット
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