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メーカー：	Horizon社Dharmacon製品 OriGene Technologies TransOMIC Technologies
	Horizon社Dharmacon製品(メーカー略称：DHA)のRNAiコレクション，cDNAコレクション，Yeastコレクションなど，遺伝子機能研究に有用な遺伝子リソースを検索することができます。クローンコレクション検索の使い方はこちら OriGene Technologies社(メーカー略称：ORI)のTrueClone / TrueORF / TrueORF Gold cDNAクローンなど，遺伝子機能研究に有用な遺伝子リソースを検索することができます。クローンコレクション検索の使い方はこちら TransOMIC Technologies社(メーカー略称：TOT)のRNAiコレクション，cDNAコレクション，Yeastコレクションなど，遺伝子機能研究に有用な遺伝子リソースを検索することができます。クローンコレクション検索の使い方はこちら
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HOME> 試薬> 細胞培養> 細胞培養一般試薬> 細胞培養用添加物> FGF2 DISCs

多能性幹細胞の安定した培養を可能にするFGF2徐放性ハイドロゲル FGF2 DISCs

掲載日情報：2022/08/26 現在Webページ番号：67475

ステムカルチャー /
StemCulture Inc.
[メーカー略称：SCU]

FGF2 DISCsはStemBeads FGF2が埋め込まれた生体適合性のハイドロゲルで、約1週間にわたり培地中に一定濃度のFGF2（塩基性線維芽細胞増殖因子、basic fibroblast growth factor）を徐放します。培地中のFGF2が一定濃度に維持されるので、幹細胞の自発的な分化が抑制され多能性が維持されます。DISCsは培地に添加するだけなので取り扱いが簡単で、特別な洗浄操作を必要とすることなく容易に取り除くことができます。DISCsは1週間に1回、継代の際に交換するだけ（培地交換は2～3日に1回）なので時間とコストを大幅に削減できます。

※ 本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

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従来の幹細胞培養における問題点
特長
FGF2徐放能
培地コストと手間の削減
多能性の向上、自発的分化の抑制
操作方法概略
動画 FGF2 DISCs
FAQ
価格

従来の幹細胞培養における問題点

幹細胞の未分化性を維持するために用いられるFGF2は培地中での半減期が約4時間です。そのため毎日の培地交換が必要となります（下左図）。しかし、この毎日の培地交換による成長因子の濃度変動（下右図）は細胞内のシグナル伝達のパターンを変化させ、細胞を不均一な集団にしてしまいます。

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特長

1週間にわたって一定濃度のFGF2を培地に徐放します。
培地交換は週に2～3回、DISCsの交換は1週間に1回で済むので労力と培地のコストが削減できます。
DISCsは簡単に追加したり取り除くことができます。洗浄操作も不要です。
高品質（自発的分化の抑制、多能性の向上）な細胞を維持できます。
様々な幹細胞用の培地と互換性があります。

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FGF2徐放能

図1：FGF2 DISCを添加した培地（2 ml）中のFGF2濃度
7日間にわたり安定して一定濃度のFGF2が徐放されていることが確認された。

図2：FGF2 DISCsの数と、培地量とFGF濃度の関係
2 mlの培地に対してDISCsを1つ加えることで、FGF2濃度は10 ng/mlになる。

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培地コストと手間の削減

FGF2 DISCsは1週間に1回、継代の際に交換するだけ（培地交換は2～3日に1回）なので（図B）、通常の培養スケジュール（図A）と比べて1週間に使用する培地量は約半分となり培地交換の手間も削減されます（図C、D）。

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多能性の向上、自発的分化の抑制

A. FGF2 DISCsを用いて培養したiPS細胞（7継代）において各種幹細胞マーカー（OCT4, SOX2, NANOG）の発現が確認できる。
B. FGF2 DISCsを用いて培養したiPS細胞（15継代）において核型異常は見られない。
C. 従来法（毎日培地交換）に比べて、FGF2 DISCsを用いて培養したiPS細胞では多能性マーカーSSEA-4の発現が高い。
D. 従来法（毎日培地交換）に比べて、FGF2 DISCsを用いて培養したiPS細胞では分化マーカーであるSSEA-1の発現が低い。

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操作方法概略

多能性幹細胞培養の推奨プロトコル

DISCsの容器を70％エタノールで拭き、開封する前にバイオセーフティキャビネットに入れます。
細胞を継代し、培地をウェルに加えます。
滅菌したピンセットを用いて、必要なFGF2徐放量に応じたDISCsを培養ウェルに加えます。

※ DISCsは再水和すると膨潤して透明になります。DISCsに埋め込まれたStemBeadsを顕微鏡で観察することができます。
2～3日ごとに培地のみを交換し、DISCsはウェルに残します（低い吸引力のアスピレーターまたはピペットを使用）。
培養7日後、細胞を新しい培養皿に継代し、新しいDISCsを追加します。
DISCsは低吸引力のアスピレーター用チップを使用して取り除き、バイオハザード用のゴミ箱に捨てることができます。